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PRUEBAS DE EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS DE ALTO RENDIMIENTO

¡Logre éxito con sus
proteínas difíciles de expresar!

  • Hasta x50 mejora en el rendimiento
  • 1000 pruebas en 4 semanas
  • Mejore todas las propiedades de sus proteínas

Contáctanos Habla con nuestros expertos

¡Nuestro servicio de pruebas de expresión de proteínas de alto rendimiento es la solución para superar los desafíos más exigentes con proteínas de difícil expresión! ProteoGenix desarrolló una plataforma HTP dedicada a la optimización de la expresión de proteínas. Nuestra solución: más de 1000 condiciones de expresión cuidadosamente seleccionadas y probadas en paralelo para impulsar su producción de proteínas en poco tiempo.

¿Por qué elegir a ProteoGenix para optimizar la expresión de sus proteínas?

Expresión de proteínas "a la carta"

Diseñamos las condiciones de expresión más adecuadas para cumplir con sus especificaciones.

Ahorre tiempo

Podemos realizar 1000 pruebas en 4 semanas gracias a nuestra plataforma de alto rendimiento totalmente automatizada.

La SOLUCIÓN DEFINITIVA para proteínas difíciles de expresar

¿Una expresión de proteínas desafiante? Nuestro cribado de expresión de proteínas de alto rendimiento supera cualquier reto.

Experiencia única en expresión de proteínas

Hemos expresado más de 1500 proteínas desde 2003.

5 sistemas de expresión

Tenemos un profundo conocimiento de 5 sistemas de expresión: E. coli, B. subtilis, levaduras, baculovirus/células de insecto y células de mamífero.

¡XtenCHOTM incluido!

Nuestro servicio puede incluir nuestro sistema de expresión de mamífero de alto rendimiento.

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Pruebas de expresión de proteínas de alto rendimiento
para proteínas de difícil expresión

ProteoGenix reúne el conocimiento de sus mejores expertos en producción de proteínas para ofrecerle la plataforma más avanzada para la expresión de proteínas de alto rendimiento. Nuestra plataforma de alto rendimiento fue diseñada bajo una regla: “Cuantas más condiciones relevantes probemos, más probabilidades tendremos de encontrar la forma de expresar su proteína con éxito”. Así, nuestra plataforma permite probar 1000 condiciones en 4 semanas para cumplir —o incluso superar— sus requerimientos en términos de:

  • Productividad
  • Pureza
  • Solubilidad
  • Estabilidad
  • Actividad biológica

Lograr estos resultados solo es posible ofreciendo un amplio rango de condiciones de expresión. A continuación, algunos parámetros que ProteoGenix puede variar:

Capacidades en Biología Molecular

Síntesis génica

ILIMITADO

Vectores

ILIMITADO

Péptido señal

250+

Etiqueta de purificación

15+

Etiqueta de solubilidad

15+

Cepas y líneas celulares

Condiciones de cultivo

Temperatura

Condiciones
de inducción

Tamizaje de medios

Método
de extracción

Fermentación

ILIMITADO

Purificación

Purificación

¿Tiene dificultades para optimizar la expresión de proteínas? Contáctese con nuestros gestores de cuenta PhD para desbloquear el potencial de su producción.

Nuestro flujo de trabajo para
la expresión de proteínas de alto rendimiento

Determinación del mejor par hospedador/vector

  • Prueba de múltiples transformantes
  • Selección de los que presentan mejores resultados
  • Pruebas de purificación en el mejor par hospedador/vector
GO/NO GO

Optimización de la expresión de proteínas en matraz

  • Optimización de diversas condiciones de cultivo (temperatura, tiempo de inducción…)
  • Determinación de la mejor estrategia de alimentación
GO/NO GO

Optimización de la purificación de proteínas

GO/NO GO

Optimización de la expresión de proteínas en biorreactor

  • Optimización de los parámetros operativos del fermentador/biorreactor
  • Purificación de proteínas y análisis QC: SDS/page, western

Ejemplo de un proyecto típico

320 PRUEBAS

  • 4 cepas de E. coli
  • 4 líneas celulares de mamíferos
  • 2 etiquetas de purificación
  • 2 síntesis génicas
  • 4 vectores
  • 5 péptidos señal

2 mejores combinaciones de sistemas

1350 PRUEBAS

  • 3 temperaturas
  • 9 condiciones de inducción
  • 5 optimizaciones de purificación
  • 5 métodos de extracción

Selección de la mejor condición de expresión

200 tamizajes de medios

5 mejores condiciones de fermentación

1875 PRUEBAS

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Nuestro proceso de producción de proteínas de alto rendimiento

Paso Contenido Cronograma Entregables
Determinación del par hospedador/vector
  • Síntesis génica incluyendo optimización de codones
  • Subclonación en vectores de expresión
  • Purificación de los mejores resultados
  • A determinar según el proyecto
  • Constructos génicos
  • Informe detallado con todas las pruebas
  • Proteína purificada de la prueba de purificación
Optimización de la expresión de proteínas
  • Optimización de condiciones de cultivo
  • A determinar según el proyecto
  • Muestra de prueba si es requerida Informe detallado
Optimización de la purificación de proteínas
  • Determinación de la mejor estrategia de purificación
  • A determinar según el proyecto
  • Proteína purificada Informe detallado
Desarrollo del proceso
  • Optimización de parámetros de biorreactor Análisis QC
  • A determinar según el proyecto
  • Proteína purificada Informe detallado
Opciones
  • Eliminación de etiquetas vía escisión enzimática
  • Ensayo y eliminación de endotoxinas
  • Producción a escala / Fermentación

Influencia de varios parámetros en la expresión de proteínas

La producción de proteínas difíciles de expresar requiere modificar varios parámetros que pueden influir fuertemente en el rendimiento, pureza, estabilidad, solubilidad y actividad biológica final. Si analizamos más específicamente la productividad, algunos de los parámetros a considerar para la optimización de la expresión de proteínas son:

Sistema de expresión

La elección del mejor sistema de expresión es crucial para la expresión de proteínas. Esta decisión depende de sus requerimientos: alta productividad, plegamiento correcto, modificaciones postraduccionales “humanizadas” o un compromiso entre todas estas necesidades… A continuación, una tabla que explica los parámetros esenciales a considerar al elegir el sistema de expresión ideal:

Secuencia génica

La síntesis génica debe optimizarse para el organismo hospedador mediante el proceso llamado optimización de codones. Este proceso busca evitar codones raros en la secuencia de ARNm, reduciendo el riesgo de fallo en la expresión y aumentando las probabilidades de obtener altos rendimientos.

Vector

La optimización de la expresión de proteínas también depende en parte de la elección del vector de expresión. La secuencia no codificante regula varios elementos esenciales para la expresión:

  • El promotor debe adaptarse a la naturaleza de la proteína a expresar. Para proteínas tóxicas, se prefiere promotores con baja expresión basal. Promotores fuertes se priorizan cuando se requiere una alta producción.
  • El terminador regula la degradación del ARNm y aumenta su estabilidad en el citoplasma.
  • El origen de replicación controla el número de copias del plásmido. Elegir un plásmido de alta copia puede ser una opción si enfrenta bajos rendimientos.

Condiciones de expresión

Varios factores influyen en la expresión de proteínas:

  • Temperatura: en sistemas procariontes como E. coli, la expresión de proteínas puede causar plegamiento incompleto y formación de cuerpos de inclusión. Aunque estos cuerpos se pueden aprovechar, inducir la expresión a menor temperatura favorece la solubilidad.
    La expresión hipodérmica en células de mamífero resulta en mayores rendimientos.
  • Concentración del inductor: reducir la concentración de inductor disminuye la tasa de transcripción, limitando la formación de agregados (cuerpos de inclusión) y aumentando la solubilidad.
  • Medios: el medio de cultivo debe contener todos los nutrientes necesarios que favorecen la expresión recombinante.

 

Esta lista no es exhaustiva y solo representa parte de los parámetros que ProteoGenix puede optimizar gracias a su servicio de expresión de proteínas de alto rendimiento. Contáctenos y uno de nuestros gestores de cuenta PhD definirá con usted los parámetros a variar para optimizar su expresión de proteínas.

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