Services de production de protéines recombinantes

Form. Production de protéines

Votre expert en production de protéines
+1500 PROTÉINES5 SYSTÈMES
We are your protein production experts
1500+ PROTEINS
5 SYSTEMS

Avec plus de 15 années d’expérience en production de protéines à façon et plus de 1 500 protéines produites dans cinq systèmes d’expression différents, ProteoGenix est l’un des leaders mondiaux de la production d’anticorps et de protéines recombinantes difficiles à exprimerEN SAVOIR PLUS

Avec plus de 15 années d’expérience en production de protéines à façon et plus de 1 500 protéines produites dans cinq systèmes d’expression différents, ProteoGenix est l’un des leaders mondiaux de la production d’anticorps et de protéines recombinantes difficiles à exprimer.  EN SAVOIR PLUS

Recombinant protein synthesis services
Difficult-to-express protein production experts

Nous proposons des services d’expression et de purification de protéines à petite et grande échelle dans chacune de nos cinq plates-formes à des prix ultra-compétitifs. Nous pouvons également concevoir spécialement pour vous des formules pour, par exemple, tester les conditions d’expression d’une protéine recombinante dans plusieurs systèmes en parallèle ou les conditions d’expression d’une protéine à grande échelle dans un système donné. Nos services comprennent toutes les étapes de la synthèse des gènes et la construction du vecteur d’expression à la production pilote de la protéine en flasques et l’expression à grande échelle en fermenteurs et bioréacteurs..

Notre criblage à haut débit des conditions d’expression des protéines est conçu pour remédier aux problèmes liés à la solubilité, la pureté, la fonctionnalité, la productivité, le repliement ou la formulation. L’accomplissement de ces tâches implique d’avoir accès à toutes les technologies, tous les procédés et tous les outils existants et de les maîtriser parfaitement. Avec une grande expérience de l’expression de protéines recombinantes de toutes sortes, telles que des anticorps, des enzymes, des protéines membranaires et des cytokines, et de toutes les espèces, ProteoGenix a développé une panoplie complète d’outils pour relever de tels défis et fournir des services d’ingénierie de protéines de premier ordre. Essayez les formules garanties du spécialiste de la production de protéines le plus fiable du marché.

E. coli

Discover our E.coli protein production service

EXPRESSION DE PROTÉINE
DANS E. COLI

Expression périplasmique, tests de repliement, formules
garanties, élimination des endotoxines, expression dans E. coli à façon,
production de protéines en bactéries

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Multi-systèmes

Learn more about our multi-system protein production service

FORMULES D’EXPRESSION
MULTI-SYSTÈMES

Dans les cas où le système optimal n’est pas connu,
tests dans jusqu’à 5 systèmes, livraison de la protéine purifiée
pour chacun des systèmes

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B. subtilis

Discover our B. subtilis protein synthesis service

PRODUCTION DE PROTÉINES
DANS B. SUBTILIS

Faible niveau d’endotoxine,
sécrétion de la protéine recombinante,
caractérisation de la protéine

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Levure

Discover our Yeast protein production service

PRODUCTION DE PROTÉINES
DANS LA LEVURE

Saccharomyces cerevisia,
Pichia pastoris,
expression stable

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HTP

Discover our High Throughput protein expression screening service

CRIBLAGE À HAUT DÉBIT
DE L’EXPRESSION DES PROTÉINES

Pour les protéines difficiles à exprimer,
plus de 1 000 conditions d’expression, petite échelle,
criblage à haut débit

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Cellules d’insecte

Discover our High Throughput protein expression screening service

PRODUCTION DE PROTÉINES EN CELLULES D’INSECTE /
BACULOVIRUS

Sf9, Sf21, Hi5, protéines glycosylées,
production de protéines
purification

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Mammifère

Discover our Mammalian cells protein production service

PRODUCTION DE PROTÉINES
EN CELLULES DE MAMMIFÈRE

Expression transitoire, production
d’anticorps recombinants, purifications par SEC et IEX,
faibles niveaux d’endotoxines, CHO, HEK293, BHK

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Lignée stable

Learn more about our stable cell line

DÉVELOPPEMENT DE
LIGNÉE CELLULAIRES STABLES

Systèmes libres de droits, rendement garanti,
développement de lignées HEK293 et CHO stables

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RAB

Learn more about protein production in bioreactor and fermenter

PRODUCTION D’ANTICORPS
MONOCLONAUX ET RECOMBINANTS

Production à bas coût,
rendement garanti,
HTP de variants d’anticorps,

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Grande échelle

Learn more about protein production in bioreactor and fermenter

PRODUCTION DE PROTÉINES À GRANDE ÉCHELLE
PAR FERMENTATION / BIORÉACTEUR

1 à 4 000 L dans 5 systèmes différents,
services de purification à grande échelle,
services de développement de procédés

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Témoignage client : production de protéine

 » J’ai récemment choisi ProteoGenix pour produire une protéine recombinante dans les cellules HEK293. La productivité élevée et l’activité forte de la protéine obtenue, probablement en raison de la glycosylation et du pliage adéquats, nous ont permis de générer des résultats passionnants dans les études fonctionnelles et d’atteindre de nouvelles étapes dans notre projet de recherche. La qualité du service fourni et la communication fluide et aimable que j’ai eue avec le responsable de compte en charge de notre projet ont été décisives dans ce succès. Je suis heureux de recommander ProteoGenix pour les productions de protéines recombinantes. »

production_portrait01
Dr Christian BRONNER,
directeur de
recherche au CNRS

Pourquoi choisir ProteoGenix pour la production de votre protéine recombinante ?

Process development experience
 Plus de 16 ans d’antécédents exceptionnels dans la production de protéines difficiles à exprimer
5 protein expression systems
Cinq systèmes d’expression de protéines disponibles et une panoplie complète d’outils pour remédier aux éventuels problèmes d’expression
One stop solution from gene to protein
Une solution tout-en-un du gène à la protéine, avec le développement d’un procédé et la production à grande échelle. Résultat : un service plus rapide, un taux de réussite supérieur, moins de tâches administratives.
IP Free strains and cell lines
Des lignées cellulaires et des souches libres de droits
transient protein expression service
Productions de petite à grande échelle avec des lots de 1 à 4 000 L
Transient expression and stable cell line
Productivité de près de 800 mg/L en expression transitoire et 5 g/L en expression stable

Why Choose ProteoGenix

 Plus de 16 ans d’antécédents exceptionnels dans la production de protéines difficiles à exprimer

Cinq systèmes d’expression de protéines disponibles et une panoplie complète d’outils pour remédier aux éventuels problèmes d’expression

One-stop solution from gene to protein, process development and large scale production. Consequences: faster service, increased success rate, less administrative work.

Des lignées cellulaires et des souches libres de droits

Productions de petite à grande échelle avec des lots de 1 à 4 000 L

Productivité de près de 800 mg/L en expression transitoire et 5 g/L en expression stable>

Installations de fermentation

fermentation-lab
proteogenix-bioreactors

Étude de cas :

Exemple de production d’une bêta-glucosidase dans des cellules d’insecte

SERVICE RENDU

Un client nous a demandé de produire une bêta-glucosidase recombinante dans un système d’expression en baculovirus (production en cellules d’insecte). Il nous a commandé une formule complète de production en cellules d’insecte comprenant l’expression à petite échelle et des tests de purification suivis par une production et une purification pilotes de 1 L. Nous avons obtenu un rendement de 370 mg/L et avons livré 60 mg de protéine suite à l’expression à petite échelle. Au vu des résultats, il a été décidé que la production pilote n’était plus nécessaire et n’a pas été facturée au client. Le service contenait:

BIOLOGIE MOLÉCULAIRE

L’ADNc codant pour la bêta-glucosidase a été synthétisé chimiquement après l’optimisation de sa séquence pour l’expression en cellules d’insecte. Il a ensuite été sous-cloné dans un vecteur d’expression propriétaire en fusion avec une étiquette 6xHis en vue de la purification.

TESTS D’EXPRESSION

GÉNÉRATION D’UN STOCK DE VIRUS P1

Figure 1 : Analyse de l’expression en cellules d’insecte lors de la génération du virus P1
À gauche : coloration au bleu de Coomassie. À droite : WB avec un anticorps anti-His (substrat ECL). Échantillon « – » : culture de contrôle
non transfectée. Les échantillons 1 et 2 sont des transfections par 2 clones de bacmide différents.

Conclusion de l’étape de génération du virus P1

Une bande de protéine correspondant au poids moléculaire de la bêta-glucosidase est observée dans les échantillons de protéines extraites en conditions natives et séparées par SDS-PAGE. Ce résultat est confirmé par Western blot (figure 1, flèches vertes). Le clone de bacmide recombinant no 1 a été utilisé pour les tests d’expression.

AMPLIFICATION DU VIRUS ET TESTS D’EXPRESSION

Figure 2 : Tests d’expression de la protéine avec le stock P2
coloration au bleu de Coomassie. À gauche : type de cellule 1.À droite : type de cellule 2. Échantillon « – » : culture de contrôle négatif.

Conclusion des tests d’expression

Les tests d’expression avec le virus P2 confirment que la protéine cible est présente en grande quantité dans les extraits protéiques natifs (figure 2, flèches vertes). Conditions optimales pour l’expression de la protéine native : figure 2, flèche rouge = limite d’identification

TESTS DE PURIFICATION

Figure 3 : Test de purification à petite échelle de la protéine coloration au bleu de Coomassie.
À gauche : profil de purification. À droite : QC final de la protéine purifiée
IN : extrait brut. FT : fraction non retenue. W1-W3 : étapes de lavage. E1-E9 : fractions éluées.

Conclusion des tests de purification à petite échelle

La bêta-glucosidase recombinante peut être produite et purifiée en conditions natives. La pureté est ≥ 95 %, et le rendement de production/purification est d’environ de 370 mg/L. Le système d’expression en baculovirus est un choix parfait pour cette protéine.

Quel système choisir pour la production de votre protéine recombinante ?

COMPARAISON ENTRE LES CINQ SYSTÈMES D’EXPRESSION FOURNIS PAR PROTEOGENIX -
SYSTÈMES D’EXPRESSION PROCARYOTIQUES VS SYSTÈMES D’EXPRESSION EUCARYOTIQUES

Le tableau ci-dessous donne une idée générale des avantages des cinq systèmes d’expression de protéines hétérologues disponibles chez ProteoGenix. Le nombre d’étoiles est proportionnel au niveau de performance dans chaque catégorie. Les performances indiquées peuvent cependant varier d’une protéine à l’autre.

Système
d’expression
Délai Coût Modifications post-traductionnelles Faible niveau d’endotoxine Simplicité du passage à grande échelle Sécrétion
E. coli **** **** * * *** *
B. subtilis *** *** * **** *** **
Levure (P. pastoris,
S. cerevisiae)
* *** ** **** ** **
Baculovirus/
Cellules d’insecte
* ** *** **** * ***
Cellules de mammifère *** * **** **** ** ****

 

Le tableau ci-dessous donne une idée générale des avantages des cinq systèmes d’expression de protéines hétérologues disponibles chez ProteoGenix. Le nombre d’étoiles est proportionnel au niveau de performance dans chaque catégorie. Les performances indiquées peuvent cependant varier d’une protéine à l’autre.

Système
d’expression
Délai Coût Modifications post-traductionnelles Faible niveau d’endotoxine Simplicité du passage à grande échelle Sécrétion
E. coli **** **** * * *** *
B. subtilis *** *** * **** *** **
Levure (P. pastoris,
S. cerevisiae)
* *** ** **** ** **
Baculovirus/
Cellules d’insecte
* ** *** **** * ***
Cellules de mammifère *** * **** **** ** ****
Système d’expression Délai Prix
E. coli 3-6 semaines Prix à partir de
1 650€
B. subtilis 4-6 semaines
Levure (P. pastoris,
S. cerevisiae)
6-7 semaines
Baculovirus/
Cellules d’insecte
8-11 semaines
Cellules de mammifère 7-9 semaines

DÉLAI ET PRIX

Système d’expression Délai Prix
E. coli 3-6 semaines Prix à partir de
1 650€
B. subtilis 4-6 semaines
Levure (P. pastoris,
S. cerevisiae)
6-7 semaines
Baculovirus/
Cellules d’insecte
8-11 semaines
Cellules de mammifère 7-9 semaines

 

Contenu du service
Évaluation de l’expression et de la purification à petite échelle avec de nombreuses conditions d’expression testées.
Production et purification de 1 L

Référence de la formule Type Systèmes Prix
ATX-PTR4S01 Formule à 4 systèmes
d’expression
E. coli / levure / baculovirus /
Cellules de mammifère
Prix à partir de
2 450€
ATX-PTR3S05 Formule à 3 systèmes
d’expression
B. subtilis/ levure / baculovirus
ATX-PTR2S02 Formule à 2 systèmes
d’expression
E. coli / baculovirus

 

Le système le plus utilisé pour la production de protéines recombinantes est E. coli. Il s’agit en effet du système le plus simple, le plus rapide et le plus économique pour l’expression d’une protéine à façon. Comme la croissance des cultures de bactéries est beaucoup plus rapide que celle des cellules d’insecte, de mammifère ou de levure, il est plus facile et rapide d’y tester un grand nombre de conditions d’expression différentes. Nous disposons également de davantage de solutions pour y effectuer des tests, ce qui permet d’obtenir de meilleurs taux de réussite. Les rendements de l’expression transitoire de protéines recombinantes dans E. coli sont aussi généralement largement supérieurs à ceux obtenus avec les cellules de levure, d’insecte et de mammifère. La production de protéines recombinantes dans E. coli est donc souvent la première solution proposée par ProteoGenix lorsque l’application finale requiert de grandes quantités de protéines, comme pour la cristallographie ou la résonance magnétique nucléaire (RMN), et que les modifications post-traductionnelles (PTM) ne sont pas indispensables. Les principaux inconvénients des systèmes basés sur E. coli sont les teneurs élevées d’endotoxines restant dans l’échantillon final et l’absence de modifications post-traductionnelles. Il est possible d’éliminer les endotoxines, mais les procédés pour y parvenir ne sont pas vraiment adaptés à la production industrielle. Quant aux problèmes liés aux PMT, la seule solution est d’utiliser un autre système d’expression. Grâce à nos cinq systèmes d’expression, nous sommes en mesure de satisfaire la grande majorité de nos demandes de production de protéines recombinantes, avec un taux de réussite de 95 %. Nous travaillons sans cesse à l’intégration de nouveaux systèmes et de nouvelles solutions afin de vous fournir des services de production de protéines recombinante de la plus grande qualité.

Si vous avez des doutes concernant le choix d’un système, vous pouvez compter sur notre grande expérience en production de protéines pour vous aider à définir la stratégie optimale, du gène à la protéine purifiée, en prenant en compte vos délais, votre budget et les caractéristiques requises pour votre protéine.

Équipe, capacité, organisation

Nos laboratoires de production de protéines recombinantes sont organisés en plusieurs plates-formes et laboratoires d’analyse de sorte à assurer la meilleure qualité de service, la plus grande pureté des produits, les plus faibles risques de contamination et la meilleure coordination pour un service rapide et fiable.

Nous possédons une plate-forme pour chacun de nos cinq systèmes et des laboratoires séparés de contrôle de la qualité, de biologie moléculaire, de conditionnement…Chaque plate-forme est gérée par un chef d’équipe qui veille à ce que chaque protéine livrée corresponde exactement aux spécifications initiales du client. Avec plus de 1 500 protéines produites à ce jour et des équipes spécialistes de chaque système, notre expertise n’a aucun équivalent sur le marché.

Applications de l’expression
de protéines recombinantes à façon

  Les protéines recombinantes de ProteoGenix sont utilisées dans un large spectre d’applications, et nos clients, le plus souvent impliqués dans les sciences de la vie, comprennent des industriels dans les secteurs de la pharmacie, du diagnostic, des biotechnologies, de l’agroalimentaire, des sciences végétales, des énergies nouvelles et des cosmétiques, ainsi que des organismes de recherche nationaux.

Liste non exhaustive des applications possibles :

  • Protéines impliquées dans les tests diagnostiques pour l’étalonnage, les contrôles positifs ou comme composants de capture
  • Production de variants d’anticorps recombinants pour l’humanisation d’anticorps thérapeutiques
  • Production d’enzymes pour les procédés de production alimentaire ou les contrôles de la qualité
  • Antigènes protéiques recombinants pour la production d’anticorps polyclonaux ou monoclonaux (préparation d’antigènes)
  • Études fonctionnelles et d’activité
  • Cristallographie
  • Études des interactions des protéines
  • Investigation dans le cadre de conflits de brevet
  • Études d’ingénierie de mutants pour la découverte ou l’amélioration de l’efficacité d’agents thérapeutiques