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130 anticuerpos validados en 3 semanas impulsando la terapia CAR-T para cáncer de mama
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Cliente
Start-up australiana
Sector
Terapéutica
-
Enfermedad objetivo
Cáncer de mama
Plazo
3 semanas
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Procesos clave
- Panning de la biblioteca propia de phage display de ProteoGenix
- Pantalla ELISA de un solo fago
- Secuenciación de los binders específicos
- Validación por ELISA de fagos monoclonales
>100
Binders generados
3
Semanas de plazo
Contexto
ProteoGenix fue seleccionado para desarrollar un panel de anticuerpos de alta calidad para una start-up australiana dedicada a una innovadora terapia CAR-T dirigida al cáncer de mama. El cliente afrontaba un desafío crítico: identificar la secuencia óptima de anticuerpo capaz de reconocer su objetivo tumoral con alta afinidad y especificidad. Para maximizar sus probabilidades de éxito en este programa terapéutico de alto riesgo, la estrategia priorizó la generación de un conjunto amplio y diverso de candidatos validados en lugar de limitarse a unas pocas opciones. Este enfoque proporcionó al cliente múltiples oportunidades para su pipeline de desarrollo clínico.
Retos
1
Generar un alto número de anticuerpos cualitativos
2
Equilibrar el enriquecimiento de binders de alta afinidad preservando la diversidad de la biblioteca
Enfoque de ProteoGenix
Para este proyecto, la tecnología de phage display se consolidó como la solución ideal. A diferencia de los métodos tradicionales como el hibridoma o la inmunización animal, que requieren meses, el phage display permite cribar miles de millones de variantes de anticuerpos en solo semanas, una ventaja clave cuando la rapidez para llegar a clínica es fundamental. La capacidad de analizar grandes bibliotecas in vitro nos permitió abarcar un amplio espectro para capturar binders raros y de alta calidad, manteniendo estrictos controles de presión selectiva y especificidad.
Seleccionamos nuestra biblioteca propia LiAb-SFMAX™, una de las mayores bibliotecas totalmente humanas de scFv en la industria, con una diversidad excepcional de 5,37×10¹⁰ clones únicos. Esta enorme diversidad fue clave para el rendimiento del proyecto. Con miles de millones de variantes de anticuerpos listas para ser cribadas, podíamos explorar simultáneamente diferentes epítopos, modos de unión y marcos de anticuerpos en una sola campaña.
Esto aumentó significativamente las probabilidades de no solo conseguir un hit, sino decenas de candidatos con relevancia terapéutica. Para un programa CAR-T donde la elección del epítopo y la cinética de unión pueden determinar el éxito clínico, esta diversidad se traduce en una vía de desarrollo con menos riesgos.
- Panning de nuestra biblioteca LiAb-SFMAXTM (diversidad de 5,37×10¹⁰ clones diferentes, scFv)
2. Cribado ELISA de binders de un solo fago (480 detectados)
3. Secuenciación de los que se unen específicamente al antígeno, resultando en 130 secuencias únicas
4. Validación por ELISA de fagos monoclonales de los 130 clones
Resultados
El cribado inicial de 480 binders seleccionados aleatoriamente mediante phage display permitió identificar 453 clones que demostraron unión específica al antígeno objetivo frente a los controles negativos. El análisis de secuenciación de estos clones reveló 130 secuencias de anticuerpos distintas y únicas. Para garantizar la calidad de los clones, las 130 secuencias únicas fueron revalidadas por ELISA. Esta es una etapa crítica de confirmación, ya que los clones derivados de phage display pueden mostrar unión no específica y poner en riesgo la fiabilidad de los resultados. En este proyecto, las 130 secuencias demostraron una unión específica al antígeno, ofreciendo al cliente un panel fiable de candidatos validados para el desarrollo de terapias CAR-T.
Conclusión clave
ProteoGenix cribó 480 binders de phage display e identificó 130 secuencias de anticuerpos totalmente validadas para una start-up australiana en solo 3 semanas.
Los 130 candidatos únicos superaron la revalidación por ELISA de fagos monoclonales, asegurando un panel diverso y con alta fiabilidad.
Este robusto conjunto de datos maximiza las oportunidades del cliente para identificar la secuencia óptima de anticuerpo para el desarrollo clínico de terapia CAR-T en cáncer de mama.
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