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Notre service de tests d’expression protéique à haut débit est la solution idéale pour surmonter les défis liés aux protéines difficiles à exprimer ! ProteoGenix a développé une plateforme HTP dédiée à l’optimisation de l’expression des protéines. Notre solution : plus de 1 000 conditions d’expression soigneusement sélectionnées et testées en parallèle pour booster votre production de protéines en un temps record.
Nous concevons les conditions d’expression les plus adaptées à tester afin de répondre à vos spécifications.
Nous réalisons 1 000 tests en 4 semaines grâce à notre plateforme entièrement automatisée à haut débit.
Une expression protéique complexe ? Notre criblage à haut débit relève tous les défis.
Plus de 1 500 protéines exprimées depuis 2003.
Maîtrise approfondie de 5 systèmes : E. coli, B. subtilis, levure, baculovirus/cellules d’insectes et cellules de mammifères.
Notre service peut inclure notre système d’expression sur cellules de mammifères haute performance.
ProteoGenix réunit l’expertise de ses meilleurs spécialistes pour vous proposer la plateforme d’expression protéique à haut débit la plus avancée. Nos installations de criblage à haut débit sont conçues selon un principe : « Plus on teste de conditions pertinentes, plus on a de chances d’obtenir une expression réussie de la protéine ». Ainsi, nous testons 1 000 conditions en seulement 4 semaines pour répondre, voire dépasser, vos attentes sur :
Obtenir de tels résultats n’est possible qu’en proposant un large éventail de conditions d’expression. Voici les paramètres que ProteoGenix peut faire varier :
Synthèse de gènes
Vecteurs
Peptide signal
Tag de purification
Tag de solubilité
Température
Conditions d’induction
Milieux
Criblage
Méthode d’extraction
Fermentation
ILLIMITÉ
Purification
Avez-vous des difficultés à optimiser votre expression protéique ? Contactez nos chefs de projet PhD pour libérer tout le potentiel de votre production.
2. Optimisation de l’expression en flacon
3. Optimisation de la purification protéique
4. Optimisation de l’expression en bioréacteur
320 TESTS
2 meilleures combinaisons système/construction
1 350 TESTS
Sélection de la meilleure condition d’expression
200 criblages de milieux
5 meilleures conditions de fermentation
1 875 TESTS
| Étape | Contenu | Délai | Livrables |
|---|---|---|---|
| Détermination du couple hôte/vecteur |
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| Optimisation de l’expression protéique |
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| Optimisation de la purification protéique |
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| Développement du procédé |
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La production de protéines difficiles à exprimer nécessite la variation de nombreux paramètres pouvant influencer fortement le rendement, la pureté, la stabilité, la solubilité et l’activité biologique finals. Si l’on s’intéresse spécifiquement à la productivité, voici quelques paramètres clés à considérer dans l’optimisation de l’expression :
Le choix du système d’expression optimal est primordial pour l’expression des protéines. Il dépendra de vos exigences : productivité, repliement correct, modifications post-traductionnelles « human-like », ou un compromis. Voici un tableau détaillant les points essentiels à considérer pour choisir le bon système :
La synthèse de gènes doit être optimisée pour l’hôte via l’optimisation des codons. Cela permet d’éviter les codons rares dans l’ARNm, réduisant ainsi le risque d’échec de l’expression et augmentant la productivité.
L’optimisation de l’expression protéique dépend aussi du choix du vecteur d’expression. Les séquences non-codantes régulent plusieurs éléments essentiels à l’expression :
Le promoteur doit être adapté à la nature de la protéine à exprimer. Pour les protéines toxiques : on privilégiera un promoteur à faible expression basale.
Pour une expression à haut rendement : les promoteurs puissants sont préférés.
Le terminateur régule la stabilité de l’ARNm et sa durée de vie dans le cytoplasme.
L’origine de réplication contrôle le nombre de copies de plasmide. Une origine à haut nombre de copies peut compenser une expression faible.
De nombreux facteurs connus influencent l’expression des protéines :
Température : dans les systèmes prokaryotes tels que E. coli, l’expression peut générer un mauvais repliement, formant des corps d’inclusion. Induire à plus basse température favorise la solubilité.
L’expression hypothermique en cellules de mammifères augmente sensiblement les rendements.
Concentration d’inducteur : diminuer la concentration d’inducteur réduit le taux de transcription, limite la formation d’agrégats (corps d’inclusion) et augmente la solubilité.
Milieux : le milieu de culture doit contenir tous les nutriments nécessaires pour favoriser l’expression recombinante.
Cette liste n’est pas exhaustive et ne présente qu’une partie des paramètres que ProteoGenix peut optimiser grâce à son service d’expression protéique à haut débit. Contactez-nous pour discuter de vos besoins spécifiques avec notre chef de projet PhD, qui définira les meilleurs paramètres à faire varier pour optimiser votre expression.
