Confíe en profesionales con gran experiencia en la secuenciación de anticuerpos. Conseguir su secuencia de anticuerpo monoclonal es un punto de partida clave:
- para proteger su secuencia de anticuerpo mediante solicitud de patente
- para optimizar el potencial de su anticuerpo mediante ingeniería
- para impedir la pérdida de la línea celular de hibridoma
- para la producción de anticuerpos recombinantes
¿Por qué elegir ProteoGenix para la secuenciación de su anticuerpo?
Precio competitivo
¡Nuestros precios se encuentran entre los más competitivos del mercado!
Si no hay secuencia, no hay cargo
Si no tenemos éxito en determinar la secuencia, ¡no paga!
Entrega rápida
¡Benefíciese de un servicio rápido gracias a nuestro proceso estandarizado!
Expertos en el desarrollo de anticuerpos monoclonales
¡Mejore su tasa de éxito utilizando nuestros servicios de ingeniería y producción!
Proceso personalizado
¡Acceda a un servicio de secuenciación de anticuerpos rigurosamente adaptado a sus necesidades!
Solución integral
¡Desde las primeras fases del descubrimiento de anticuerpos hasta la fase clínica!
Nuestro proceso de secuenciación de anticuerpos:
una solución integral desde su línea celular de
hibridoma hasta su secuencia de anticuerpo
Transcripción inversa
ProteoGenix ofrece un servicio de secuenciación de anticuerpos totalmente personalizable con grandes garantías. Tras 16 años de experiencia, nuestros servicios son exhaustivos, están estandarizados y se caracterizan por tener unos rendimientos óptimos:
- Longitud de la secuencia: dominios variables de anticuerpo (VH, VL), anticuerpos de longitud completa (VH, VL, Fc)
- Opcional:
- Síntesis de genes con optimización de codones para un determinado sistema de expresión: levaduras, células de insecto, células de mamífero
- Producción de anticuerpos monoclonales
- Ensayo de interacción frente antígenos solubles o antígenos expresados en la superficie celular (ELISA, FACS, determinación de la KD mediante Biacore/SPRi/Octet,…)
- Resultados:
- Un informe completo que incluye la secuencia CDR de interés
- Plásmido que contiene la secuencia (si se ha elegido esta opción)
- Hasta 2 mg de anticuerpo recombinante (si se ha elegido esta opción)
Estudio de caso: secuenciación del ADN de las regiones
variables de la línea celular de hibridoma
OBJETIVO DEL ESTUDIO
A continuación, presentamos un ejemplo de una petición de un cliente para secuenciar una línea celular de hibridoma que habíamos desarrollado anteriormente para él.
MATERIALES
- Secuenciador PacBio RS II
- Células de hibridoma proporcionadas por ProteoGenix
- Kit universal de extracción de ARN TaKaRa MiniBEST
- Kit de reactivos PrimeScript RT con eliminador de ADN genómico (gDNA Eraser en ingles)
- Kit de clonación de TA (TA-cloning en inglés)
PROTOCOLO DE SECUENCIACIÓN DEL HIBRIDOMA
Se extrajo el ARN total de las células de hibridoma y, posteriormente, se sintetizó el ADNc. A continuación, se amplificaron los genes variables del anticuerpo mediante PCR específica de isotipo, se subclonaron individualmente en un vector de clonación estándar y se secuenciaron.
DETERMINACIÓN DEL ISOTIPO Y ANÁLISIS DE LA SECUENCIA DEL ANTICUERPO
La determinación del isotipo del anticuerpo se realizó mediante electroforesis en gel. Los detalles concretos del protocolo se describen en el informe completo proporcionado en formato PDF.
Los resultados de la secuenciación se basan en el análisis de al menos 10 clones positivos e incluyen:
- Secuencia genética
- Secuencia de aminoácidos con descripción de la CDR
Una vez completado el trabajo de secuenciación del anticuerpo, se nos solicitó que diseñáramos una versión quimérica, sintetizáramos los ADNc de ambos anticuerpos, los subclonáramos en un vector de expresión, los expresáramos en células XtenCHO y determináramos la afinidad de unión (determinaciónD KD) de los 3 anticuerpos. El objetivo era confirmar que la funcionalidad del anticuerpo recombinante quimérico seguía siendo al menos equivalente a la del anticuerpo recombinante de ratón y la del anticuerpo de hibridoma de ratón.
Una vez obtenida dicha confirmación, pudimos desarrollar anticuerpos humanizados y anticuerpos biespecíficos con fines terapéuticos en humanos.
¿Por qué debería secuenciar su anticuerpo?
- Solicitud de patente
El desarrollo de un anticuerpo monoclonal puede suponer años de investigación. Demostrar la exclusividad de su secuencia es el primer paso para patentarla y proteger sus inversiones, tanto pasadas como futuras.
- Ingeniería de anticuerpos
La secuenciación de anticuerpos aporta datos muy valiosos para su modificación posterior mediante ingeniería de anticuerpos. Por ejemplo, una vez que haya obtenido su secuencia de anticuerpo monoclonal (mAb en inglés), podrá realizar la humanización o la maduración de la afinidad del mismo. También podrá acceder a diversos formatos de anticuerpo, por ejemplo, anticuerpos biespecíficos o conjugados anticuerpo-fármaco.
- Producción recombinante
El desarrollo de anticuerpos terapéuticos requiere una línea celular estable que sea capaz de producir una gran cantidad de anticuerpos estables exentos de contaminantes. El hecho de conocer su secuencia de anticuerpo le permitirá beneficiarse de las ventajas de la producción de anticuerpos recombinantes: alta reproducibilidad, facilidad de escalabilidad y producción de origen no animal.
- Seguridad
Las líneas celulares de hibridoma se pueden perder debido a la pérdida de genes por mutación o contaminación de los mismos. Su secuencia de la línea celular de hibridoma es la garantía de que podrá continuar con la producción de anticuerpo recombinante incluso en caso de pérdida de su línea celular.
¿Cuál es el siguiente paso tras el análisis de la
secuencia de su anticuerpo?
Con más de 15 años de experiencia en el desarrollo y la producción de anticuerpos, ProteoGenix puede ofrecerle mucho más que su secuencia de hibridoma. El uso de nuestro servicio de secuenciación de anticuerpos puede ser el punto de partida para una colaboración fructífera y duradera que aumentará considerablemente sus oportunidades para alcanzar la fase clínica. ProteoGenix propone una solución integral personalizada para que su proyecto siga adelante:
DESARROLLO DE ANTICUERPOS
TERAPÉUTICOS
ProteoGenix ofrece soluciones para optimizar las propiedades de sus anticuerpos terapéuticos, entre otras, humanización de anticuerpos, maduración de la afinidad, producción de anticuerpos biespecíficos, conjugados anticuerpo-fármaco,…
PRODUCCIÓN DE
ANTICUERPOS MONOCLONALES
Gracias a nuestros 16 años de experiencia y al hecho de contar con tecnologías propias como XtenCHOTM, ProteoGenix ofrece una de las plataformas de producción de anticuerpos recombinantes más productivas del mundo..
