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HIGH-THROUGHPUT PROTEIN-EXPRESSION-TESTS

Erfolgreiche Expression schwer exprimierbarer Proteine!

  • Bis zu 50x höhere Protein­ausbeute
  • 1000 Tests in 4 Wochen
  • Optimieren Sie alle Eigenschaften Ihres Proteins

Kontaktieren Sie uns Sprechen Sie mit unseren Experten

Unser High-Throughput Protein-Expression-Testservice ist die Lösung, um die anspruchsvollsten Herausforderungen bei schwer exprimierbaren Proteinen zu meistern! ProteoGenix hat eine HTP-Plattform entwickelt, die gezielt auf die Optimierung der Proteinexpression zugeschnitten ist. Unsere Lösung: Über 1000 sorgfältig ausgewählte und parallel getestete Expressionsbedingungen, die Ihre Proteinproduktion in kurzer Zeit deutlich steigern.

Warum Sie ProteoGenix für die
Optimierung Ihrer Proteinexpression wählen sollten

Proteinexpression à la carte

Wir gestalten die besten Expressionsbedingungen, um Ihre Spezifikationen exakt zu erfüllen.

Zeit sparen

Wir führen 1000 Tests in 4 Wochen durch – Dank unserer vollautomatisierten High-Throughput-Plattform.

Die ULTIMATIVE Lösung für schwer exprimierbare Proteine

Eine anspruchsvolle Proteinexpression? Unser High-Throughput-Screening meistert jede Herausforderung.

Einzigartige Proteinexpressionsexpertise

Seit 2003 haben wir über 1500 Proteine exprimiert.

5 Expressionssysteme

Wir verfügen über umfassende Erfahrung mit 5 verschiedenen Expressionssystemen: E. coli, B. subtilis, Hefe, Baculovirus/Insektenzellen und Säugerzellen.

XtenCHOTM inklusive!

Unser Service kann unser leistungsstarkes Expressionssystem für Säugerzellen beinhalten.

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High-Throughput Protein-Expression-Test
für schwer exprimierbare Proteine

ProteoGenix bündelt die Expertise seiner erfahrensten Proteinproduktionsexperten, um Ihnen die fortschrittlichste High-Throughput-Proteinexpressionsplattform bereitzustellen. Unsere Plattform wurde nach einem Prinzip entwickelt: “Je mehr relevante Bedingungen wir testen, desto größer ist die Wahrscheinlichkeit, einen erfolgreichen Expressionsweg für Ihr Protein zu finden.” So ermöglicht es unsere High-Throughput-Plattform, innerhalb von 4 Wochen 1000 Bedingungen zu testen, um Ihre Anforderungen hinsichtlich folgender Aspekte zu erfüllen oder sogar zu übertreffen:

  • Produktivität
  • Reinheit
  • Löslichkeit
  • Stabilität
  • Biologische Aktivität

Solche Ergebnisse sind nur durch eine große Bandbreite an Expressionsbedingungen möglich. Hier finden Sie eine Liste von Parametern, die ProteoGenix variieren kann:

Molekularbiologische Möglichkeiten

Gensynthese

UNBEGRENZT

Vektoren

UNBEGRENZT

Signalpeptid

250+

Reinigungstag

15+

Löslichkeitstag

15+

Stämme und Zelllinien

Kulturbedingungen

Temperatur

Induktionsbedingungen

Medien-Screening

Extraktionsmethode

Fermentation

UNBEGRENZT

Reinigung

purification of difficult-to-expression-proteins

Reinigung

Haben Sie Schwierigkeiten bei der Optimierung der Proteinexpression? Kontaktieren Sie unsere PhD-Account-Manager, um das Potenzial Ihrer Produktion auszuschöpfen.

Unser High-Throughput
Protein-Expressions-Workflow

  1. Bestimmung des optimalen Wirts-/Vektorpaares
  • Test mehrerer Transformanten
  • Auswahl derer mit den besten Ergebnissen
  • Reinigungstests am besten Host/Vektor
GO/NO GO

2. Optimierung der Proteinexpression im Kolben

  • Optimierung verschiedener Kulturbedingungen (Temperatur, Induktionszeit…)
  • Bestimmung der besten Fütterungsstrategie
GO/NO GO

3. Optimierung der Proteinreinigung

GO/NO GO

4. Optimierung der Proteinexpression im Fermenter

  • Optimierung der Betriebsparameter von Fermenter/Bioreaktor
  • Proteinreinigung und QC-Analyse: SDS/PAGE, Western

Beispiel eines typischen Projekts

320 TESTS

  • 4 E. coli Stämme
  • 4 Säugerzelllinien
  • 2 Reinigungstags
  • 2 Gensynthesen
  • 4 Vektoren
  • 5 Signalpeptide

2 beste System-Kombinationen

1350 TESTS

  • 3 Temperaturen
  • 9 Induktionsbedingungen
  • 5 Reinigungsoptimierungen
  • 5 Extraktionsmethoden

Auswahl der besten Expressionsbedingungen

200 Medien-Screenings

5 beste Fermentationsbedingungen

1875 TESTS

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Unser High-Throughput Proteinproduktionsprozess

Schritt Inhalt Zeitrahmen Ergebnisse
Bestimmung des Host/Vektor-Paares
  • Gensynthese inkl. Codonoptimierung
  • Subklonierung in Expressionsvektoren
  • Reinigung der besten Ergebnisse
  • Abhängig vom Projekt zu bestimmen
  • Gen-Konstrukte
  • Detaillierter Bericht inkl. durchgeführter Tests
  • Gereinigtes Protein aus Reinigungstest
Optimierung der Proteinexpression
  • Optimierung der Kulturbedingungen
  • Abhängig vom Projekt zu bestimmen
  • Testmuster bei Bedarf Detaillierter Bericht
Optimierung der Proteinreinigung
  • Bestimmung der optimalen Reinigungsstrategie
  • Abhängig vom Projekt zu bestimmen
  • Gereinigtes Protein Detaillierter Bericht
Prozessentwicklung
  • Optimierung der Betriebsparameter für den Bioreaktor QC-Analyse
  • Abhängig vom Projekt zu bestimmen
  • Gereinigtes Protein Detaillierter Bericht
Optionen
    • Tag-Entfernung durch enzymatischen Verdau
    • Endotoxin-Test und Entfernung
    • Produktionshochskalierung/Fermentation

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Einfluss verschiedener Parameter auf die Proteinexpression

Die Produktion schwer exprimierbarer Proteine erfordert die Variation verschiedener Parameter, die Ausbeute, Reinheit, Stabilität, Löslichkeit und biologische Aktivität stark beeinflussen können. Im Hinblick auf die Produktivität sind beispielsweise folgende Faktoren zur Optimierung der Proteinexpression zu berücksichtigen:

Expressionssystem

Die Wahl des besten Expressionssystems ist entscheidend für die Proteinexpression. Diese hängt von Ihren Anforderungen ab: hohe Produktivität, korrektes Protein-Folding, „menschliche“ posttranslationale Modifikationen oder ein Kompromiss – nachfolgend finden Sie eine Tabelle mit den wichtigsten Punkten für die Entscheidung:

Gen-Sequenz

Die Gensynthese sollte für das Wirtssystem durch Codon-Optimierung angepasst werden. Diese Optimierung zielt darauf ab, seltene Codons in der mRNA zu vermeiden, das Risiko eines Expressionsversagens zu reduzieren sowie eine hohe Proteinausbeute zu erzielen.

Vektor

Die Optimierung der Proteinexpression wird auch durch die Wahl des geeigneten Expressionsvektors beeinflusst. Die nicht-kodierenden Regionen steuern mehrere essenzielle Elemente für die Proteinexpression:

  • Der Promotor muss an die Natur des zu exprimierenden Proteins angepasst sein.Für toxische Proteine: Promotoren mit niedriger Basalexpression werden bevorzugt.
    Wenn hohe Ausbeuten benötigt werden: Starke Promotoren sind zu wählen.

  • Der Terminator reguliert den mRNA-Umsatz und erhöht die Stabilität der mRNA im Zytoplasma.

  • Der Origin of Replication steuert die Plasmidkopienanzahl. Ein High-Copy-Plasmid empfiehlt sich bei geringer Ausbeute.

Expressionsbedingungen

Verschiedene Faktoren sind bekannt dafür, die Proteinexpression zu beeinflussen:

  • Temperatur: In prokaryotischen Systemen wie E. coli führt die Expression häufig zu unvollständigem Falten und der Ausbildung von Einschlusskörpern. Zwar lassen sich diese nutzen, aber eine Induktion bei niedrigerer Temperatur ermöglicht höhere Löslichkeit. Hypotherme Expression in Säugerzellen ergibt zudem höhere Ausbeuten.

  • Induktor-Konzentration: Eine niedrigere Induktor-Konzentration reduziert die Transkriptionsrate, was die Aggregatbildung (Einschlusskörper) begrenzt und die Löslichkeit steigert.

  • Medien: Das Nährmedium sollte alle erforderlichen Substanzen enthalten, um die rekombinante Proteinexpression optimal zu fördern.

Diese Liste ist nicht abschließend und stellt nur einen Teil der Parameter dar, die ProteoGenix dank seines High-Throughput Proteinexpression-Service optimieren kann. Kontaktieren Sie uns, um Ihre Anforderungen mit unseren PhD-Account-Managern zu besprechen – gemeinsam wählen wir die besten Parameter für Ihre Proteinexpression.

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