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Méthodes de découverte
ProteoGenix propose un portefeuille complet de technologies de découverte d’anticorps — de l’immunisation classique à la synthèse de novo assistée par IA. Chaque méthode présente des avantages spécifiques pour les cibles de type pMHC ; nos experts vous aident à sélectionner ou à combiner les approches pour maximiser vos chances de succès.
Immunisation classique suivie de la fusion et du criblage des cellules B. Nos protocoles optimisés compensent la nature tolérante des pMHC.
Isolement direct des cellules B spécifiques de l’antigène puis séquençage unicellulaire et expression recombinante.
Criblage in vitro sur nos banques immunisées propriétaires, incluant LiAb-SFCANCER™ et LiAb-SFAUTOIMMUNE™ (>2×10¹¹ clones).
Découverte IA
L’IA générative crée des séquences d’anticorps sur mesure contre votre cible pMHC — sans immunisation ni banque.
“Nous recommandons les approches basées sur l’immunisation (hybridome, cellule B unique) pour la maturation naturelle de l’affinité, et le phage display avec nos banques immunisées pour la sélection positive/négative intégrée sur pMHC. Le de novo par IA s’impose quand la tolérance immunitaire est un barrage majeur. Pour de meilleurs résultats, combinez au moins deux approches.”
Stratégie d’immunisation
Le choix de l’antigène utilisé pour l’immunisation ou le criblage conditionne la conformation de l’épitope reconnu par l’anticorps — et par conséquent, sa sélectivité physiologique.
Complexe pMHC complet
L’animal est immunisé avec le complexe peptide–MHC entier. Un contre-dépistage sur un pMHC témoin (même MHC + peptide non pertinent) élimine les anticorps dirigés uniquement contre la charpente MHC.
Avantages
Points à considérer
Peptide synthétique seul
L’animal est immunisé avec le peptide synthétique d’intérêt. Un criblage ultérieur sur le complexe pMHC complet permet de sélectionner les anticorps qui reconnaissent le peptide dans sa conformation liée au MHC.
Avantages
Points à considérer
“Pour un taux de réussite maximal, nous recommandons de poursuivre les deux stratégies en parallèle. L’approche pMHC intact garantit la fidélité conformationnelle ; l’approche peptide offre une solution économique complémentaire. Réaliser les deux simultanément maximise la probabilité d’obtenir des anticorps MHC de haute qualité dans un même projet.”
Stratégie essentielle
Les molécules MHC sont conservées et auto-tolérées, ainsi la majorité des anticorps générés ciblent la charpente MHC – et non le peptide. Notre contre-sélection systématique sur un pMHC contrôle (même MHC + peptide non pertinent) élimine ces clones hors-cible et garantit que chaque anticorps délivré est vraiment spécifique du peptide.
Contexte scientifique
Comprendre la biologie des pMHC est essentiel pour saisir pourquoi développer des anticorps contre ces cibles requiert une expertise spécifique.
Présente des peptides endogènes (~8–11 acides aminés) générés par le protéasome puis chargés dans le réticulum endoplasmique. Exprimé sur toutes les cellules nucléées, il permet aux lymphocytes T CD8⁺ cytotoxiques de détecter les cellules infectées ou tumorales.
Molécules humaines : HLA-A HLA-B HLA-C
Intérêt thérapeutique : cible principale pour l’immunothérapie anticancéreuse et l’ingénierie CAR-T.
Présente des peptides exogènes (~13–18 acides aminés) chargés dans les compartiments endosomaux/lysosomaux. Exprimé principalement sur les cellules présentatrices d’antigène (cellules dendritiques, macrophages, lymphocytes B).
Molécules humaines : HLA-DP HLA-DQ HLA-DR
Module l’immunité adaptative : activation des T auxiliaires CD4⁺, B, et production de cytokines.
Antigène recombinant
Avant toute découverte d’anticorps, un pMHC recombinant ultra pur est essentiel. ProteoGenix propose plusieurs stratégies d’expression répondant à des exigences distinctes en glycosylation, rendement et flexibilité du peptide. Nous recommandons le système optimal selon votre allèle HLA et peptide.
| Stratégie | Système | Mode d’expression | Glycosylation | Avantages clés | Limitation |
|---|---|---|---|---|---|
| Chaînes séparées + renaturation | E. COLI | Corps d’inclusion → renaturation | Aucune | Rentabilité ; stabilité même sans peptide | Rendement dépendant allèle/peptide |
| Fusion à chaîne unique (β2m–linker–MHC) | MAMMIFÈRE | Soluble, sécrété | Native | Glycosylation native ; rendement élevé ; sécrétion stable | Peut être instable/peu productif sans peptide de fusion |
| Co-expression de chaînes séparées | MAMMIFÈRE | Sécrété dans le milieu | Native | Glycosylation native ; flexibilité de chargement du peptide | Dissociation possible lors de la purification |
| Fusion à chaîne unique (β2m–linker–MHC) | E. COLI | Corps d’inclusion | Aucune | Format rare chaîne unique sans système eucaryote | Insoluble par défaut ; renaturation complexe |
* Évaluation de faisabilité requise pour le contrôle par spectrométrie de masse du chargement peptidique.
Espèces pour l’immunisation
Le choix de l’espèce est déterminant dans un projet d’anticorps pMHC où tolérance immunitaire et couverture épitopique sont cruciales.
Lapin (recommandé)
Diversité, affinité, sensibilité et spécificité supérieures à celles des rongeurs. Parfait pour des cibles complexes et peu immunogènes comme le pMHC. Répertoire germinal large inatteignable par les souris.
Souris humanisées
Idéal si la tolérance à l’MHC humain est le principal obstacle. Modifiées pour produire des séquences d’anticorps humains, elles surpassent la tolérance du soi. Fournissent des anticorps entièrement humains.
Humain (phage display / IA)
Anticorps humains issus de nos banques propriétaires ou du design de novo IAxplore®. Aucun animal requis. Avantage : pas de contrainte de tolérance chez l’hôte.
Conseil personnalisé
Vous ne savez pas quelle technique choisir pour votre projet ? Contactez-nous pour un conseil personnalisé par nos experts.
ProteoGenix gère chaque étape de la génération d’anticorps anti-pMHC — vous bénéficiez d’un interlocuteur unique garant du résultat final.
Étude de cas
Découverte rapide d’anticorps anti-pHLA sélectifs pour la thérapie CAR-T du mélanome
Un laboratoire pharmaceutique américain recherchait des anticorps contre un complexe peptide–HLA (pHLA) spécifique du mélanome pour une thérapie CAR-T — tolérance zéro pour les réactions croisées avec le même HLA présentant d’autres peptides. La discrimination d’un seul acide aminé était cruciale.
Réponses d’experts
Questions fréquentes des scientifiques sur les cibles pMHC
Plateforme complète
