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Unser High-Throughput Protein-Expression-Testservice ist die Lösung, um die anspruchsvollsten Herausforderungen bei schwer exprimierbaren Proteinen zu meistern! ProteoGenix hat eine HTP-Plattform entwickelt, die gezielt auf die Optimierung der Proteinexpression zugeschnitten ist. Unsere Lösung: Über 1000 sorgfältig ausgewählte und parallel getestete Expressionsbedingungen, die Ihre Proteinproduktion in kurzer Zeit deutlich steigern.
Wir gestalten die besten Expressionsbedingungen, um Ihre Spezifikationen exakt zu erfüllen.
Wir führen 1000 Tests in 4 Wochen durch – Dank unserer vollautomatisierten High-Throughput-Plattform.
Eine anspruchsvolle Proteinexpression? Unser High-Throughput-Screening meistert jede Herausforderung.
Seit 2003 haben wir über 1500 Proteine exprimiert.
Wir verfügen über umfassende Erfahrung mit 5 verschiedenen Expressionssystemen: E. coli, B. subtilis, Hefe, Baculovirus/Insektenzellen und Säugerzellen.
Unser Service kann unser leistungsstarkes Expressionssystem für Säugerzellen beinhalten.
ProteoGenix bündelt die Expertise seiner erfahrensten Proteinproduktionsexperten, um Ihnen die fortschrittlichste High-Throughput-Proteinexpressionsplattform bereitzustellen. Unsere Plattform wurde nach einem Prinzip entwickelt: “Je mehr relevante Bedingungen wir testen, desto größer ist die Wahrscheinlichkeit, einen erfolgreichen Expressionsweg für Ihr Protein zu finden.” So ermöglicht es unsere High-Throughput-Plattform, innerhalb von 4 Wochen 1000 Bedingungen zu testen, um Ihre Anforderungen hinsichtlich folgender Aspekte zu erfüllen oder sogar zu übertreffen:
Solche Ergebnisse sind nur durch eine große Bandbreite an Expressionsbedingungen möglich. Hier finden Sie eine Liste von Parametern, die ProteoGenix variieren kann:
Gensynthese
Vektoren
Signalpeptid
Reinigungstag
Löslichkeitstag
Temperatur
Induktionsbedingungen
Medien-Screening
Extraktionsmethode
Fermentation
UNBEGRENZT
Reinigung
Haben Sie Schwierigkeiten bei der Optimierung der Proteinexpression? Kontaktieren Sie unsere PhD-Account-Manager, um das Potenzial Ihrer Produktion auszuschöpfen.
2. Optimierung der Proteinexpression im Kolben
3. Optimierung der Proteinreinigung
4. Optimierung der Proteinexpression im Fermenter
320 TESTS
2 beste System-Kombinationen
1350 TESTS
Auswahl der besten Expressionsbedingungen
200 Medien-Screenings
5 beste Fermentationsbedingungen
1875 TESTS
| Schritt | Inhalt | Zeitrahmen | Ergebnisse |
|---|---|---|---|
| Bestimmung des Host/Vektor-Paares |
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| Optimierung der Proteinexpression |
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| Optimierung der Proteinreinigung |
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| Prozessentwicklung |
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Die Produktion schwer exprimierbarer Proteine erfordert die Variation verschiedener Parameter, die Ausbeute, Reinheit, Stabilität, Löslichkeit und biologische Aktivität stark beeinflussen können. Im Hinblick auf die Produktivität sind beispielsweise folgende Faktoren zur Optimierung der Proteinexpression zu berücksichtigen:
Die Wahl des besten Expressionssystems ist entscheidend für die Proteinexpression. Diese hängt von Ihren Anforderungen ab: hohe Produktivität, korrektes Protein-Folding, „menschliche“ posttranslationale Modifikationen oder ein Kompromiss – nachfolgend finden Sie eine Tabelle mit den wichtigsten Punkten für die Entscheidung:
Die Gensynthese sollte für das Wirtssystem durch Codon-Optimierung angepasst werden. Diese Optimierung zielt darauf ab, seltene Codons in der mRNA zu vermeiden, das Risiko eines Expressionsversagens zu reduzieren sowie eine hohe Proteinausbeute zu erzielen.
Die Optimierung der Proteinexpression wird auch durch die Wahl des geeigneten Expressionsvektors beeinflusst. Die nicht-kodierenden Regionen steuern mehrere essenzielle Elemente für die Proteinexpression:
Der Promotor muss an die Natur des zu exprimierenden Proteins angepasst sein.Für toxische Proteine: Promotoren mit niedriger Basalexpression werden bevorzugt.
Wenn hohe Ausbeuten benötigt werden: Starke Promotoren sind zu wählen.
Der Terminator reguliert den mRNA-Umsatz und erhöht die Stabilität der mRNA im Zytoplasma.
Der Origin of Replication steuert die Plasmidkopienanzahl. Ein High-Copy-Plasmid empfiehlt sich bei geringer Ausbeute.
Verschiedene Faktoren sind bekannt dafür, die Proteinexpression zu beeinflussen:
Temperatur: In prokaryotischen Systemen wie E. coli führt die Expression häufig zu unvollständigem Falten und der Ausbildung von Einschlusskörpern. Zwar lassen sich diese nutzen, aber eine Induktion bei niedrigerer Temperatur ermöglicht höhere Löslichkeit. Hypotherme Expression in Säugerzellen ergibt zudem höhere Ausbeuten.
Induktor-Konzentration: Eine niedrigere Induktor-Konzentration reduziert die Transkriptionsrate, was die Aggregatbildung (Einschlusskörper) begrenzt und die Löslichkeit steigert.
Medien: Das Nährmedium sollte alle erforderlichen Substanzen enthalten, um die rekombinante Proteinexpression optimal zu fördern.
Diese Liste ist nicht abschließend und stellt nur einen Teil der Parameter dar, die ProteoGenix dank seines High-Throughput Proteinexpression-Service optimieren kann. Kontaktieren Sie uns, um Ihre Anforderungen mit unseren PhD-Account-Managern zu besprechen – gemeinsam wählen wir die besten Parameter für Ihre Proteinexpression.