Affidatevi a professionisti esperti nel sequenziamento di anticorpi. Realizzare la vostra sequenza dell'anticorpo monoclonale è un punto di partenza chiave:
- per proteggere la vostra sequenza dell’anticorpo mediante domanda di brevetto
- per ottimizzare il potenziale dell’anticorpo mediante ulteriore ingegnerizzazione
- per evitare la perdita della linea cellulare di ibridomi
- per la produzione di anticorpi ricombinanti
Perché scegliere ProteoGenix per il sequenziamento di anticorpi?
Prezzo competitivo
I nostri prezzi sono tra i più competitivi sul mercato
Nessuna sequenza, nessun pagamento
Non riusciamo a determinare la sequenza? Non pagate.
Consegna rapida
Usufruite di un servizio rapido grazie al nostro processo standardizzato.
Esperto di sviluppo di anticorpi monoclonali
Incrementate il vostro tasso di successo con i nostri servizi di ingegnerizzazione e produzione.
Processo personalizzato
Un servizio di sequenziamento di anticorpi rigorosamente su misura in base ai vostri requisiti.
Soluzione integrata
Dalla scoperta dell’anticorpo alla fase clinica.
Il nostro processo di sequenziamento di anticorpi:
una soluzione integrata dalla linea cellulare di
ibridomi alla sequenza dell'anticorpo
Trascrizione inversa
ProteoGenix propone un servizio di sequenziamento di anticorpi totalmente personalizzabile con ampie garanzie. Con 16 anni di esperienza offriamo servizi completi e standardizzati, così organizzati per garantire prestazioni ottimali:
- Lunghezza della sequenza: domini variabili dell’anticorpo (VH, VL), anticorpo completo (VH, VL, Fc)
- Opzionale:
- Sintesi genetica con ottimizzazione dei codoni per specifico sistema di espressione: lievito, insetto, mammifero
- Produzione di anticorpi monoclonali
- Test di interazione contro antigene solubile o antigene della cellula (ELISA, FACS,determinazione della KD mediante Biacore/SPRi/Octet ecc.)
- Prodotti forniti:
- Un report completo che include la sequenza CDR annotata
- Plasmide contenente la sequenza (se richiesto)
- Fino a 2 mg di anticorpo ricombinante (se richiesto)
Caso di studio: sequenziamento del DNA di regioni
variabili della linea cellulare di ibridomi
SCOPO DELLO STUDIO
Di seguito è riportato l’esempio di un cliente che richiesto il sequenziamento di una linea cellulare di ibridomi sviluppata in precedenza per lui.
MATERIALI
- PacBio RS II
- Cellule di ibridomi fornite da ProteoGenix
- MiniBEST Universal RNA Extraction Kit TaKaRa
- Kit di reagenti PrimeScript RT con eraser gDNA
- TA-cloning Kit
PROTOCOLLO DI SEQUENZIAMENTO DI IBRIDOMI
Tutto l’RNA è stato estratto dalle cellule di ibridomi e il cDNA è stato sintetizzato. I geni variabili degli anticorpi sono stati poi amplificati mediante PCR isotipo-specifica, subclonati separatamente in un vettore di clonaggio standard e sequenziati.
DETERMINAZIONE DEGLI ISOTIPI E ANALISI DELLA SEQUENZA DELL'ANTICORPO
La determinazione degli isotipi dell’anticorpo viene eseguita mediante elettroforesi su gel. I dettagli del protocollo sono descritti nel report completo fornito in formato PDF.
I risultati del sequenziamento sono basati sull’analisi di almeno 10 cloni positivi e includono:
- Sequenza dei geni
- Sequenza di aminoacidi con CDR annotata
Una volta completato il sequenziamento dell’anticorpo, ci è stato richiesto di ingegnerizzare una versione chimerica, sintetizzare i cDNA di entrambi gli anticorpi, subclonarli in un vettore di espressione, produrli in cellule XtenCHO e determinare l’affinità di legame (determinazione della KD ) di tutti i 3 anticorpi. L’obiettivo era confermare che la funzionalità dell’anticorpo chimerico ricombinante rimanesse almeno equivalente a quella dell’anticorpo ricombinante e dell’anticorpo a base di ibridomi di topo.
Una volta confermata questa condizione, siamo stati quindi in grado di sviluppare anticorpi umanizzati e anticorpi bispecifici per finalità terapeutiche sull’uomo.
Perché sequenziare l'anticorpo?
- Domanda di brevetto
Lo sviluppo di un anticorpo monoclonale può comportare anni di ricerca. Dimostrare l’unicità della sequenza è il primo passaggio per brevettarla e proteggere i vostri investimenti passati e futuri.
- Ingegnerizzazione di anticorpi
Il sequenziamento di anticorpi fornisce dati preziosi per successive modifiche mediante ingegnerizzazione. Ad esempio, l’umanizzazione di anticorpi o la maturazione dell’affinità possono essere eseguite dopo avere ottenuto la sequenza di mAb. Sono inoltre disponibili diversi formati di anticorpo, ad esempio anticorpi bispecifici o coniugati farmaco-anticorpo.
- Produzione ricombinante
Lo sviluppo di anticorpi terapeutici richiede una linea cellulare stabile capace di produrre una grande quantità di anticorpi stabili senza contaminanti. Creando la vostra sequenza dell’anticorpo potete usufruire dei vantaggi della produzione di anticorpi ricombinanti: alta riproducibilità, facile scalabilità e produzione senza utilizzo di animali.
- Sicurezza
Le linee cellulari di ibridomi possono risultare inutilizzabili a causa della perdita, mutazione o contaminazione dei geni. Con una propria sequenza della linea cellulare di ibridomi è possibile continuare la produzione di anticorpi ricombinanti anche in caso di perdita della linea di ibridomi.
E dopo l'analisi della sequenza
dell'anticorpo?
Con oltre 15 anni di esperienza nello sviluppo e produzione di anticorpi, ProteoGenix può offrirvi molto più della sequenza dell’ibridoma. Il nostro servizio di sequenziamento di anticorpi può essere il punto di partenza per una collaborazione lunga e fruttuosa che migliorerà notevolmente la vostra probabilità di raggiungere la fase clinica. ProteoGenix propone una soluzione integrata su misura per far progredire il vostro progetto, ad esempio con:
SVILUPPO DI ANTICORPI
TERAPEUTICI
ProteoGenix fornisce soluzioni per ottimizzare le proprietà degli anticorpi terapeutici, tra cui umanizzazione di anticorpi, maturazione dell’affinità, anticorpi bispecifici, coniugati farmaco-anticorpo ecc
PRODUZIONE DI ANTICORPI
MONOCLONALI
ProteoGenix offre una della piattaforme per la produzione di anticorpi ricombinanti più efficiente al mondo, grazie a 16 anni di esperienza e a tecnologie proprietarie come XtenCHOTM.
