Producción de anticuerpos monoclonales

For. producción anticuerpos

ProteoGenix ha desarrollado XtenCHOTM,¡el sistema de expresión más productivo para la producción transitoria de anticuerpos monoclonales que incluso supera el rendimiento de ExpiCHO! Gracias a nuestros años de experiencia, ¡la línea celular XtenCHOTM de nuestra propiedad le permitirá acceder a la producción de más de 1 g/L de anticuerpo recombinante al precio más competitivo del mercado!

¿Por qué elegir ProteoGenix para la producción de su anticuerpo monoclonal?

XtenCHOTM > ExpiCHO

¡Este sistema de expresión de nuestra propiedad incluso supera los rendimientos de producción de ExpiCHO!

El precio más competitivo

¡730 € por 1 mg de anticuerpo purificado* gracias a los extraordinarios rendimientos de XtenCHOTM!!

Cantidad garantizada

¡Garantizamos la cantidad pedida gracias a nuestras directrices de precios perfectamente consolidadas!

Diversidad de sistemas de expresión

Producimos sus anticuerpos en sistemas de expresión de HEK o CHO.

Expertos en ingeniería de anticuerpos

Humanización, maduración de la afinidad, desarrollo de anticuerpos biespecíficos,… ¡Genere variantes de anticuerpo que hagan que su proyecto sea un éxito!

Plazos de entrega cortos

¡Desde su secuencia genética hasta su anticuerpo en tan solo 3-4 semanas!

Nuestro servicio de producción
de anticuerpos recombinantes

EtapaContenidoPlazoResultados
Secuenciación de anticuerpos monoclonales
  • Línea celular de hibridoma proporcionada por el cliente
  • Extracción y purificación de ARN
  • Transcripción inversa
  • Amplificación de ADNc
  • Análisis de la secuenciación
De 2 a 3 semanas para secuencias de la región variable y secuencias líder
De 3 a 4 semanas para anticuerpos de longitud completa
  • Informe detallado
  • Secuencia del anticuerpo
Síntesis de genes y clonación
  • Síntesis de genes
  • Optimización de codones para un sistema de expresión de mamífero
  • Subclonación en un vector de expresión
De 2 a 3 semanas
  • Genes sintéticos clonados en un plásmido pUC57
  • Certificado de análisis (CoA)
Producción de anticuerpos monoclonales
+ purificación
  • Amplificación y preparación de plásmidos
  • Cotransfección de células diana
  • Expresión transitoria y purificación
  • Análisis de control de calidad (SDS-PAGE/UV280)
De 3 a 4 semanas
  • Informe detallado
  • Anticuerpo purificado
  • Si la producción es > 5 mg: muestra de anticuerpo purificado para su ensayo
Opciones disponibles (lista no completa)

  • Etapas de purificación adicionales (IEX, SEC,…)
  • Ensayo y eliminación de endotoxina
  • Análisis de agregados: SEC-HPLC
  • Determinación de la KD: SPR (Biacore), SPRi (XelPleX), Octet RED96
  • Análisis de estabilidad: calorimetría diferencial de barrido, IR

XtenCHOTM: sistema de expresión de calidad superior para la producción de anticuerpos monoclonales

ProteoGenix ofrece un exclusivo sistema de expresión transitoria de alto rendimiento que permite rendimientos de producción de anticuerpos monoclonales superiores a 1 g/L.Gracias a nuestro protocolo interno Xten y a la línea celular XtenCHOTM de nuestra propiedad, nuestro sistema de expresión en mamíferos incluso supera los rendimientos de ExpiCHO, la línea celular de expresión transitoria hasta ahora más productiva del mercado.

Nuestro sistema de expresión XtenCHOTM es la respuesta a todos sus retos en materia de producción de anticuerpos recombinantes y reduce significativamente los costes de producción.

A continuación, presentamos algunos ejemplos de los increíbles resultados que hemos obtenido para la expresión transitoria de Pembrolizumab y de una IgG humana.

Comparativa del rendimiento de expresión de una IgG humana en tres sistemas de expresión diferentes,

incluyendo XtenCHOTM. usando el protocolo de expresión transitoria Xten

Comparativa del rendimiento de expresión del Pembrolizumab en tres sistemas de expresión diferentes

incluyendo XtenCHOTM. usando el protocolo de expresión transitoria Xten

Estudio de caso: producción del anticuerpo recombinante Pembrolizumab

OBJETIVO DEL ESTUDIO

En este caso, presentamos la producción del anticuerpo recombinante Pembrolizumab utilizando el sistema de expresión Xten de nuestra propiedad.

GENES Y VECTORES DE EXPRESIÓN

Los genes que codifican para la cadena pesada (HC) y la cadena ligera (LC) del anticuerpo terapéutico Pembrolizumab se sintetizaron químicamente realizando optimizaciones para su expresión en células OHC (CHO en inglés). Los genes se clonaron en el vector de expresión en células de mamífero propiedad de ProteoGenix pTXs1. El mapa del vector se presenta en el informe en PDF.

ENSAYOS DE PRODUCCIÓN Y PURIFICACIÓN DEL ANTICUERPO MONOCLONAL A PEQUEÑA ESCALA

Se llevó a cabo la preparación de ADN libre de endotoxina para las construcciones de expresión del pTXs1. A continuación, utilizando el protocolo de transfección de nuestra propiedad Xten, se transfectaron los plásmidos en células XtenCHOTM>/sup> de nuestra propiedad. Se recogió el medio de cultivo y se determinó el rendimiento de producción mediante análisis por Octet RED. A continuación, se purificó el anticuerpo por afinidad frente a proteína G.

Control de calidad del Pembrolizumab purificado. Tinción con azul de Coomassie.

A. SDS-PAGE en condiciones no reductoras. B. SDS-PAGE en condiciones reductoras.

RESULTADOS DE LA EXPRESIÓN DEL ANTICUERPO PEMBROLIZUMAB

AnticuerpoRendimiento de producciónPureza
Pembrolizumab235 mg/L>95%

¿Cuáles son los beneficios de la
producción de anticuerpos monoclonales?

La producción de anticuerpos monoclonales mediante la tecnología de expresión recombinante, ha supuesto un avance clave en este contexto, el desarrollo de anticuerpos terapéuticos ya que conduce a varias ventajas con respecto al método de producción de anticuerpos «tradicional» a partir de hibridomas.

 

Reproducibilidad, control y seguridad

La producción de anticuerpos monoclonales para aplicaciones terapéuticas requiere un alto control y una buena reproducibilidad. Puesto que ciertos parámetros cruciales, tales como la secuencia de ADN y de proteína vienen definidos químicamente,la producción de anticuerpos recombinantes permite la creación de un proceso para la producción de anticuerpos monoclonales estandarizado, con una variabilidad entre lotes muy baja. Como la producción de anticuerpos recombinantes comienza a partir de un anticuerpo o una secuencia de ADN conocidos, se evitan las posibles mutaciones o desviaciones de la línea celular que se pueden producir en las líneas celulares de hibridoma.

 

Alta pureza

La producción de anticuerpos recombinantes conduce a un grado de pureza alto debido a la ausencia de contaminantes del suero.

 

Ingeniería y diseño de formatos alternativos

La producción de anticuerpos recombinantes permite controlar la estructura del anticuerpo a nivel genético.Esto resulta especialmente importante para el desarrollo de anticuerpos terapéuticos, ya que permite modular a la perfección las propiedades farmacológicas modular las propiedades farmacológicas de un anticuerpo.

La posibilidad de modificar el gen que, posteriormente, se va a expresar mediante un sistema de expresión seleccionado, también permite acceder a un abanico infinito de soluciones en términos de:


Sin uso de animales

Actualmente se está prestando especial atención a la ética en materia de bienestar animal. Gracias a la tecnología de la producción recombinante, el proceso de producción de anticuerpos se puede llevar a cabo sin uso de animales.

¿Transitoria o estable? ¿Qué servicio de producción de anticuerpos monoclonales debería elegir?

La elección de la solución de producción de anticuerpos monoclonales más adecuada para su proyecto puede tener un impacto crucial sobre el mismo, por ejemplo, en términos de plazos. Por este motivo, ponemos a su disposición esta breve sección en la que le explicamos cómo decidir entre la expresión de anticuerpos transitoria o estable.

La producción de anticuerpos monoclonales ofrece una ventaja clave: permite la producción rápida de una cantidad relativamente grande de anticuerpo.Sin embargo, en la transfección transitoria, el gen transfectado no se integra en el genoma del huésped y se puede perder en unos días (en un periodo de tiempo corto, varios días). Por tanto, puede resultar la solución perfecta para aplicaciones a corto plazo como, por ejemplo, la producción de proteínas a pequeña escala.

La generación de líneas celulares estables se basa en la integración de un gen sintético en el genoma del huésped del sistema de expresión. Puesto que puede ser un proceso de desarrollo largo y complicado (> 3 meses), las líneas celulares estables son preferibles para aplicaciones a largo plazo como, por ejemplo, la producción de anticuerpos terapéuticos.Para la bioproducción a gran escala, las líneas celulares estables permiten crear un proceso estandarizado que garantice un rendimiento más alto y un buen control de calidad.

Si tiene alguna otra duda, póngase en contacto con nuestro gestor de cuentas doctorado sin ningún compromiso, estará encantado de guiarle hacia la solución de producción de anticuerpos más adecuada en su caso.

*at least 4 antibodies