Descubrimiento de Anticuerpos de Nueva Generación con NativeMP™ y Tecnología de Phage Display

La importancia de los receptores P2X4

El receptor P2X4 pertenece a la familia P2X de canales iónicos activados por ATP, presentes en células endoteliales vasculares, miocitos cardíacos y células inmunes, y es crucial para las vías de señalización y transporte celular. La implicación del receptor P2X4 en vías celulares tan diversas y críticas resalta su potencial como diana terapéutica. Se ha posicionado como uno de los principales objetivos para el desarrollo de fármacos debido a su papel en procesos cardiovasculares y de inflamación.

Su participación en rutas celulares tan estratégicas subraya su valor como diana terapéutica. Sin embargo, las herramientas eficaces para estudiar y modular el P2X4 nativo han sido limitadas. La mayoría de los anticuerpos existentes no logran unirse a P2X4 debido al uso de antígenos irrelevantes, como péptidos sintéticos, que no reproducen la estructura nativa de la proteína.

Los anticuerpos anti-P2X4 desarrollados por ProteoGenix y Cube Biotech abordan este reto al dirigirse específicamente al P2X4 nativo de longitud completa. Estos anticuerpos abren la vía para:

• Comprender mejor la biología del P2X4 en salud y enfermedad.
• Desarrollar terapias dirigidas para trastornos relacionados con la disfunción de P2X4.
• Proporcionar herramientas avanzadas para la investigación básica y traslacional.

Al estabilizar P2X4 en un entorno similar al nativo y generar anticuerpos totalmente humanos, esta colaboración ofrece soluciones de vanguardia para investigadores y desarrolladores de terapias.

Un enfoque sinérgico: tecnologías de vanguardia.

Resumen Tecnológico Paso a Paso

• Estabilización de P2X4 nativo con la plataforma NativeMP™ de Cube Biotech

Se empleó la plataforma NativeMP™ de Cube Biotech para extraer y estabilizar el receptor P2X4 de longitud completa directamente de la membrana celular, preservando su integridad estructural y funcional nativa, fundamental para identificar anticuerpos que reconozcan la forma biológicamente relevante del P2X4. La proteína estabilizada se purificó en dos pasos: extracción inicial con Rho-MagBeads y cromatografía de exclusión por tamaño para lograr alta pureza, seguida de caracterización biofísica para validar su estructura y asegurar su idoneidad para el cribado de anticuerpos.

• Cribado de bibliotecas de anticuerpos naive mediante Phage Display

ProteoGenix ofrece una amplia gama de bibliotecas de anticuerpos naive adaptadas para el descubrimiento terapéutico de anticuerpos utilizando phage display. Estas bibliotecas son una base excelente para identificar ligandos de alta afinidad. Para este proyecto, ProteoGenix utilizó su biblioteca humana LiAb-SFMAX™, un recurso potente para el descubrimiento rápido y eficiente de anticuerpos.

La biblioteca incluye donantes de cinco grupos étnicos diferentes (en total 368 donantes). Su amplia diversidad genética garantiza cobertura frente a numerosos antígenos humanos y proporciona un repertorio grande en formatos scFv y Fab, abarcando 5.37 x 10¹⁰ clones únicos, lo que eleva las posibilidades de identificar candidatos de alta afinidad rápidamente. Al tratarse de anticuerpos plenamente humanos desde el comienzo, no es necesario realizar pasos adicionales de humanización, lo que reduce de manera significativa el tiempo, coste y complejidad del desarrollo, acelerando el acceso a la aplicación clínica.

Mediante la combinación de diversidad, escala y versatilidad, la biblioteca LiAb-SFMAX™ ofrece una solución altamente eficaz para proyectos de descubrimiento de anticuerpos frente a las proteínas más retadoras.

• Producción recombinante de anticuerpos: sistema de expresión XtenCHO

Una vez identificados los dos mejores candidatos, el sistema XtenCHO™ de ProteoGenix facilitó su producción. Esta plataforma está optimizada para ofrecer anticuerpos con alto rendimiento y bajo nivel de endotoxinas, con una pureza superior al 98% y escalabilidad g/L, garantizando la preparación para aplicaciones en investigación y terapias.

Ventajas únicas de los anticuerpos anti-P2X4

Una visión para el descubrimiento de fármacos y la investigación

Esta colaboración demuestra el valor de combinar la estabilización avanzada de proteínas de membrana con tecnologías de descubrimiento de anticuerpos de última generación. ProteoGenix y Cube Biotech han superado numerosas barreras que antes obstaculizaban el desarrollo de anticuerpos enfocados en P2X4, ofreciendo nuevas oportunidades para terapias dirigidas a enfermedades cardiovasculares e inflamatorias.

¿Está interesado en licenciar estas secuencias? Los anticuerpos anti-P2X4 totalmente humanos ya están disponibles para licenciamiento. No pierda la oportunidad de asegurar estas herramientas innovadoras para su próximo avance en terapias o investigación.