Anticorpi policlonali su misura

La scelta dell’antigene è fondamentale per ottenere anticorpi policlonali di successo. ProteoGenix offre la possibilità di utilizzare (e sintetizzare per te) 3 tipi di antigeni: proteine, peptidi e DNA. Ogni antigene ha vantaggi e limiti specifici ed è consigliato in casi particolari:

• Proteine: quando la proteina (nativa o ricombinante) è disponibile, questa è solitamente l’opzione migliore. Il metodo è conveniente e produce una miscela di anticorpi policlonali diretti verso molti epitopi lungo la sequenza. Questi anticorpi riconoscono probabilmente la proteina nativa e sono ideali se l’applicazione finale richiede condizioni native (IHC, IP, FC…). Tuttavia, possono riconoscere proteine con epitopi omologhi, portando a possibili reazioni crociate non specifiche. Sono quindi meno indicati quando la specificità è critica. Inoltre, alcune proteine ricombinanti sono complesse e/o onerose da produrre o potrebbero non riflettere tutte le caratteristiche della proteina nativa; in questi casi sono preferibili alternative.
• Peptidi: quando la proteina non è disponibile o serve un alto grado di specificità, i peptidi corti sono un’alternativa molto economica. Grazie alla nostra esperienza, prevediamo e sintetizziamo i migliori epitopi proteici da usare come antigene. Si ottiene quindi una miscela di anticorpi policlonali che riconoscono un numero ristretto di epitopi (pari al numero di peptidi usati), risultando più specifici. Poiché possiamo utilizzare solo epitopi lineari in questi progetti, hanno più successo in applicazioni in cui la proteina è denaturata (ad esempio WB). Sono inoltre utili per generare anticorpi molto specifici (contro PTM, membri di famiglie conservate, mutanti, ecc.).
• DNA: È l’approccio più recente e impegnativo per sviluppare anticorpi policlonali. Combina i vantaggi delle due strategie precedenti: consente di ottenere anticorpi contro tutti gli epitopi della proteina nativa anche quando è difficile da produrre. Raccomandato quando altre strategie non hanno avuto successo con antigeni complessi.

Certamente, il tuo esperto PhD dedicato ti supporterà nella scelta dell’antigene ideale per il tuo progetto.

Offriamo 9 specie: coniglio, pollo, topo, ratto, porcellino d’India, capra, pecora, lama, alpaca.

L’animale più popolare per lo sviluppo di anticorpi policlonali è il coniglio. La buona risposta immunitaria e la taglia consentono di ottenere circa 2mg di anticorpi specifici per animale. Quando non è adatto all’applicazione finale, anche ratto e porcellino d’India sono ottime alternative. Offriamo anche programmi di immunizzazione su topo, ma dalla loro piccola taglia si ottiene una quantità da 10 a 100 volte inferiore di anticorpi.

Se l’antigene proteico è molto conservato nei mammiferi, la specie più indicata è il pollo. Questi animali producono IgY invece di IgG, che accumulano nel tuorlo d’uovo. È possibile purificare gli anticorpi direttamente dalle uova e ottenere quantità maggiori (~10 mg/animale).

Infine, se serve un volume molto grande di anticorpi, possiamo immunizzare anche capre e pecore per ottenere ~40 mg/animale.

Il protocollo standard di immunizzazione dura 51 giorni. Tuttavia, se hai urgenza, offriamo il servizio opzionale ExpressWay con tempistica di 28 giorni. Questo protocollo express è disponibile solo per conigli.

Nella maggior parte dei casi garantiamo che gli anticorpi siano attivi in ELISA e garantiamo anche una quantità minima di prodotto finale.

Certo, comunicaci quali campioni vuoi ricevere e lo pianificheremo. I nostri protocolli standard includono una titolazione ELISA dopo la terza immunizzazione.

ProteoGenix è specialista nei progetti complessi. Abbiamo esperienza con target complessi e siamo sicuri della nostra capacità di consegnare risultati.

Nel raro caso in cui il titer non raggiunga la nostra garanzia, discuteremo insieme il perché. A seconda dell’analisi, possiamo proporre tre alternative:

• Eseguire dei booster aggiuntivi senza costi
• Ricominciare il progetto gratuitamente
• Cancellare il progetto e rimborsare tutto tranne la quota di set-up

Non sempre. I passaggi di purificazione concentrano il prodotto finale, aumentando la forza del segnale e riducendo il volume necessario nella tua applicazione. Inoltre, riducono la reattività aspecifica, rendendo il prodotto più specifico e abbassando il rapporto segnale/rumore. Se questi aspetti non sono rilevanti nella tua applicazione finale, la purificazione può non essere necessaria nel tuo caso!