Services d’expression transitoire chez les mammifères

Formulaire de production des protéines

    Un taux de réussite de 90% et plus de 1500 protéines exprimées sont la meilleure démonstration de la qualité de notre service d’expression de protéines ! Quelle est notre stratégie gagnante pour l’expression de protéines à haut rendement ? Des systèmes d’expression de protéines propriétaires de haute performance, une équipe d’experts en protéines et des plateformes de production de protéines dédiées.

    Pourquoi choisir ProteoGenix pour votre
    expression des protéines dans les cellules de mammifères ?

    Augmentez votre
    expression des protéines

    Essayez XtenCHOTM, le système d’expression de protéines le plus performant

    Large éventail de systèmes d'expression mammifères

    En tant qu’expert en production de protéines, nous proposons des systèmes d’expression CHO et HEK avec différents protocoles et outils.

    Production à grande échelle dans un délai court

    Notre culture cellulaire peut atteindre 120L par lot. Obtenez des quantités de protéines de plusieurs grammes en 4 semaines !

    De l'expression transitoire à l'expression stable des protéines

    Nous vous proposons une solution adaptée à vos besoins.

    Experts en
    expression de protéines

    Avec plus de 1500 protéines et un taux de réussite supérieur à 90%, notre expertise n’a pas d’équivalent.

    Solution intégrée du gène à la protéine

    Nous prenons en charge votre projet, de la synthèse des gènes à l’expression des protéines.

    Notre service d'expression de protéine dans une cellule mammifère
    inclut XtenCHOTM !

    XtenCHOTM est la référence en matière d’expression des protéines. Après de nombreuses années de recherche intensive, ProteoGenix a mis sur le marché un système d’expression capable de surpasser ExpiCHO, la référence actuelle. Consultez quelques données sur notre page à propos de la production d’anticorps recombinants.

    Il ne s’agit là que d’une démonstration des performances exceptionnelles que nous pouvons atteindre avec notre système d’expression de protéines breveté. Ne manquez pas l’occasion de faire monter en flèche votre production de protéines avec XtenCHOTM !

    L'expression de nos protéines chez les mammifères
    flux de cellules

    Étape Contenu Délai Livrables
    Synthèse des gènes
    • Synthèse des gènes
    • Optimisation des codons pour le système d’expression mammifère
    • Sous-clonage dans un vecteur d’expression
    4 à 5 semaines
    • Échantillon de test protéique
    Étude pilote
    • Amplification et préparation des plasmides
    • Transfection
    • Expression de protéines à petite échelle
    Expression transitoire de protéines et purification
    • Expression de protéines à grande échelle (1L)
    • Purification par affinité
    • Analyse CQ : SDS-PAGE, concentration
    3 à 4 semaines
    • Protéine purifiée
    • Rapport détaillé
    Génération de pools cellulaires stables
    • Transfection stable
    • Sélection du pool
    12 à 14 semaines
    • Flacons pour pools stables
    • Rapport détaillé
    Génération de lignée cellulaire stable
    • Sélection des meilleurs clones producteurs
    • Caractérisation des clones
    • Étude de stabilité
    • Préparation RCB
    • Optimisation des procédés
    20 semaines
    • RCB testé pour les mycoplasmes
    • COA
    • Rapport détaillé avec protocole
      optimisé

    Options

    Expression de la protéine adaptée
    à vos besoins

    ProteoGenix s’efforce d’offrir à ses clients les plateformes de production de protéines les plus avancées. Avec XtenCHOTM et notre lignée cellulaire déficiente en GS, nos experts ont développé leurs propres outils pour repousser les limites de l’expression de vos protéines et apporter une réponse adaptée à tous vos défis.
    Vous cherchez à produire à court terme une quantité de protéines de plusieurs grammes ? Vous avez besoin d’une lignée cellulaire pour la production de protéines recombinantes à long terme ? N’allez pas plus loin, vous êtes au bon endroit !

    Expression transitoire de protéines

    • Possibilité de quantités multiples (production jusqu’à 120L)
    • Délai : 7 à 9 semaines
    • Production à court terme

    Génération de pools cellulaires stables

    • Production à long terme
    • Délai : 12-14 semaines

    Génération de lignée cellulaire stable

    • Rendement multigrammes
    • Production de protéines à grande échelle et à long terme
    • Délai : ≈6 mois

    Étude de cas : expression protéique d'une IgG de lapin

    Les IgG de lapin présentent une affinité et une spécificité très élevées. Cependant, leur très faible productivité limite souvent leur utilisation (rendement typique d’expression de protéines autour de 20mg/L). ProteoGenix est capable d’exprimer ces anticorps avec des rendements supérieurs à 200mg/L.

    Protocole d'expression des protéines

    Une culture de cellules CHO a été co-transfectée de manière transitoire avec des vecteurs codant pour les IgG HC et LC de lapin. Les cellules ont été récoltées 6 jours après la transfection. L’anticorps cible a été purifié par affinité.

    Figure 1 : Profil de purification du mAb cible. Coloration au bleu de Coomassie.

    Analyse non réductrice.

    MW. Marqueur de poids moléculaire. IN. Entrée. FT. Flow through W. Lavage. E. Fractions éluées.

    Après purification, les fractions d’intérêt ont été regroupées et les échantillons finaux ont été concentrés et soumis à un échange de tampon. Un contrôle final de l’expression des protéines a ensuite été réalisé par SDS-PAGE dans des conditions réduites et non réduites.

    Figure 2 : CQ final du mAb recombinant purifié. Coloration au bleu de Coomassie.

    2µg d’échantillon chargé par voie

    Résultats de la production de protéines

    Rendement / mg/L Pureté / %.
    IgG de lapin 265 90

    Quand faut-il utiliser l'expression de protéines dans des cellules de mammifères ?

    L’expression de protéines multigrammes est un pré-requis pour de nombreux projets académiques (par exemple l’analyse fonctionnelle, la détermination de la structure cristalline…) industriels et biopharmaceutiques. Pendant longtemps, l’obtention de rendements élevés dans les productions de protéines recombinantes utilisant des cellules de mammifères a été considérée comme particulièrement difficile. Aujourd’hui, il est régulièrement possible d’atteindre des rendements supérieurs à plusieurs grammes par litre et permet ainsi de surmonter les problèmes économiques liés à l’utilisation de lignées cellulaires de mammifères. Ces nouvelles avancées dans l’expression des protéines ont été encouragées par l’augmentation rapide des produits biothérapeutiques approuvés exprimés dans des cellules de mammifères.

    De plus en plus d’investissements sont réalisés pour développer des produits biopharmaceutiques tels que des anticorps ou des protéines thérapeutiques. Dans ce contexte, l’utilisation de cellules de mammifères pour la production de protéines présente un intérêt particulier.

    La principale différence entre les lignées cellulaires bactériennes et celles des mammifères provient de la présence de mécanismes métaboliques post-traductionnels. Ainsi, l’obtention d’une expression protéique avec des profils de glycosylation appropriés n’est possible qu’avec la production de protéines dans des cellules de mammifères. Ceci est particulièrement pertinent pour la production d’anticorps thérapeutiques recombinants où une glycosylation appropriée peut induire une efficacité, une stabilité et une sécurité accrues. En revanche, les fragments d’anticorps peuvent être produits dans des systèmes d’expression bactériens.

    L’expression des protéines dans les cellules de mammifères permet également un repliement correct des protéines, un critère déterminant pour éviter la perte d’activité biologique.

    Pour conclure, l’une des principales idées à garder à l’esprit est que l’expression des protéines recombinantes dans des cellules de mammifères augmente leur compatibilité pour une utilisation ultérieure par l’homme. C’est pourquoi ils sont les systèmes d’expression de référence en matière de production d’anticorps ou de protéines thérapeutiques.