Case report

130 candidati anticorpali validati in 3 settimane per la terapia CAR-T contro il cancro al seno

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Cliente

Start-up australiana

Settore

Terapie
Patologia target

Cancro al seno

Tempistiche

3 settimane
Processi chiave
- Panning della libreria phage display proprietaria di ProteoGenix
- Screening ELISA di phage binders singoli
- Sequenziamento dei binders specifici
- Validazione tramite Monoclonal Phage ELISA

>100

Binders generati

Settimane di lavoro

Contesto

ProteoGenix è stata scelta per sviluppare un pannello di anticorpi di alta qualità per una start-up australiana impegnata nello sviluppo di una terapia cellulare CAR-T innovativa contro il cancro al seno. Il cliente si trovava ad affrontare una sfida cruciale: identificare la sequenza anticorpale ottimale in grado di riconoscere il proprio target tumorale con elevata affinità e specificità. Per massimizzare le possibilità di successo in questo programma terapeutico ad alto rischio, la strategia ha dato priorità alla generazione di un ampio set diversificato di candidati anticorpali validati, invece di pochi. Questo approccio ha offerto al cliente più opportunità per la pipeline di sviluppo clinico.

Sfide

Generare un elevato numero di anticorpi di alta qualità

Bilanciare l’arricchimento per binders ad alta affinità mantenendo la diversità della libreria

Approccio di ProteoGenix

Per questo progetto, la tecnologia phage display si è dimostrata la soluzione ideale. A differenza degli approcci tradizionali come l’ibridoma o l’immunizzazione animale, che richiedono mesi, il phage display consente di selezionare rapidamente miliardi di varianti anticorpali in poche settimane—una caratteristica fondamentale quando la rapidità verso la clinica è essenziale. La capacità di interrogare in vitro librerie enormi ci ha permesso di selezionare binders rari e di alta qualità mantenendo un controllo rigoroso della pressione selettiva e dei requisiti di specificità.

Abbiamo selezionato la nostra libreria proprietaria LiAb-SFMAX™—una delle più grandi librerie completamente umane di scFv nel settore, con un’eccezionale diversità di 5,37×10¹⁰ cloni unici. Questa vasta sequenza è stata la chiave per le performance del progetto. Avendo miliardi di varianti pronte per lo screening, abbiamo potuto esplorare contemporaneamente molteplici epitopi, modalità di legame e framework anticorpali in un’unica campagna.

Questo ha aumentato notevolmente le probabilità di selezionare non solo un “hit”, ma dozzine di candidati terapeuticamente rilevanti. Per un programma CAR-T dove la scelta dell’epitopo e la cinetica di legame possono determinare il successo clinico, questa diversità riduce i rischi nel percorso di sviluppo.

Panning della nostra libreria proprietaria LiAb-SFMAXTM (diversità di 5,37×10¹⁰ cloni diversi, scFv)

2. Screening ELISA di phage binders singoli (480 binders)

3. Sequenziamento dei binders che legano specificamente l’antigene—ottenendo 130 sequenze uniche

4. Validazione mediante Monoclonal Phage ELISA dei 130 cloni

Risultati

Lo screening iniziale di 480 phage binder selezionati casualmente ha identificato 453 cloni con legame specifico verso l’antigene target rispetto ai controlli negativi. L’analisi di sequenziamento di questi 453 cloni ha rivelato 130 sequenze anticorpali distinte e uniche. Per assicurare la qualità dei cloni, tutte le 130 sequenze sono state sottoposte a re-validazione tramite ELISA. Questa fase è fondamentale perché i cloni derivati da phage display possono occasionalmente mostrare legami aspecifici, influenzando l’affidabilità. In questo progetto, tutte le 130 sequenze hanno dimostrato legame specifico, offrendo al cliente un pannello di candidati anticorpali validati e di alta affidabilità per lo sviluppo della terapia CAR-T.

Key Takeway

ProteoGenix ha selezionato 480 phage binder tramite phage display e identificato 130 sequenze anticorpali distinte e completamente validate per una start-up australiana in sole 3 settimane.

Tutti i 130 candidati unici hanno superato la ri-validazione tramite ELISA monoclonale, garantendo un pannello anticorpale diversificato e sicuro.

Questo dataset robusto massimizza le possibilità del cliente di identificare la sequenza ottimale per lo sviluppo clinico di terapie CAR-T per il cancro al seno.

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