Développement de test ELISA

Ayant aidé un grand nombre d’entreprises, de laboratoires et de chercheurs individuels avec nos services de conception et développement de tests ELISA personnalisés, nous avons réussi à établir et à mettre au point une procédure de développement de tests personnalisés approfondie qui prend en compte tous les aspects de votre recherche afin de fournir des solutions de tests adaptées à des fins de recherche, de CE ou de DIV. Voici le plan de nos services d’analyses personnalisées:

Il y a de nombreux facteurs à prendre en compte pour choisir la technique ELISA la plus appropriée à votre projet. Voici quelques-uns des éléments que vous devez prendre en compte avant de prendre votre décision :

• La nature de l’entité que vous voulez détecter: Le test ELISA sandwich nécessite deux anticorps spécifiques de deux régions différentes et non superposées. Par conséquent, il ne sera pas adapté à la détection de petites molécules. Pour la détection des haptènes, l’ELISA compétitif sera considéré comme plus pertinent.
• Le nombre d’anticorps disponibles: Envisagez de préférence l’ELISA direct ou compétitif s’il n’y a qu’un seul anticorps disponible sur le marché pour votre antigène cible.
• Le type de mesure: L’ELISA sandwich ou compétitif est plus adapté à la détection et à la quantification d’un analyte alors que l’ELISA direct ou indirect est plus adapté à la mesure d’une réponse immunologique.

En tant que leader dans la production d’anticorps, ProteoGenix est en mesure de développer tous les types de tests ELISA, quelles que soient vos exigences. Si vous souhaitez en savoir plus sur notre service de développement de tests ELISA ou si vous avez des doutes sur le meilleur format à utiliser, n’hésitez pas à contacter nos responsables de comptes doctoraux.

Avec les meilleurs équipements de leur catégorie, des scientifiques hautement qualifiés et expérimentés à bord et une réputation qui précède notre nom, nous, à ProteoGenix, sommes pleinement engagés à ne fournir que le meilleur des services de mise au point d’essais personnalisés, le tout à un prix abordable, et avec des garanties étendues, un contrôle de qualité de bout en bout et des délais d’exécution rapides.

Un pas dans la bonne direction vous évite d’en faire cent dans la mauvaise. Laissez-nous donc la responsabilité de développer et de valider des tests personnalisés pour vous, afin que vous puissiez faire avancer vos recherches – beaucoup, beaucoup plus loin !

Cliquez sur “Contactez-nous” sur votre droite pour nous contacter, nous poser des questions ou demander un devis. Poursuivez votre lecture pour découvrir comment nos services de développement d’essais personnalisés peuvent ajouter à votre projet le temps, les efforts et la rentabilité dont il a tant besoin.

Ayant mis au point des centaines de tests depuis 2003, ProteoGenix a en effet acquis une solide expertise dans de nombreux domaines. Voici les points sur lesquels nous nous démarquons de nos concurrents en matière de développement de tests personnalisés :

1. 1. • Développement de tests personnalisés à partir de zéro (numéro d’accession de la cible)
      • Solutions de dosage personnalisées de bout en bout, de la synthèse de gènes à la livraison de kits pilotes
      • Tous les processus intrinsèques sont guidés par des directives strictes de contrôle de la qualité.
      • Expertise dans les cibles uniques et les tests à haute performance/ haute sensibilité

Les équipes scientifiques de ProteoGenix sont issues d’excellents parcours académiques, industriels et en recherche. Forts d’une telle expérience, nous possédons une expertise incomparable en biologie moléculaire, ingénierie des protéines, anticorps et immunologie et synthèse de peptides.

Bien que ProteoGenix offre un certain nombre de services ELISA personnalisés polyvalents, y compris des services de tests ELISA directs, des services de tests ELISA indirects, des services de tests ELISA sandwichs et des services de tests ELISA compétitifs, le développement de tests personnalisés apparaît souvent comme la meilleure solution lorsque vous avez besoin d’un kit de validation/production pour des projets impliquant des cibles ou des marqueurs très spécifiques. Nous travaillons avec les techniques automatisées Sandwich ELISA et Competitive ELISA pour développer les solutions de dosage les mieux adaptées à vos besoins. Selon la sensibilité et la technologie demandées, nous pouvons développer des tests colorimétriques ainsi que des tests fluorescents…
Nos services comprennent le développement de tests pour la découverte de médicaments, mais aussi à des fins de diagnostic ou de recherche.

Avec un engagement de longue date envers la communauté de recherche universitaire et industrielle du monde entier, nous, chez ProteoGenix, savons ce qu’il faut pour compléter de manière synergique les innombrables heures que vous consacrez à vos recherches. En gardant à l’esprit les exigences des chercheurs, nous avons mis au point un système complet de développement d’essais personnalisés qui vous soulagera de la pression de la validation et de la répétition des résultats.

Un critère de base pour décider si votre projet nécessite un test personnalisé ou si un kit de test standard disponible sur le marché fera l’affaire est d’évaluer :

1. 1. • L’unicité de la cible en question.
      • La qualité des kits existants
      • La capacité du kit existant à répondre à vos spécifications en termes de sensibilité, de format de test, de spécificité d’espèce ou de réactivité croisée.
      • La nécessité d’avoir son propre essai pour créer un avantage compétitif par rapport aux concurrents et réduire le risque de copie.

Si vous n’arrivez pas à vous décider, n’hésitez pas à nous contacter et nous nous ferons un plaisir de vous conseiller.

Voici quelques-uns des domaines d’application les plus courants dans lesquels le développement d’essais personnalisés prend tout son sens :

1. 1. • Biomarqueurs pour recherche et développement de médicament
      • Immunotests pour détermination d’efficacité vaccinale
      • Surveillance de l’administration des médicaments
      • Développement de kits de diagnostic ou de pronostic
      • Développement et optimisation des processus
      • Recherche fondamentale industrielle et universitaire
      • Validation de l’expression de la cible sur différentes lignées cellulaires ou extraits de cellules
      • Bioessais pour l’analyse des aliments et de l’eau
      • Dépistage avancé de la toxicité
      • Contrôle de processus industriel
      • Analyses d’échantillons environnementaux

La meilleure façon de démontrer notre expertise dans le développement de tests personnalisés est de partager une étude de cas représentative d’un test de biomarqueur que nous avons développé.

Le but de ce projet était de développer et d’optimiser un test de biomarqueur pour détecter des niveaux élevés d’un biomarqueur spécifique au(x) stade(s) précoce(s) du cancer de la prostate précédemment identifié(s). L’ensemble des échantillons de donneurs de sérum pour la validation se composait d’individus sains, d’individus atteints de cancer du sein et d’individus cibles, c’est-à-dire d’individus atteints de cancer de la prostate.

Un protocole standard de criblage SST a été déployé pour identifier les régulateurs d’une cible protéique commune des médicaments anticancéreux. La figure suivante (FIGURE 1) illustre le principe de fonctionnement générique du dépistage SST.

Principe du système SST

Identification in vivo de la protéine de liaison à l’ADN grâce à la fusion avec GAL4-AD et l’activation d’un gène rapporteur

Les étapes détaillées ci-dessous ont été suivies pour développer un protocole Sandwich ELISA pour le biomarqueur découvert via le dépistage de la SST dans la phase préliminaire du projet de développement d’un test personnalisé.

1. 1. • La production dechaînes de protéines recombinantes a été réalisée dans des volumes suffisants et à une pureté supérieure au seuil.
      • 10 anticorps monoclonaux de haute affinité ont été développés dans un système d’hybridomes.
      • Les 10 anticorps monoclonaux ainsi développés ont été produits, purifiés et conjugués.
      • Un exercice approfondi d’appariement des paires d’anticorps a été adopté, avec pas moins de 90 paires testées pour trouver la correspondance la plus appropriée.
      • Le protocole Sandwich ELISA le plus optimal a été développé pour atteindre un seuil de sensibilité suffisant pour détecter la cible dans le sérum du patient.
      • La paire présentant les meilleurs résultats de correspondance a été évaluée sur des échantillons biologiques marqués provenant d’un ensemble suffisamment large de donneurs (donneurs sains et patients cancéreux).
      • La cartographie des épitomes a été suivie par le développement d’une banque de cellules à deux niveaux comprenant une banque de cellules maîtresse (MCB) et une banque de cellules de travail (WCB).

Comme décrit à l’étape 4 ci-dessus, une expérience d’appariement d’anticorps a donné lieu à un ensemble de points de données très fiables qui ont été mis en tableau et analysés graphiquement et empiriquement pour déterminer l’appariement le plus approprié.

Le graphique suivant (GRAPHIQUE 1) détaille les résultats des expériences d’appariement dérivées de l’appariement de diverses paires d’anticorps.

Une fois la meilleure paire d’anticorps déterminée, en utilisant une approche ELISA sandwich, un protocole de détection spécifiquement optimisé a été créé. Cela implique le choix et l’utilisation de tampons de blocage appropriés, ainsi que des périodes d’incubation, des dilutions d’anticorps et d’autres paramètres adaptés.

Le graphique suivant (GRAPHIQUE 2) trace les valeurs de concentration en fonction de la DO associée, ce qui nous donne une courbe empirique très fiable et précise qui peut être utilisée à l’avenir pour les besoins d’extrapolation dans le cadre du protocole Sandwich ELISA complet pour le dosage de ce biomarqueur.

L’évaluation du protocole ELISA Sandwich personnalisé a été réalisée à l’aide d’échantillons de sang provenant de donneurs sains, de patients atteints de cancer du sein et de patients atteints de cancer de la prostate. Le protocole ELISA optimisé a été utilisé pour doser les niveaux de biomarqueurs dans les échantillons par rapport aux niveaux de PSA.

Le graphique suivant (GRAPHIQUE 3) illustre les niveaux élevés de biomarqueur spécifique de la prostate chez les patients atteints de cancer de la prostate, tels que détectés par le protocole Sandwich ELISA personnalisé développé par ProteoGenix, permettant la discrimination catégorielle entre les patients non atteints de cancer de la prostate (donneurs sains et patients atteints de cancer du sein) et les patients atteints de cancer de la prostate. Cette discrimination était beaucoup plus claire et plus concluante que lors du dosage du biomarqueur PSA.

Cette étude de cas représente bien plus que de simples faits, chiffres et données. Une telle avancée et la possibilité de personnaliser à ce point le processus de développement des essais – qui est par ailleurs une tâche longue, fastidieuse et méticuleuse – est un atout considérable à la disposition des chercheurs. La mise au point de tests personnalisés permet non seulement de fournir des solutions adaptées à vos projets, mais aussi d’économiser un temps précieux, de l’énergie et d’autres ressources que vous auriez autrement consacrés à essayer de faire fonctionner des tests standardisés.