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View ProductsNotre service de test d’expression protéique haut débit est la solution pour surmonter les défis les plus exigeants liés aux protéines difficiles à exprimer ! ProteoGenix a développé une plateforme HTP dédiée à l’optimisation de l’expression protéique. Notre solution : plus de 1000 conditions d’expression soigneusement sélectionnées et testées en parallèle pour propulser en un temps record votre production de protéines.
Pourquoi choisir ProteoGenix pour optimiser l’expression de vos protéines ?
Expression protéique « à la carte »
Nous concevons les conditions d’expression les plus adaptées à tester selon votre cahier des charges.
Gagnez du temps
Nous réalisons 1000 tests en 4 semaines grâce à notre plateforme haut débit totalement automatisée.
La solution ULTIME pour les protéines difficiles à exprimer
Une expression protéique complexe ? Notre criblage haut débit surmonte toutes les difficultés.
Expertise unique en expression protéique
Depuis 2003, nous avons exprimé plus de 1500 protéines.
5 systèmes d’expression
Maîtrise approfondie de 5 systèmes : E. coli, B. subtilis, levure, baculovirus/cellules d’insectes et cellules mammifères.
XtenCHOTM inclus !
Notre service intègre notre système d’expression mammifère haute performance.
Test haut débit d’expression protéique pour protéines difficiles à exprimer
ProteoGenix réunit les connaissances de ses meilleurs experts pour vous proposer la plateforme d’expression protéique haut débit la plus avancée. Conçue selon une règle : « Plus nous testons de conditions pertinentes, plus nous avons de chances d’exprimer votre protéine avec succès ». Notre plateforme permet donc de tester 1000 conditions en 4 semaines afin de répondre, voire dépasser, vos exigences en termes de :
- Productivité
- Purté
- Solubilité
- Stabilité
- Activité biologique
De tels résultats ne sont possibles qu’en proposant un vaste panel de conditions. Voici la liste des paramètres que ProteoGenix peut faire varier :
Possibilités en biologie moléculaire
Synthèse de gènes
ILLIMITÉ
Vecteurs
ILLIMITÉ
Peptides signaux
250+
Tag de purification
15+
Tag de solubilité
15+
Souches et lignées cellulaires
Conditions de culture
Température
Conditions d’induction
Criblage des milieux
Méthode d’extraction
Fermentation
ILLIMITÉ
Purification
Purification
Vous rencontrez des difficultés pour optimiser l’expression de vos protéines ? Contactez nos chefs de projet PhD pour optimiser votre production.
Notre workflow d’expression protéique haut débit
Détermination du meilleur couple hôte/vecteur
- Test de plusieurs transformants
- Sélection des meilleurs résultats
- Tests de purification sur le couple optimal
Optimisation de l’expression protéique en flacon
- Optimisation de plusieurs conditions de culture (température, temps d’induction…)
- Détermination de la meilleure stratégie d’alimentation
Optimisation de la purification protéique
Optimisation de l’expression protéique en bioréacteur
- Optimisation des paramètres opératoires de fermenteur/bioréacteur
- Purification des protéines et analyses QC : SDS/Page, Western
Exemple de projet type
320 TESTS
- 4 souches d’E. coli
- 4 lignées cellulaires de mammifères
- 2 tags de purification
- 2 synthèses de gènes
- 4 vecteurs
- 5 peptides signaux
2 meilleures combinaisons systèmes/constructions
1350 TESTS
- 3 températures
- 9 conditions d’induction
- 5 optimisations de purification
- 5 méthodes d’extraction
Sélection de la meilleure condition d’expression
200 criblages de milieux
5 meilleures conditions de fermentation
1875 TESTS
Notre procédé de production protéique haut débit
| Étape | Contenu | Délais | Livrables |
|---|---|---|---|
| Détermination du couple hôte/vecteur |
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| Optimisation de l’expression protéique |
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| Optimisation de la purification protéique |
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| Développement de procédé |
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Options
- Élimination de tag par clivage enzymatique
- Dosage et élimination d’endotoxines
- Montée en échelle / Fermentation
Influence de plusieurs paramètres sur l’expression protéique
La production de protéines difficiles à exprimer requiert de faire varier de multiples paramètres pouvant influencer fortement le rendement final, la pureté, la stabilité, la solubilité et l’activité biologique. Si l’on se concentre sur la productivité, voici quelques paramètres à considérer pour l’optimisation de l’expression protéique :
Système d’expression
Le choix du système d’expression optimal est primordial pour l’expression protéique. Il dépend de vos besoins : rendement élevé, repliement correct, modifications post-traductionnelles « human-like » ou compromis selon l’objectif. Voici un tableau présentant les paramètres essentiels à prendre en compte pour choisir le bon système d’expression :
Séquence génique
La synthèse de gène doit être optimisée pour l’organisme hôte grâce à l’optimisation des codons. Ce procédé vise à éviter les codons rares dans la séquence ARNm afin de réduire le risque d’échec d’expression et d’augmenter les probabilités d’obtenir une forte production protéique.
Vecteur
L’optimisation de l’expression passe aussi par le choix du meilleur vecteur d’expression. La partie non-codante régule plusieurs éléments essentiels :
- Le promoteur doit être adapté à la nature de la protéine à exprimer. Pour les protéines toxiques, privilégiez un promoteur à faible expression basale. Les promoteurs forts sont préférés pour obtenir des rendements élevés.
- Le terminateur régule la dégradation de l’ARNm et augmente la stabilité cytoplasmique.
- L’origine de réplication contrôle le nombre de copies du plasmide. Choisir un plasmide à nombre de copies élevé peut aider si le rendement est limité.
Conditions d’expression
Divers facteurs influencent l’expression des protéines :
- Température : dans les systèmes prokaryotes comme E. coli, cela influe sur le repliement et la formation de corps d’inclusion. L’induction à basse température améliore la solubilité. L’expression hypothermique dans les cellules mammifères augmente les rendements.
- Concentration de l’inducteur : une concentration plus faible réduit la transcription et limite les agrégats, améliorant la solubilité.
- Milieux : il doit contenir tous les nutriments nécessaires pour favoriser l’expression recombinante.
Cette liste n’est pas exhaustive. Grâce à notre service haut débit, ProteoGenix optimise bien plus de paramètres. Contactez-nous pour échanger avec un chef de projet PhD sur vos besoins spécifiques et déterminer ensemble les meilleures conditions pour optimiser votre expression protéique.