Génération de lignées stables

Formulaire Bioproduction

ProteoGenix se fait fort de réduire les coûts liés à la génération de lignées cellulaires stables en proposant les lignées libres de droits les plus productives du marché. Sans frais récurrents et avec de fortes garanties de rendement, notre service de lignées cellulaires stables basées sur notre lignée propriétaire vise à vous assurer une forte productivité à un prix ultra-compétitif et la liberté d’exploitation sans les redevances.

Pourquoi choisir ProteoGenix pour
la génération de vos lignées cellulaires stables ?

Une lignée libre d’exploitation

Bénéficiez de notre lignée cellulaire propriétaire libre de droits sans aucune restriction d’exploitation.

Des rendements garantis

Sécurisez votre investissement en choisissant notre service unique avec rendement garanti.

Transférable aux façonniers

Profitez d’un transfert rapide de votre lignée cellulaire à nos façonniers partenaires pour une bioproduction en conformité avec les BPF.

Un grand choix de lignées

CHO, CHO-S, CHO-DG44, HEK293 propriétaires ou votre lignée préférée ; choisissez un service adapté à vos besoins.

Des experts en production de protéines

Plus de 1 500 protéines recombinantes produites et plus de 300 anticorps monoclonaux développés ; faites confiance aux meilleurs spécialistes de la bioproduction du marché.

Processus sur-mesure

Notre service de développement de lignées cellulaires stables comprend plusieurs bilans d’étape pour un pilotage flexible de votre projet.

ProteoGenix propose les meilleurs services du marché, de la sélection de la cible à la bioproduction. Notre parfaite connaissance de l’ensemble du processus alliée à notre grande expertise en développement d’anticorps monoclonaux et en production de protéines nous permet de vous garantir l’obtention d’une lignée cellulaire stable à la productivité exceptionnelle.

En tant qu’acteur majeur du secteur du développement d’anticorps thérapeutiques, notre mission est de mener votre anticorps thérapeutique de la paillasse aux phases cliniques. Mettez toutes vos chances de réussite de votre côté en nous confiant le développement de votre lignée cellulaire.

Découvrez le contenu de notre service de développement de lignées cellulaires stables

1
  • Construction du vecteur d’expression

Synthèse de gènes optimisée pour le système d’expression envisagé.
Sous-clonage du gène dans un vecteur d’expression à haut rendement.

2
  • Transfection des cellules hôtes et génération de pools stables

Transfection des cellules hôtes avec le plasmide recombinant.
Génération et caractérisation de plusieurs pools transfectés stables.

3
  • Caractérisation des meilleurs pools stables

Sélection et amplification des pools stables les plus productifs en vue de la sélection de clones.

Go/No Go1

4
  • Isolement et sélection des meilleurs monoclones

Isolement de monoclones par dilution limite.
Criblage par ELISA, WB, FACS, IP ou Octet Red96.
Sélection et amplification des clones les plus productifs.

5
  • Caractérisation des meilleurs monoclones

Évaluation de la productivité en culture en batch et/ou en fed-batch
Préparation d’une RCB et étude de stabilité

Go/No Go2

6
  • Optimisation des procédés en amont

Test de plusieurs milieux de cultures et de plusieurs stratégies d’alimentation (optimisation milieu/culture)

7
  • Transfert de la lignée cellulaire stable et du protocole
Client
Façonnier
ÉtapeContenuDélaiLivrables
Synthèse de gènes
  • Conception d’un gène avec optimisation des codons
  • Synthèse de gènes
  • Sous-clonage dans un vecteur d’expression
3 à 4 semaines
  • Gène optimisé pour le système d’expression envisagé
  • Gène cloné dans le plasmide pUC57
Génération de pools stables
  • Transfection stable
  • Sélection et amplification de pools
9 à 10 semaines
  • 50 mL de surnageant d’un pool stable
  • Fioles de pool stable
  • Rapport détaillé
Criblage de clones de cellule unique et sous-clonage
  • Sous-clonage des clones les plus productifs
  • Caractérisation des clones
  • Étude de stabilité
  • Préparation d’une RCB
~4 mois
  • Banque de cellules destinées à la recherche (RCB) testée pour Mycoplasma
  • Certificat d’analyse
  • Rapport détaillé
Optimisation des procédés
  • Test de plusieurs conditions de milieu/alimentation
4 à 5 semaines
  • Rapport détaillé
  • Transfert du protocole optimisé
Options :
  • Démonstration de faisabilité (PoC) basée sur l’évaluation de l’expression transitoire avant de commencer le développement
  • Caractérisation supplémentaire (détermination du KD, thermostabilité, agrégation…)
  • Étude de stabilité de la RCB
  • Développement de banques de cellules mères et de travail
  • Production à grande échelle / bioréacteur
Lignées cellulaires disponibles
CHO propriétaire
  • Liberté d’exploitation (règlement unique)
  • Sélection et amplification médiées par DHFR/méthotrexate (MTX)

ou

  • Sélection et amplification médiées par GS/méthionine sulfoximine (MSX)
  • Transfert facile et rapide pour la production BPF
CHO-STM

  • Aucune redevance de licence avant l’exploitation commerciale
  • Sélection et amplification médiées par DHFR/méthotrexate (MTX)

ou

  • Sélection et amplification médiées par GS/méthionine sulfoximine (MSX)
DG44
  • Aucune redevance de licence avant l’exploitation commerciale
  • Sélection et amplification médiées par DHFR/méthotrexate (MTX)
  • Utilisée pour la bioproduction d’agents biothérapeutiques autorisés par la FDA
GS- propriétaire
  • Rendements > 5-6 g/L
  • Redevances de licence limitées
  • Sélection et amplification médiées par GS très efficaces
  • Transfert facile et rapide pour la production BPF
  • Version Q3-Q4 2018
Autres lignées cellulaires disponibles
  • HEK293, 293F, 293E
  • Lignée cellulaire fournie par le client

Étant donné que chaque projet de génération de lignée cellulaire stable est unique, notre service est conçu pour s’adapter spécifiquement à vos besoins et sécuriser votre investissement. Faites part de vos objectifs à nos spécialistes qui pourront alors vous préparer une offre sur-mesure. Notre service de développement de lignées cellulaires stables comprend plusieurs bilans d’étape incluant un rapport détaillé et une discussion avec notre équipe d’expert permettant de décider de la poursuite et de l’orientation du projet. Cette manière de concevoir votre projet vous donne l’assurance d’être accompagné tout au long du processus de développement et de bénéficier d’une flexibilité unique pour le pilotage de votre projet.

Le rendement de l’expression transitoire de votre anticorps est trop faible? Essayez la solution la plus productive du marché, notre lignée CHO propriétaire XtenCHOTM.

Notre lignée XtenCHOTM et notre protocole Xten ont été conçus spécialement pour les protéines difficiles à exprimer. L’évaluation de l’expression dans ce système constitue généralement la première étape avant de passer au développement d’une lignée cellulaire stable afin de s’assurer que toutes les caractéristiques de votre anticorps satisferont aux exigences requises lors de sa production en CHO.

Nous maximisons vos chances d’obtenir une lignée cellulaire stable à haute productivité à un prix ultra-compétitif

En tant qu’organisme de recherche sous contrat (CRO) ayant produit plus de 1 500 protéines recombinantes et 300 anticorps monoclonaux développés et caractérisés, ProteoGenix s’efforce en permanence de proposer des outils innovants pour satisfaire, voire même dépasser, les besoins de ses clients. Proposer des lignées cellulaire à haut rendement à des prix ultra-compétitif est l’un de nos défis quotidiens. Dans ce but, l’une de nos équipes d’experts en recherche et développement travaille actuellement au développement de l’une des lignées GS déficientes les plus productives du marché.

Vous devez développer une lignée stable hautement productive ? Essayez notre service de développement de lignées cellulaires stables à façon.

Sélection et amplification métabolique pour la génération de lignées cellulaires stables

La sélection de clones cellulaires stables hautement productifs est d’une importance primordiale pour le développement de lignées cellulaires stables. Depuis plusieurs décennies, la sélection métabolique est la méthode de choix pour sélectionner les clones les plus productifs pour la bioproduction. Ce domaine fait l’objet d’intenses recherches en raison de l’importance des coûts de production des agents biothérapeutiques. La réduction de ces coûts de production passe par l’augmentation de la productivité des lignées cellulaires stables et par la réduction de leurs délais de développement. La sélection métabolique est basée sur l’interruption d’une voie métabolique vitale par délétion d’un gène codant pour une enzyme de cette voie. Dans l’industrie pharmaceutique, les enzymes glutamine synthétase (GS) and dihydrofolate réductase (DHFR) sont les marqueurs de sélection les plus fréquemment utilisés pour l’interruption de voies métaboliques. La GS et la DHFR sont impliquées dans la synthèse de, respectivement, la glutamine et les purines.

Dans une stratégie de sélection métabolique, le processus de sélection de clones stables est basé sur la culture des cellules dans un milieu sans le métabolite vital. Seules les cellules capables de produire ce métabolite sont capables de survivre dans le milieu de culture. Dans des systèmes d’expression dans lesquels l’activité DHFR ou GS est absente, la production endogène du métabolite vitale n’est possible que si les cellules sont transfectées de façon stable par un plasmide comprenant le gène DHFR ou GS. Ce processus de sélection peut ensuite être amplifié par l’ajout d’inhibiteurs du marqueur de sélection, comme le MTX pour la DHFR ou la MSX pour la GS. L’augmentation graduelle de la concentration en inhibiteur conduit à l’amplification du gène du marqueur de sorte à surexprimer le marqueur. Comme le gène du marqueur est lié à celui de la protéine recombinante à exprimer (les deux gènes sont sur le même plasmide), la production de la protéine recombinante est amplifiée dans la même proportion que celle du marqueur.

En tant qu’expert de la production de protéines, ProteoGenix maîtrise parfaitement toutes les étapes du processus conduisant à la génération d’une lignée CHO stable et hautement productive. Couplée à notre lignée libre d’exploitation et à nos garanties inégalées, notre expertise vous assure un excellent retour sur investissement.