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¡Elija la expresión de proteínas eucariotas más rentable! ProteoGenix combina su
amplia experiencia en producción de proteínas y una caja de herramientas completa para optimizar su
expresión de proteínas en levadura.
Elija entre P. pastoris y S. cerevisiae para su expresión de proteínas.
Ofrecemos diferentes cepas de P. pastoris o S. cerevisiae para optimizar su producción de proteínas.
Con más de 1500 expresiones de proteínas, puede confiar en nuestra experiencia.
Desde el gen optimizado hasta la proteína, ¡somos su socio en expresión de proteínas!
En ProteoGenix, un responsable de cuenta con doctorado le acompaña.
Las levaduras son conocidas por su rápido crecimiento y alta producción de proteínas.
2. Expresión a pequeña escala
3. Escalado y purificación de la expresión proteica
| Etapa | Contenido | Plazo | Entregables |
|---|---|---|---|
| Estudio piloto |
|
4 a 5 semanas |
|
| Expresión transitoria de proteínas y purificación |
|
2 semanas |
|
Opciones
Síntesis de genes, incluida la optimización de codones para expresión de proteínas y subclonación en un vector de expresión
Cromatografía de exclusión por talla
Pulido (ADN, HCP, endotoxinas)
Eliminación de endotoxinas
Análisis: WB, SEC analítica
La elección del organismo hospedador es fundamental una vez que se decide realizar la expresión de proteínas en levaduras. Hay muchos tipos celulares descritos en la literatura, sin embargo, S. cerevisiae y P. pastoris son los más utilizados.
Este último ofrece varias ventajas para la expresión de proteínas como:
Nivel muy bajo de secreción de proteínas endógenas: Pichia pastoris expresa una cantidad muy baja de proteínas secretadas, lo que significa que la mayoría de las proteínas en el medio representan la proteína recombinante de interés. Esta propiedad simplifica claramente el proceso de purificación de proteínas.
Alta expresión de proteínas: Pichia pastoris puede crecer a alta densidad celular. Así, este hospedador permite una producción de proteínas de alto rendimiento.
Modificaciones post-traduccionales: Pichia pastoris posee toda la maquinaria post-traduccional propia de células eucariotas. Este hospedador puede realizar fosforilaciones y glicosilaciones (diferentes de las observadas en la expresión de proteínas en células de mamífero).
Libre de endotoxinas
Para concluir, la expresión en Pichia pastoris suele ser la opción preferida para la producción de proteínas secretadas. Pichia pastoris también es relevante para la producción de proteínas terapéuticas. Se ha utilizado como hospedador de levadura para la expresión de varias proteínas terapéuticas que llegaron al mercado, como:
Albúmina sérica humana
Colágeno
Ecallantida
Insulina
Como organismo unicelular, S. cerevisiae y otras levaduras ofrecen ventajas similares a los sistemas procarióticos como E. coli. Así, S. cerevisiae se caracteriza por un corto tiempo de generación, alto rendimiento de biomasa y herramientas bien desarrolladas para la manipulación de ADN.
Entre todas estas ventajas, la expresión de proteínas también ofrece beneficios adicionales en comparación con la expresión en E. coli. Entre ellos:
Modificaciones post-traduccionales:
Se ha demostrado que S. cerevisiae realiza formación de enlaces disulfuro y la mayoría de glucosilaciones post-traduccionales que se encuentran en sistemas de expresión de mamífero. Sin embargo, existen diferencias, ya que S. cerevisiae es conocida por su hipermannosilación (más prominente que en P. pastoris).
Estatus GRAS:
S. cerevisiae tiene estatus GRAS, es decir, es reconocida como segura por la FDA.
Libre de endotoxinas
En general, S. cerevisiae ha sido ampliamente estudiada y cuenta con una gran variedad de herramientas (cepas, vectores de expresión, etc.). Teniendo en cuenta estos aspectos, S. cerevisiae es el hospedador perfecto para proyectos que requieran probar varias condiciones. Al igual que Pichia pastoris, S. cerevisiae se ha utilizado a menudo para la expresión de proteínas terapéuticas. Sin embargo, si es necesario un patrón de glicosilación más “humano”, se preferirá la expresión en células de insecto con baculovirus o en células de mamífero.