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Il nostro servizio di test ad alta produttività per l’espressione proteica è la soluzione per superare le sfide più complesse legate alle proteine difficili da esprimere! ProteoGenix ha sviluppato una piattaforma HTP dedicata all’ottimizzazione dell’espressione proteica. La nostra soluzione: oltre 1000 condizioni di espressione accuratamente selezionate e testate in parallelo per incrementare rapidamente la tua produzione di proteine.
Progettiamo le condizioni di espressione più idonee da testare per soddisfare le tue specifiche.
Possiamo effettuare 1000 test in 4 settimane. Grazie alla nostra piattaforma ad alta produttività completamente automatizzata.
Espressione proteica sfidante? Il nostro screening ad alta produttività supera qualsiasi ostacolo.
Dal 2003 abbiamo espresso oltre 1500 proteine.
Abbiamo una profonda esperienza in 5 diversi sistemi: E. coli, B. subtilis, lievito, baculovirus/cellule di insetto e cellule di mammifero.
Il nostro servizio include il nostro sistema di espressione in cellule di mammifero ad alte prestazioni.
ProteoGenix riunisce i suoi migliori esperti nella produzione di proteine per offrirti la piattaforma di espressione proteica ad alta produttività più avanzata. La nostra piattaforma segue una regola fondamentale: “Più condizioni rilevanti testiamo, più probabilità abbiamo di trovare la soluzione per esprimere con successo la tua proteina”. Per questo, la nostra piattaforma consente di testare 1000 condizioni in 4 settimane per rispettare – o superare – i tuoi requisiti in termini di:
Raggiungere questi risultati è possibile solo offrendo una vasta gamma di condizioni di espressione proteica. Ecco alcuni dei parametri che ProteoGenix può variare:
Sintesi del gene
(Gene synthesis)
Vettori
(Vectors)
Peptide segnale
(Signal peptide)
Tag di purificazione
(Purification tag)
Tag di solubilità
(Solubility tag)
Temperatura
Condizioni di induzione
(Induction conditions)
Screening dei terreni
(Media Screening)
Metodo di estrazione
(Extraction Method)
Fermentazione
(Fermentation)
ILLIMITATO
Purificazione
Hai difficoltà nella ottimizzazione dell’espressione proteica? Contatta i nostri account manager PhD per valorizzare la tua produzione.
2. Ottimizzazione dell’espressione proteica in flask
3. Ottimizzazione della purificazione della proteina
4. Ottimizzazione dell’espressione proteica in fermentatore
320 TEST
2 migliori combinazioni sistemi/costruzioni
1350 TEST
Selezione della miglior condizione di espressione
200 screening dei terreni
5 migliori condizioni di fermentazione
1875 TEST
| Fase | Contenuto | Tempistiche | Deliverables |
|---|---|---|---|
| Determinazione coppia ospite/vettore |
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| Ottimizzazione espressione proteica |
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| Ottimizzazione della purificazione proteica |
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| Sviluppo del processo |
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La produzione di proteine difficili da esprimere richiede la variazione di diversi parametri che possono influenzare fortemente resa, purezza, stabilità, solubilità e attività biologica. Concentrandoci sulla produttività, ecco alcuni parametri da considerare per l’ottimizzazione dell’espressione proteica:
La scelta del miglior sistema di espressione è cruciale per la produzione proteica. Dipenderà dai tuoi requisiti: alta produttività, folding corretto della proteina, modifiche post-traduzionali “human-like” o un compromesso tra tutte queste esigenze… Qui sotto una tabella che evidenzia i parametri essenziali per scegliere il sistema di espressione più adeguato:
La sintesi genica dovrebbe essere ottimizzata per l’organismo ospite tramite la cosiddetta ottimizzazione dei codoni. Questo processo mira a evitare codoni rari nella sequenza mRNA, riducendo i rischi di fallimento dell’espressione e aumentando le possibilità di ottenere rese elevate di produzione proteica.
L’ottimizzazione dell’espressione proteica dipende anche dalla scelta del miglior vettore di espressione. Le regioni non codificanti regolano diversi elementi essenziali per l’espressione proteica:
Il promotore deve essere adatto alla natura della proteina da esprimere.
Per proteine tossiche: sono preferibili promotori con bassa espressione basale.
Quando è richiesta un’elevata produzione proteica si scelgono promotori forti.
Il terminatore regola il turnover dell’mRNA e ne incrementa la stabilità nel citoplasma.
L’origine della replicazione regola il numero di copie del plasmide. Scegliere un plasmide ad alto numero di copie può essere utile in caso di bassa resa espressiva.
Diversi fattori condizionano l’espressione proteica:
Temperatura: nei sistemi procariotici come E. coli, l’espressione può portare a folding incompleto e alla formazione di corpi di inclusione. Questi possono essere sfruttati, ma indurre l’espressione a temperature inferiori permette maggiore solubilità.
L’espressione proteica ipotermica in cellule di mammifero porta a rese più elevate.
Concentrazione dell’induttore: abbassare la concentrazione dell’induttore riduce il tasso di trascrizione, limitando così la formazione di aggregati (corpi di inclusione) e aumentando la solubilità proteica.
Terreno (media): il terreno di crescita deve garantire tutti i nutrienti essenziali per favorire l’espressione della proteina ricombinante.
Questa lista non è esaustiva e rappresenta solo alcuni dei parametri che ProteoGenix può ottimizzare grazie al suo servizio ad alta produttività per l’espressione di proteine. Contattaci per parlare delle tue esigenze con i nostri account manager PhD e definire insieme i parametri più rilevanti da variare per ottimizzare l’espressione della tua proteina.
