Servicios de desarrollo de anticuerpos biespecíficos

ProteoGenix ofrece una solución integral de óptima calidad para su proyecto de desarrollo de anticuerpos biespecíficos. Benefíciese de:

• la experiencia de científicos reconocidos y con más de 25 años de experiencia en el desarrollo de anticuerpos monoclonales terapéuticos,

• expertos que han desarrollado con éxito más de 300 anticuerpos monoclonales en 15 años, incluyendo 3 anticuerpos monoclonales terapéuticos actualmente comercializados.

Envíenos sus requisitos y nuestro equipo:

• definirá el formato que mejor se adapte a su aplicación y a su posterior producción farmacéutica («potencial de desarrollo»),

• adaptará el formato disponible a sus secuencias de anticuerpo,

• expresará y purificará formatos de anticuerpos biespecíficos complejos,

• optimizará y caracterizará los mejores formatos de anticuerpos biespecíficos.

Nuestro completo servicio de desarrollo de anticuerpos biespecíficos incluye:

• su anticuerpo biespecífico optimizado y purificado,

• un informe completo con una descripción de las etapas experimentales, los resultados, su análisis y la conclusión,

• opcional: un proceso de producción de anticuerpos biespecíficos optimizados transferible directamente a su organización de fabricación por contrato (CMO en ingles). Los parámetros optimizados incluyen: relación HC/LC, sistema de expresión, conectores y muchos otros, en función del proyecto concreto,

• transferencia al cliente de la propiedad íntegra del trabajo realizado por ProteoGenix.

Elegir ProteoGenix es sinónimo de tener acceso a nuestra línea celular de primera calidad XtenCHO^TM.¿Por qué es de primera calidad? Porque es la única línea celular que ha superado los resultados de ExpiCHO, la línea de referencia en el mercado, para la expresión transitoria de anticuerpos terapéuticos tales como Pembrolizumab y muchos otros (rendimientos de hasta 800 mg/L).

¡Aproveche todo el potencial de su proyecto eligiendo ProteoGenix como su colaborador privilegiado!

Al principio, los anticuerpos biespecíficos se producían mediante el método del cuadroma (hibridoma híbrido). Esta técnica permite producir anticuerpos en una única célula huésped, pero conduce a una mezcla del compuesto deseado, compuestos no funcionales y homodímeros. Por tanto, la producción de anticuerpos biespecíficos (bsAb en ingles) con rendimientos lo suficientemente elevados como para alcanzar la fase de bioproducción resultaba un auténtico reto, debido al acoplamiento incorrecto de las cadenas ligeras y pesadas.

Los nuevos métodos de ingeniería y producción recombinante de anticuerpos han permitido desarrollar varias estrategias para abordar este problema, por ejemplo:

• El acoplamiento incorrecto de las cadenas pesadas se solucionó en los años 90 gracias a la modificación del dominio C_H3, lo que permite controlar la dimerización de las cadenas pesadas. Se emplearon varias estrategias para forzar que la heterodimerización de las cadenas pesadas de anticuerpo prevaleciera sobre su homodimerización como, por ejemplo, la conocida estrategia «knob-into-hole» o la de realizar mutaciones que favorezcan la orientación por interacción electrostática deseada.

• Para evitar el acoplamiento incorrecto de las cadenas ligeras, se han desarrollado varias estrategias en la última década. Una de ellas consiste en sortear por completo el problema utilizando cadenas ligeras idénticas. Otros ejemplos de estrategias implican la expresión individual de anticuerpos monoclonales antes de su ensamblaje en una única célula huésped (Duobody, Genmab) o el reordenamiento de la interfaz de heterodimerización intercambiando entre un dominio de cadena ligera y uno de cadena pesada (CrossMAb, Roche).

La capacidad de combinar una gran variedad de unidades estructurales abre la puerta a un número infinito de formatos de anticuerpos biespecíficos. Controlar las diversas técnicas de modificación supone tener acceso a la capacidad de modular a la perfección las propiedades farmacológicas del compuesto deseado y, por tanto, de desarrollar su proyecto con éxito. Por ello, la elección de una empresa con más de 15 años de experiencia en la ingeniería de anticuerpos como ProteoGenix, garantiza el éxito de su proyecto. Nuestros expertos científicos ya han superado los retos de ingeniería más difíciles, ¡es hora de que ponga sus retos en buenas manos!

CrossMab es un formato de IgG biespecífica desarrollado por Roche para solventar el problema del apareamiento LC/HC incorrecto. Esta tecnología se basa en el intercambio del dominio de cadena ligera y de cadena pesada en un único brazo Fab para inducir una interacción específica manteniendo la afinidad de unión al antígeno original.

La tecnología CrossMab puede combinarse con la estrategia KiH para controlar el apareamiento tanto HC/HC como HC/LC.

Puesto que es una IgG biespecífica, el formato CrossMab combina las ventajas de la IgG (semivida in vivo farmacocinética larga, funciones efectoras) y las de los anticuerpos biespecíficos.

La plataforma DUOBODY es una tecnología inventada por Genmab que se basa en un intercambio controlado del brazo Fab. El fundamento de esta técnica es la expresión individual de dos IgG1 que contienen, cada una de ellas, una única mutación idéntica en el dominio CH3. Los anticuerpos obtenidos se mezclan y se separan en semimoléculas en condiciones reductoras. Las mutaciones introducidas en un único punto de cada brazo Fab, combinadas con las condiciones oxidantes, controlan el reensamblaje de las semimoléculas, lo que conduce a rendimientos de IgG biespecífica de hasta el 95 %.

Al igual que el formato CrossMab, el formato Duobody combina las ventajas de la IgG y las de los anticuerpos biespecíficos.

El formato DART se puede clasificar como un fragmento de anticuerpo biespecífico. DART es un diacuerpo (diabody en inglés) compuesto por los dominios variables de dos anticuerpos diferentes. En este formato, el dominio variable de cadena pesada del primer anticuerpo se une mediante un conector peptídico corto al dominio variable de cadena ligera del segundo anticuerpo y viceversa, lo que conduce a dos scFv. La generación de los fragmentos DART se produce mediante estabilización posterior a través de un enlace disulfuro.

Al igual que la mayoría de los formatos pequeños, el formato DART se caracteriza por una potencia alta y una semivida en suero corta, pero se puede someter posteriormente a modificaciones para solucionar esta limitación, por ejemplo, mediante fusión a una región Fc.

Like most small formats, DART are characterized by a high potency but a short serum half-life but can be further engineered to overcome this limitation, for example by fusion to a Fc region.

Los nanocuerpos son fragmentos de anticuerpos de dominio único que se pueden obtener a partir de diversas especies, tales como llama o alpaca. La biespecificidad se puede conseguir uniendo dos nanocuerpos mediante conectores cortos.

El elevado potencial de los nanocuerpos se debe a su pequeño tamaño, lo que permite su acceso a antígenos que no serían estéricamente accesibles a otros anticuerpos.

Al igual que el formato DART, los nanocuerpos biespecíficos se caracterizan por tener una potencia alta, pero una semivida corta, limitación que se puede solucionar mediante la fusión a una proteína tal como la albúmina sérica humana (HSA en inglés)

Like DART, bispecific nanobodies are characterized by a high potency but a short half-life which can be overcome by connection by fusion to a protein such as human serum albumin (HSA).

El formato DVD-Ig (Ig de dominio variable dual) forma parte de la familia de IgG con dominios añadidos y ha sido desarrollado por Abbott. La familia de IgG con dominios añadidos está compuesta por IgG que se han sometido a un modificación posterior para introducir biespecificidad mediante la adición de sitios de unión al antígeno en los extremos N- o C-terminal de las cadenas ligeras o las cadenas pesadas. El formato DVD-Ig se obtiene añadiendo un dominio VL y VH de un anticuerpo a una IgG, lo que genera un anticuerpo biespecífico y bivalente para cada antígeno.

El formato κλ-body es una IgG biespecífica totalmente humana desarrollado recientemente por Novimmune para resolver el problema del apareamiento LC/HC incorrecto. Este formato se caracteriza por una cadena pesada común acoplada a dos cadenas ligeras diferentes, κ y λ, que determinan la especificidad de unión al antígeno. El proceso desarrollado por Novimmune se basa en la selección de las cadenas ligeras mediante presentación en fagos

SEEDbody es un formato de anticuerpo biespecífico desarrollado por Merck Serono que resuelve el problema del apareamiento HC/HC incorrecto. El método SEED se basa en la alternancia de secuencias de IgG e IgA humanas en el dominio CH3 con el fin de favorecer la heterodimerización.

El formato SEEDbody es una IgG biespecífica y, por tanto, combina las ventajas de la IgG y las de los anticuerpos biespecíficos.

SEEDbody is a bispecific IgG and thus combines the advantages of IgG and bispecific antibodies.

Los anticuerpos son una de las clases de fármacos terapéuticos con mayor crecimiento, y esto se debe principalmente a que han demostrado su capacidad para mejorar los tratamientos de varias enfermedades complejas como el cáncer o los trastornos inflamatorios.

Este éxito ha avivado el interés en el desarrollo y el diseño de nuevos fármacos a base de anticuerpos, entre los que se incluyen los anticuerpos biespecíficos. La principal ventaja de los anticuerpos biespecíficos sobre los monoespecíficos es su capacidad de unión a dos antígenos o dos epítopos del mismo antígeno diferentes. Esta propiedad es la base de una nueva generación de fármacos bioterapéuticos de alto potencial..

Hasta la fecha, se han homologado tres anticuerpos biespecíficos para su uso clínico:

• Catumaxomab(REMOVAB®), que es un captador de linfocitos T desarrollado por Trion Pharma que se une a la molécula de adhesión de las células epiteliales (EpCAM) y al antígeno CD3. Catumaxomab es un anticuerpo de IgG biespecífico de rata/ratón (no humano) producido mediante la tecnología del cuadroma que está indicado para el tratamiento de la ascitis maligna (retirado del mercado europeo en 2014).

• Blinatumomab (BLINCYTO®)(REMOVAB®), es un BiTE desarrollado por Amgen y Micromet. Es un captador de linfocitos T que se une específicamente a los linfocitos T CD3+ y los linfocitos B CD19+. Blinatumomab está indicado para el tratamiento de la leucemia linfoblástica aguda.

• Emicizumab (HEMLIBRA®)(REMOVAB®), es un anticuerpo terapéutico desarrollado por Roche y Chugai. Este anticuerpo biespecífico induce la dimerización de sus dos dianas (el factor IX y el factor X) con el fin de reactivar este último. Emicizumab está indicado para el tratamiento de la hemofilia A.

La aplicación más habitual de los anticuerpos biespecíficos es el redireccionamiento de las células efectoras a las células tumorales para la terapia contra el cáncer. El formato BiTE (captador biespecífico de linfocitos T) es un ejemplo de formato (desarrollado por Micromet) basado en esta aplicación. El formato BiTE se puede considerar como un scFv en tándem que se une específicamente a una molécula de linfocito T, por una parte, y a un antígeno específico de tumor, por la otra, para mejorar la respuesta inmune del paciente.

Los anticuerpos biespecíficos pueden vencer otras limitaciones de los anticuerpos monoespecíficos. Un ejemplo de estas limitaciones es su incapacidad de atravesar la barrera hematoencefálica debido a que la baja permeabilidad de la BHE (BBB en ingles) impide el desarrollo de anticuerpos que se unan específicamente a un antígeno en el SNC (CNS en inglés). Una estrategia para atravesar la BHE consiste en diseñar anticuerpos biespecíficos que reconozcan un receptor de la BHE (para inducir transcistosis) y la diana en el SNC.

Gracias a su gran diversidad, los anticuerpos biespecíficos pueden presentar muchas otras aplicaciones terapéuticas:

• inhibición de dos vías al mismo tiempo,

• mejora de la afinidad de unión al antígeno,

• aumento de la especificidad de la diana,

• y muchas más,…