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Stai lavorando su un nuovo target e non esiste ancora un kit ELISA? Devi rilevare un target a concentrazioni molto basse? È il momento di provare il nostro servizio di sviluppo saggi ELISA! Con oltre 1500 anticorpi prodotti, la nostra esperienza unica nello sviluppo di anticorpi e progettazione ELISA è la tua migliore garanzia per ottenere un test ELISA altamente specifico e sensibile!
Un esempio ideale delle analisi che puoi aspettarti da questo tipo di report
Questo report completo include:
Garantiamo che il tuo saggio ELISA funzionerà secondo le tue esigenze.
La nostra esperienza senza pari nella generazione di anticorpi è la chiave per offrirti ELISA altamente sensibili e specifici.
Accedi alla nostra esperienza e capacità tecniche uniche nella progettazione di ELISA per varie applicazioni.
Lo sviluppo di un ELISA è altamente tecnico: mettiamo a disposizione account manager PhD che ti guideranno in ogni fase.
Affidati all’esperienza di un leader nella produzione di anticorpi e a tutte le più recenti tecnologie: sviluppo ibridoma, phage display…
Dalla sintesi del gene allo sviluppo del kit ELISA
Garantiamo la consegna dell’antigene e di una coppia di anticorpi in grado di rilevare il tuo target nei tuoi campioni. Al termine del processo, ti forniamo campioni degli anticorpi e dell’antigene per verificare la conformità agli standard richiesti. Se sei soddisfatto, pagherai l’importo totale; in caso contrario, ti addebiteremo solo il 50% se saremo riusciti a sviluppare un sandwich ELISA contro l’antigene. Ci assumiamo quindi la maggior parte del rischio del tuo progetto R&D o diagnostico.
Avendo aiutato numerose aziende, laboratori e ricercatori individuali con i nostri servizi di sviluppo ELISA custom, abbiamo messo a punto una procedura accurata di sviluppo saggi personalizzati che tiene conto di ogni aspetto della tua ricerca per fornire soluzioni adattive per scopi di ricerca, CE o IVD. Ecco la nostra blueprint dei servizi custom:
Una volta determinato che i kit ELISA esistenti, sandwich ELISA o coppie di anticorpi non soddisfano i tuoi requisiti (specificità, sensibilità, cross-reattività, ecc.), progettiamo una strategia completamente personalizzata insieme a te. Questo passaggio è fondamentale per il successo del progetto. Ogni fase risulta cruciale per sviluppare un saggio conforme alle esigenze.
Quando le soluzioni ELISA disponibili non soddisfano i requisiti (specificità, sensibilità, cross-reattività, ecc.), sviluppiamo una strategia su misura consultandoti. Questo step è essenziale per il successo finale.
La nostra procedura parte dalla sintesi cDNA a doppio filamento. Con rigorosi controlli di qualità, garantiamo il 100% di accuratezza nel sequenziamento e oltre il 99,9% di efficienza. Ottimizziamo ulteriormente il prototipo con mutagenesi del gene. Siamo riconosciuti tra i migliori per produzione di reagenti custom da disegno genico e ottimizzazione genica.
La produzione precisa di proteine ricombinanti o peptidi con resa adeguata è vitale per lo sviluppo anticorpale. Possiamo effettuare la produzione in sistemi diversi come E.coli, B.subtilis, lieviti, cellule di insetto (baculovirus), cellule di mammifero per ottenere l’antigene più adatto.
Sviluppiamo gli anticorpi primari con la massima cura dai campioni antigenici prodotti. La nostra esperienza nella generazione di anticorpi monoclonali e policlonali è impareggiabile. Tutti i nostri stabulari rispettano i più alti standard etici.
Dopo la produzione degli anticorpi primari, attiviamo servizi analitici, tra cui metodi label-free avanzati per la misurazione dell’affinità anticorpale.
Con la purezza ottenuta, garantiamo coniugazioni senza proteine estranee che potrebbero influire sul processo. Scegliamo le tecniche più avanzate e diversi metodi di etichettatura per massima accuratezza.
Abbiniamo e sviluppiamo la miglior coppia di anticorpi (coating/detection) per il tuo sandwich ELISA custom. Almeno 90 test di abbinamento per selezionare la combinazione ottimale.
In base all’antigene e sensibilità desiderata, sviluppiamo un protocollo ELISA ottimizzato. Il protocollo viene continuamente migliorato per massimizzare segnale, sensibilità e riproducibilità.
Alla fine, il saggio sviluppato viene validato su campioni biologici per garantire la rilevazione efficace del/i target/i. La validazione attesta la coerenza con le proteine ricombinanti prodotte.
Dopo la validazione, avanziamo alla produzione pilota consegnandoti tutti i reagenti e i kit ottimizzati, inclusi piastre pre-coated e tutto il necessario per i test.
“Siamo estremamente soddisfatti del successo ottenuto attraverso la collaborazione con ProteoGenix nello sviluppo di anticorpi monoclonali contro la nostra proteina. Gli anticorpi prodotti erano non solo altamente selettivi, ma anche dotati di affinità eccezionale per il nostro target, accelerando notevolmente la nostra ricerca. ProteoGenix ci ha impressionato per efficienza e rapidità in tutto il processo. Il loro impegno per un servizio clienti di qualità ha reso l’esperienza ancora migliore, sono sempre stati disponibili a chiarire dubbi e rispondere alle nostre domande. Raccomandiamo vivamente ProteoGenix a chiunque abbia bisogno di sviluppo anticorpale di qualità.”
Verónica Alcolea, Product Development Manager, Telum Therapeutics, Spagna
Sono molti i fattori da prendere in considerazione nella scelta della tecnica ELISA più idonea per il tuo progetto. Ecco alcuni elementi da valutare prima della scelta:
Come leader nella produzione di anticorpi, ProteoGenix è in grado di sviluppare qualsiasi formato di ELISA e soddisfare tutte le tue esigenze. Vuoi maggiori informazioni o hai dubbi sul formato più adatto? Contatta i nostri account manager PhD.
Nell’ELISA diretto, l’antigene proteico viene adsorbito non specificatamente al pozzetto. L’antigene viene quindi rilevato direttamente tramite un anticorpo marcato.
Due vantaggi principali dell’ELISA diretto:
Gli svantaggi includono:
Nell’ELISA indiretto, la proteina viene adsorbita non specificatamente al pozzetto. È chiamato indiretto perché la rilevazione dell’antigene avviene tramite un anticorpo secondario: prima si aggiunge un primario non marcato, poi un secondario marcato (policlonale o monoclonale) specifico per il primario.
Vantaggi principali dell’ELISA indiretto:
Svantaggi:
L’ELISA sandwich differisce dagli ELISA diretti e indiretti perché l’anticorpo di cattura viene immobilizzato sulla piastra, non l’antigene. Gli ELISA sandwich si basano sull’uso di due anticorpi abbinati: il primo funge da anticorpo di cattura e viene immobilizzato sulla piastra, il secondo è utilizzato per la rilevazione. È fondamentale che riconoscano epitopi diversi dello stesso antigene. Si possono applicare tanto la rilevazione diretta (anticorpo primario marcato) quanto indiretta (secondario marcato).
L’ELISA sandwich offre diversi vantaggi:
Grazie a due anticorpi specifici per epitopi diversi, offre altissima specificità.
Mostra sensibilità maggiore rispetto all’indiretto, poiché la cattura del target elimina le entità non desiderate, permettendo rilevazione accurata.
Tuttavia, serve una coppia di anticorpi diretti a diversi epitopi dello stesso antigene, quindi lo sviluppo anticorpale custom può essere necessario.
L’ELISA competitivo è una tecnica complessa e particolarmente adatta per piccoli antigeni. Si usa per misurare la concentrazione di un antigene (o anticorpo) in un campione. Il principio è rilevare le interferenze di segnale dovute alla competizione tra antigene (o anticorpo) nel campione e un riferimento marcato. Regola: “più debole il segnale, più alta la concentrazione dell’analita”.
L’ELISA competitivo può essere basato su ELISA diretti, indiretti o sandwich, pertanto vantaggi e limiti dipendono dalla tecnica selezionata.
Con strumentazione all’avanguardia, scienziati altamente qualificati ed esperti e una reputazione consolidata, noi di ProteoGenix ci impegniamo a fornirti solo il meglio nei servizi di sviluppo saggi custom – a prezzi convenienti e con estese garanzie, controllo di qualità end-to-end e rapidità di risposta.
Una decisione giusta oggi ti fa risparmiare molto domani. Affidati a noi per sviluppo e validazione di saggi custom, così potrai far avanzare la tua ricerca molto più rapidamente!
Clicca su ‘Contattaci’ a destra per parlare con noi, porre domande o richiedere un preventivo. Continua nella lettura per scoprire come i nostri servizi di sviluppo saggi personalizzati possono rendere i tuoi progetti più efficienti in tempo, costi ed energie.
Dal 2003 abbiamo sviluppato centinaia di saggi, acquisendo competenze uniche. Ecco perché ci distinguiamo nella customizzazione dei saggi:
Sviluppo assay personalizzati da zero (numero di accesso target)
Soluzioni custom end-to-end, dalla sintesi genica alla consegna kit pilota
Tutte le fasi interne guidate da rigide linee guida di controllo qualità
Uniamo competenze su target unici e saggi ad alte prestazioni/sensibilità
Da ProteoGenix lavorano scienziati rinomati, con esperienze accademiche e industriali illustri. Abbiamo competenza incomparabile in biologia molecolare, ingegneria proteica, immunologia e sintesi peptidica.
ProteoGenix offre diversi servizi ELISA custom tra cui diretti, indiretti, sandwich e competitivi. Tuttavia, lo sviluppo custom è spesso la migliore soluzione quando sono richieste validazione o produzione kit su marker/target molto specifici. Lavoriamo con tecniche Sandwich ELISA e Competitive ELISA automatizzate per proporre la soluzione più adatta. Su richiesta, sviluppiamo sia saggi colorimetrici che fluorescenti.
I nostri servizi includono saggi per drug discovery, diagnostica o ricerca.
Con dedizione alla comunità di ricerca accademica e industriale mondiale, conosciamo bene ciò che serve per supportare i tuoi sforzi. Abbiamo così creato un sistema personalizzato per sviluppare saggi custom, sollevandoti dalla pressione di validazione e ripetizioni.
Garanzie di successo senza pari
Strategia su misura per i tuoi obiettivi di ricerca
Ampia gamma di formati di saggio
Alto grado di personalizzazione secondo target accession number o specifiche biomarker
Scoperta biomarker tramite studi interazione DNA-proteina (Yeast one-hybrid-system)
Pacchetto all-inclusive dalla sintesi genica alla consegna pilota
Costi competitivi, nessun costo nascosto
Supporto post-vendita da parte dei nostri scienziati esperti
L’unicità del target d’interesse.
La qualità dei kit già disponibili.
La capacità dei kit di soddisfare le tue specifiche (sensibilità, formato, specie, cross).
La necessità di avere un saggio dedicato come vantaggio competitivo e per ridurre il rischio di copia.
Se non riesci a decidere, contattaci: saremo felici di consigliarti.
Ecco le aree applicative più comuni in cui lo sviluppo custom è cruciale:
La miglior dimostrazione della nostra expertise per lo sviluppo saggi custom è un case study su un biomarcatore realizzato.
Obiettivo: sviluppare un kit ottimizzato per individuare livelli elevati di un biomarcatore specifico delle fasi precoci di tumore alla prostata. Il campione di siero usato per la validazione comprendeva soggetti sani, pazienti con tumore mammario e pazienti con tumore prostatico.
Protocollo OHS standard per identificare i regolatori di un comune target proteico farmacologico. Il diagramma seguente (FIGURA 1) illustra il principio di base dello screening OHS.
Principio sistema OHS
Identificazione in vivo di proteine DNA-binding tramite fusione con GAL4-AD e attivazione di un gene reporter.
I passaggi seguenti sono stati seguiti per sviluppare il protocollo sandwich ELISA del biomarcatore individuato tramite screening OHS.
L’esperimento di matching anticorpale ha generato dati affidabili, analizzati per individuare la miglior combinazione. Il grafico seguente (GRAFICO 1) mostra i risultati dell’esperimento.
GRAFICO 1: DETERMINAZIONE DELLA MIGLIOR COPPIA PER SANDWICH ELISA
Dai dati si nota che l’Anticorpo di Rilevazione 4B e 5B si abbinano molto bene con il Coating 17. Il binomio Detection 5B + Coating 17 è risultato il migliore. Così, l’analisi empirica e sperimentale di oltre 90 coppie ha permesso di focalizzare la combinazione vincente.
Dopo la determinazione della coppia ottimale, viene elaborato un protocollo specifico scegliendo buffer, tempi, diluizioni ecc.
Il grafico seguente (GRAFICO 2) raffigura la curva empirica tracciata incrociando concentrazione e OD.
GRAFICO 2: DETERMINAZIONE SOGLIA DI RILEVAZIONE IN CAMPIONI DI SANGUE
Conclusione: il protocollo sandwich ELISA ottimizzato rileva il biomarcatore a concentrazioni ≤ 0,2 ng/ml nei campioni.
L’ELISA sandwich custom è stato utilizzato su campioni di sangue da donatori sani, con tumore mammario e prostatico. Il protocollo ottimizzato è servito a confrontare i livelli del biomarcatore rispetto al PSA.
Il grafico seguente (GRAFICO 3) evidenzia i livelli elevati di biomarcatore prostatico nei pazienti prostatectomizzati: il nuovo ELISA permette una distinzione netta tra sani/tumore mammario e tumore prostatico, più di quanto non faccia l’analisi PSA.
GRAFICO 3: DETERMINAZIONE LIVELLO DEI MARKER PROSTATICI NEI CAMPIONI SANI E MALATI (SANDWICH ELISA)
Si nota un forte incremento del biomarcatore specifico in pazienti con tumore alla prostata.
Questo caso rappresenta più di semplici dati: la capacità di personalizzare lo sviluppo del saggio – di solito un processo lungo e meticoloso – a questo livello è un asset fondamentale per ogni ricercatore. Lo sviluppo custom non solo offre soluzioni su misura, ma permette anche un ampio risparmio di tempo, risorse ed energie.
Il sandwich ELISA è un metodo utilizzato per saggi di proteine (blu nel grafico sotto) su campioni diversi, come sieri, usando una coppia anticorpale. L’anticorpo di cattura (verde sotto) è fissato alle piastre da 96 pozzetti; l’anticorpo di rilevazione (rosso nel grafico) permette la lettura del segnale. L’anticorpo di rilevazione può essere direttamente coniugato a biotina, HRP o AP (in giallo) oppure può essere rilevato da un anticorpo secondario coniugato se il coating è di una specie ospite diversa.
