Expression de protéines par levure

Formulaire pour expression de protéine

    Choisissez l'expression de protéines eucaryotes la plus rentable ! ProteoGenix combine son
    expertise de longue date en matière de production de protéines et une boîte à outils complète pour optimiser votre expression des protéines en levure.

    Pourquoi choisir ProteoGenix pour
    l'expression de vos protéines par levure ?

    Yeast protein expression
    Choisissez entre
    plusieurs hôtes

    Choisissez entre P. pastoris et S. cerevisiae pour l’expression de vos protéines.

    Protein expression optimization solutions
    Accéder à une
    boîte à outils complète pour l'expression par levure

    Nous proposons différentes souches de P. pastoris ou de S.cerevisia pouroptimiser votre production de protéines.

    Protein production expertise
    Une expertise inégalée
    de production de protéines

    Avec plus de 1500 expressions de protéines, vous pouvez faire confiance à notre expertise.

    From gene to yeast expression
    Solution intégrée
    du gène à la protéine

    Du gène optimisé à la protéine, nous sommes votre partenaire pour l’expression des protéines !

    Yeast protein expression experts
    Chargés d'affaires
    de niveau PhD

    Chez ProteoGenix, un chargé d’affaires de niveau doctoral vous assiste !

    Cost effective protein expression
    Système d'expression
    rentable

    Les levures sont connues pour leur taux de croissance rapide et leur haut rendement d’expression de protéines.

    Notre processus d'expression de la levure

    Expression vector construction for yeast expression
    • Construction du vecteur d’expression (facultatif)

    Design de gènes incluant une optimisation de codons
    Synthèse de gènes
    Sous-clonage dans un vecteur d’expression

    Small scale yeast protein expression
    • Expression de protéines à petite échelle

    Transfection et sélection des clones de levure
    Détermination des clones les plus expressifs
    Optimisation de l’expression
    SDS/page + WB si nécessaire
    Tests de purification

    Yeast protein production
    • Expression des protéines, mise à l’échelle et purification

    Expression et purification des protéines avec des conditions optimisées déterminées précédemment.

    Notre processus de travail pour l'expression des protéines de levure

    Étape Contenu Délai Livrables
    Étude pilote
    • Transfection de cellules de levure
    • Sélection des meilleurs clones d’expression
    • Optimisation de l’expression des protéines
    • Tests de purification
    4 à 5 semaines
    • Échantillon de protéines à tester
    Expression transitoire de protéines et purification
    • Expression de protéines à grande échelle
    • Purification
    • Analyse CQ : SDS-PAGE, concentration
    2 semaines
    • Protéine purifiée
    • Rapport détaillé
    Options
    • Synthèse de gènes comprenant l’optimisation des codons pour l’expression des protéines et le sous-clonage dans un vecteur d’expression
    • Chromatographie d’exclusion de taille
    • Polissage (ADN, HCP, endotoxines)
    • Élimination des endotoxines
    • Analyses : WB, SEC analytique

    Pourquoi choisir l'expression des protéines par Pichia pastoris ?

    Le choix de l’organisme hôte est de première importance une fois que la décision d’effectuer l’expression de protéines de levure est prise. De nombreuses cellules hôtes sont décrites dans la littérature. Cependant, S. cerevisiae et P. pastoris sont les plus utilisées.

    Cette dernière offre plusieurs avantages en matière d’expression des protéines, tels que :

    • Très faible niveau de sécrétion de protéines natives : Pichia pastoris exprime une très faible quantité de protéines sécrétées, ce qui signifie que la majorité des protéines présentes dans le milieu représentent la protéine recombinante d’intérêt. Cette propriété simplifie clairement le processus de purification des protéines en aval.

    • Expression de protéines à haut titre : Pichia pastoris peut être cultivée à une densité cellulaire élevée. Ainsi, cet organisme hôte permet une production de protéines à haut rendement.

    • Modifications post-traductionnelles : Pichia pastoris possède la machinerie post-traductionnelle complète caractéristique des cellules eucaryotes. Ainsi, cet organisme hôte est capable d’effectuer des phosphorylations et des glycosylations (différentes de celles observées dans l’expression des protéines des cellules de mammifères).

    • Sans endotoxines

    Pour conclure, Pichia pastoris est le premier choix pour la production de protéines sécrétées. Pichia pastoris reste également une option pertinente lorsqu’il s’agit de produire des protéines thérapeutiques. Cet organisme a été utilisé comme hôte de levure pour l’expression de plusieurs protéines thérapeutiques arrivant sur le marché telles que :

    • Albumine de sérum humain

    • Collagène

    • Ecallantide

    • Insuline

    Pourquoi choisir l'expression des protéines de Saccharomyces cerevisiae ?

    En tant qu’organisme unicellulaire, S. cerevisiae et les autres levures présentent les mêmes avantages que les procaryotes tels que E. coli. Ainsi, S. cerevisiae est caractérisée par des temps de génération courts, des rendements de biomasse élevés et des outils bien caractérisés pour la manipulation de l’ADN.

    Parmi tous ces avantages, l’expression des protéines offre également des avantages supplémentaires par rapport à l’ expression sur E . coli. Cela comprend :

    • Modifications post-traductionnelles: S. cerevisiae s’est avéré capable d’effectuer la formation de liaisons disulfure et la plupart des glycosylations post-traductionnelles trouvées dans les systèmes d’expression des mammifères. Cependant, certaines différences sont observées comme le fait que S. cerevisiae soit connu pour son hypermannosylation (plus importante que chez P. pastoris).

    • Statut GRAS: S. cerevisiae bénéficie du statut GRAS qui signifie qu’elle est reconnue comme sûre par la FDA.

    • Sans endotoxines

    Dans l’ensemble, S.cerevisiae a été largement étudié et bénéficie d’une large gamme d’outils (souches, vecteurs d’expression…). En tenant compte de ces aspects, S. cerevisiae est l’hôte idéal pour les projets nécessitant de tester plusieurs conditions. Comme Pichia pastoris, S. cerevisiae a été largement utilisé pour l’expression de protéines thérapeutiques. Cependant, si une glycosylation plus proche de celle de l’homme est nécessaire, l’expression de la protéine par un baculovirus ou une cellule de mammifère sera préférée.