Con oltre 20 anni di esperienza nell’espressione proteica su misura e più di 1500 proteine prodotte con successo in 5 sistemi, ProteoGenix è leader nella produzione di proteine ricombinanti e anticorpi difficili da esprimere.

Testimonianze su produzione proteica su misura

Dott. Christian BRONNER,
PhD e ricercatore principale
al CNRS

“ Di recente ho scelto ProteoGenix per la produzione di una proteina ricombinante in cellule HEK293. L’elevata produttività e la forte attività della proteina ottenuta, probabilmente dovute a una corretta glicosilazione e folding, ci hanno permesso di ottenere risultati eccitanti negli studi funzionali e raggiungere nuovi traguardi nel nostro progetto di ricerca. La qualità del servizio e la comunicazione precisa e cordiale con il responsabile del progetto sono stati determinanti per il successo. Raccomando caldamente ProteoGenix per le produzioni di proteine ricombinanti. “

Impianti di fermentazione

Protein production in bacteria, yeast, insect, mammalian cells
Process development in bioreactors

Case Study:

Espressione della proteina Claudiximab

Un cliente ha richiesto l’espressione ricombinante di Claudiximab. Ha ordinato un pacchetto di espressione proteica che comprendeva:

  • Sintesi genica con ottimizzazione dei codoni
  • Sottoclonaggio in un vettore di espressione
  • Espressione e purificazione della proteina su piccola scala

Sintesi genica e sottoclonaggio

I geni che codificano per la catena pesante (HC) e la catena leggera (LC) dell’anticorpo terapeutico Claudiximab sono stati sintetizzati chimicamente con ottimizzazione per espressione in cellule di mammifero. I geni sono stati clonati nel vettore d’espressione proprietario di ProteoGenix: pTXs1.

Espressione proteica

recombinant protein expression purification

Figura 1. Profilo di purificazione di Claudiximab. PAGE ridotta con colorazione blu Coomassie.
IN: campione di input. FT: flow through. W: lavaggio. E1-E11: frazioni eluizione.

protein production QC

Figura 2. Controllo qualità finale di Claudiximab purificato. Colorazione blu Coomassie.
A. PAGE non ridotta. B. PAGE ridotta

Resa di produzione Purezza
Claudiximab 1281mg/L ≥95%

Quale sistema scegliere per la tua produzione di proteine?

Confronto tra i 5 sistemi di espressione offerti da ProteoGenix – Prokariotici vs Eucariotici

Sistema di espressione Tempo PTM Livello di endotossine basso Facile scale-up Secrezione
E. coli 2-3 settimane Basso Alto Alto Basso
B. subtilis 2-4 settimane Basso Basso Alto Intermedio
Lievito (P. pastoris, S. cerevisiae) 5-7 settimane Intermedio Basso Intermedio Intermedio
Baculovirus / Cellule di insetto 6-9 settimane Intermedio Basso Basso Intermedio
Cellule di mammifero 3-5 settimane Alto Basso Intermedio Alto
Sistema di espressione Durata
E. coli 2-3 settimane
B. subtilis 2-4 settimane
Lievito (P. pastoris, S. cerevisiae) 5-7 settimane
Baculovirus / Cellule di insetto 6-9 settimane
Cellule di mammifero 3-5 settimane

Contenuto del servizio
Valutazione di espressione e purificazione su piccola scala con molte condizioni testate.
Produzione e purificazione da 1L.

Codice pacchetto Tipo Sistemi Prezzo
ATX-PTR4S01 4 sistemi Pacchetto espressione E. coli / Lievito / Baculovirus / Cellule di mammifero A partire da 2450€
ATX-PTR3S05 3 sistemi Pacchetto espressione B. subtilis/ Lievito / Baculovirus A partire da 2450€
ATX-PTR2S02 2 sistemi Pacchetto espressione E. coli / Baculovirus A partire da 2450€

Il sistema più utilizzato per la purificazione di proteine ricombinanti è E. coli. È il sistema più semplice, rapido ed economico per l’espressione personalizzata di una proteina. Le colture batteriche crescono molto più velocemente rispetto a cellule di insetto, di mammifero o lievito, rendendo così più agevoli e rapide le prove di varie condizioni. I test possibili sono numerosi, e questo consente tassi di successo più alti per l’espressione delle proteine ricombinanti. I rendimenti in espressione transiente sono generalmente più elevati rispetto a lievito, baculovirus/cellule insetto o cellule di mammifero. La produzione di proteine in E. coli (Escherichia Coli) è spesso la soluzione proposta da ProteoGenix quando è necessario produrre grandi quantità di proteina, ad esempio per cristallografia o risonanza magnetica nucleare (NMR), e non sono richieste modifiche post-traduzionali (PTM). Tuttavia, i limiti principali dell’E. coli sono la presenza di endotossine residue e l’assenza di modifiche post-traduzionali. Rimuovere le endotossine è possibile, ma non conveniente su scala industriale e non risolve i problemi legati alle PTM, che richiedono di passare a un altro sistema di espressione. Grazie ai 5 sistemi disponibili, siamo in grado di soddisfare un ampio numero di richieste e vantiamo oltre il 95% di successo nella sintesi di proteine ricombinanti. Lavoriamo costantemente per integrare nuovi sistemi e soluzioni e garantire il miglior livello di servizio per chiunque abbia bisogno di servizi di produzione proteica ricombinante di alta qualità.

Team, capacità e organizzazione

Se hai dubbi su quale sistema scegliere, il nostro team – produttore leader di proteine – può guidarti dal gene alla proteina aiutandoti a definire la strategia ottimale nel rispetto di tempi, budget e caratteristiche richieste.

I nostri laboratori di espressione proteica ricombinante sono distribuiti su diverse piattaforme e laboratori di supporto per garantire la massima qualità, elevata purezza, rischio minimo di contaminazione e la migliore organizzazione possibile per un servizio affidabile e veloce.

Disponiamo di una piattaforma dedicata per ciascuno dei nostri cinque sistemi, oltre a laboratori separati per controllo qualità, biologia molecolare, confezionamento… Ogni piattaforma è gestita da team leader esperti che assicurano proteine conformi alle specifiche del cliente. Con oltre 1500 proteine prodotte e team specializzati per ogni sistema la nostra competenza non ha rivali.

Applicazioni di espressione proteica ricombinante su misura

Le proteine ricombinanti di ProteoGenix sono utilizzate in una vasta gamma di applicazioni nei settori delle Scienze della Vita: Pharma, Diagnostica, Biotech, Industria Agroalimentare, Crop science, Energie rinnovabili, Cosmetica, Laboratori nazionali di ricerca e altri.

Di seguito una lista non esaustiva di applicazioni:

  • Proteine impiegate in saggi diagnostici per calibrazioni, controlli positivi o componenti di cattura
  • Produzione di varianti anticorpali ricombinanti per umanizzazione di anticorpi terapeutici
  • Produzione di enzimi per processi alimentari o controlli qualità nel food
  • Antigene ricombinante per la produzione di anticorpi policlonali e monoclonali (preparazione antigene)
  • Studi funzionali e di attività
  • Cristallografia
  • Studi di interazione proteica
  • Analisi su brevetti
  • Studi di ingegnerizzazione di mutanti per migliorare l’efficacia in drug discovery