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TESTS DE ALTA CAPACIDAD PARA EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS

¡Consiga el éxito con sus proteínas difíciles de expresar!

  • Hasta x50 mejora en el rendimiento proteico
  • 1000 pruebas en 4 semanas
  • Mejore todas las propiedades de sus proteínas

Contáctanos Habla con nuestros expertos

¡Nuestro servicio de test de expresión de proteínas de alta capacidad es la solución para superar los desafíos más exigentes en proteínas de difícil expresión! ProteoGenix ha desarrollado una plataforma HTP dedicada a la optimización de la expresión proteica. Nuestra solución: más de 1000 condiciones de expresión cuidadosamente seleccionadas y probadas en paralelo para impulsar su producción de proteínas en un plazo corto.

¿Por qué elegir ProteoGenix para
optimizar la expresión de sus proteínas?

Expresión de proteínas a la carta

Diseñamos las condiciones de expresión más adecuadas para cumplir con sus especificaciones.

Ahorre tiempo

Podemos realizar 1000 pruebas en 4 semanas gracias a nuestra plataforma totalmente automatizada de alto rendimiento.

La solución definitiva para proteínas difíciles de expresar

¿Una expresión proteica desafiante? Nuestro test de alta capacidad supera cualquier reto en la expresión de proteínas.

Experiencia única en expresión de proteínas

Hemos expresado más de 1500 proteínas desde 2003.

5 sistemas de expresión

Dominamos 5 tipos de sistemas de expresión: E. coli, B. subtilis, levadura, baculovirus/células de insecto y células de mamífero.

¡Incluye XtenCHOTM!

Nuestro servicio puede incluir nuestro sistema de expresión en células de mamífero de máximo rendimiento.

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Test de alta capacidad para la expresión de proteínas difíciles de expresar

ProteoGenix combina la experiencia de sus mejores especialistas en producción de proteínas para ofrecerle la plataforma más avanzada para tests de expresión de proteínas de alta capacidad. Nuestra plataforma fue diseñada siguiendo una sola máxima: “Cuantas más condiciones relevantes probemos, más probabilidades tendremos de encontrar la manera de expresar su proteína con éxito”. Así, nuestra plataforma permite ensayar 1000 condiciones en 4 semanas para cumplir o superar sus requerimientos en términos de:

  • Productividad
  • Purez a
  • Solubilidad
  • Estabilidad
  • Actividad biológica

Lograr este tipo de resultados solo es posible probando una amplia gama de condiciones de expresión de proteínas. Estos son algunos de los parámetros que ProteoGenix puede variar:

Capacidades de biología molecular

Síntesis génica

ILIMITADO

Vectores

ILIMITADO

Péptido señal

250+

Tag de purificación

15+

Tag de solubilidad

15+

Cepa y líneas celulares

Condiciones de cultivo

Temperatura

Condiciones de inducción

Screening de medios

Método de extracción

Fermentación

ILIMITADO

Purificación

purification of difficult-to-expression-proteins

Purificación

¿Está teniendo dificultades con la optimización de la expresión de proteínas? Contacte a nuestros gestores de cuentas PhD para liberar el potencial de su producción.

Nuestro flujo de trabajo en test de expresión de proteínas de alta capacidad

  1. Determinación del mejor combo hospedador/vector
  • Prueba de varios transformantes
  • Selección de los que presentan mejores resultados
  • Pruebas de purificación en el combo hospedador/vector óptimo
GO/NO GO

2. Optimización de la expresión proteica en matraz

  • Optimización de condiciones de cultivo (temperatura, tiempo de inducción…)
  • Determinación de la mejor estrategia de alimentación
GO/NO GO

3. Optimización de la purificación proteica

GO/NO GO

4. Optimización de la expresión proteica en biorreactor

  • Optimización de parámetros de operación en fermentador/biorreactor
  • Purificación y análisis QC: SDS/page, western

Ejemplo de un proyecto típico

320 TESTS

  • 4 cepas de E. coli
  • 4 líneas celulares de mamíferos
  • 2 tags de purificación
  • 2 síntesis génicas
  • 4 vectores
  • 5 péptidos señal

2 mejores combinaciones construcción-sistema

1350 TESTS

  • 3 temperaturas
  • 9 condiciones de inducción
  • 5 optimizaciones de purificación
  • 5 métodos de extracción

Selección de la mejor condición de expresión

200 Screening de medios

5 mejores condiciones de fermentación

1875 TESTS

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Nuestro proceso de producción de proteínas de alta capacidad

Paso Descripción Plazo Entregables
Determinación del par hospedador/vector
  • Síntesis génica con optimización de codones
  • Subclonación en vectores de expresión
  • Purificación de los mejores resultados
  • A determinar según el proyecto
  • Construcciones génicas
  • Reporte detallado de pruebas realizadas
  • Proteína purificada de test de purificación
Optimización de la expresión proteica
  • Optimización de condiciones de cultivo
  • A determinar según el proyecto
  • Muestra de test si es necesario Reporte detallado
Optimización de la purificación proteica
  • Determinación de la mejor estrategia de purificación
  • A determinar según el proyecto
  • Proteína purificada Reporte detallado
Desarrollo de proceso
  • Optimización de parámetros de operación en biorreactor Análisis QC
  • A determinar según el proyecto
  • Proteína purificada Reporte detallado
Opciones
    • Eliminación de tags por escisión enzimática
    • Ensayo y eliminación de endotoxinas
    • Escalado de producción / Fermentación

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Influencia de varios parámetros en la expresión de proteínas

La producción de proteínas difíciles de expresar requiere variar múltiples parámetros que pueden influenciar de forma significativa el rendimiento final, pureza, estabilidad, solubilidad y actividad biológica. Si analizamos la productividad en concreto, estos son algunos de los parámetros a considerar para la optimización de la expresión de proteínas:

Sistema de expresión

La elección del mejor sistema de expresión es fundamental para la expresión de proteínas. Esta elección dependerá de sus necesidades: alta productividad, plegamiento adecuado, modificaciones postraduccionales tipo “humano” o una combinación de estos requisitos… Aquí tiene una tabla con los parámetros esenciales a considerar al elegir el sistema de expresión adecuado:

Secuencia génica

La síntesis génica debe optimizarse para el organismo hospedador aplicando la llamada optimización de codones. Este proceso evita códones raros en el ARNm, reduciendo el riesgo de fallo en la expresión de proteínas y aumentando las probabilidades de lograr una producción con alto rendimiento.

Vector

La optimización de la expresión de proteínas también depende, en parte, de la selección del vector de expresión más adecuado. La región no codificante regula varios elementos esenciales para la expresión proteica:

  • El promotor debe adaptarse a la naturaleza de la proteína a expresar.
    Para proteínas tóxicas: se prefieren promotores de baja expresión basal.
    Cuando se necesita expresión de alta productividad: se seleccionan promotores fuertes.

  • El terminador regula la estabilidad del ARNm y su vida media en el citoplasma.

  • El origen de replicación controla el número de copias del plásmido. Escoger un plásmido de alta copia puede ser útil ante una baja productividad.

Condiciones de expresión

Varios factores son conocidos por influenciar la expresión de proteínas:

  • Temperatura: en sistemas procarióticos como E. coli, la expresión puede provocar plegado incompleto y formación de cuerpos de inclusión. Si bien estos pueden ser explotados, inducir a menor temperatura favorece la solubilidad.
    La expresión hipotérmica en células de mamífero permite mayores rendimientos.

  • Concentración del inductor: reducir esta concentración implica menor transcripción, lo que limita cuerpos de inclusión y mejora la solubilidad.

  • Medio de cultivo: el medio debe incluir todos los nutrientes requeridos para favorecer la expresión recombinante.

Esta lista es solo una muestra de los parámetros que ProteoGenix puede optimizar gracias a su servicio de expresión de proteínas de alta capacidad. Contáctanos para hablar con uno de nuestros gestores de cuenta PhD, quien definirá junto a usted la mejor estrategia para optimizar su expresión proteica.

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