Service de synthèse d’anticorps recombinants

Formulaire de production d'anticorps

    Avez-vous besoin de cribler ou de caractériser un anticorps ? Obtenez 1 mg d’anticorps recombinant en 4 semaines pour l’utiliser dans le dépistage et la caractérisation des anticorps, les études précliniques et toute autre application à petite échelle. Notre système d’expression mammalien exclusif – XtenCHO™ – est le leader du marché de la production transitoire d’anticorps monoclonaux. Grâce à sa capacité avérée à effectuer un repliement et une glycosylation corrects des anticorps, XtenCHO™ surpasse même les solutions commerciales les plus compétitives comme ExpiCHO™. Rejoignez nous pour améliorer vos rendements de production et accédez à notre large gamme de services d’optimisation et de mise à l’échelle de votre production.

    Pourquoi choisir ProteoGenix pour
    la production de vos anticorps recombinants?

    La première solution du marché

    Notre système d’expression propriétaire dépasse même les rendements de production d’ExpiCHO !

    Des prix compétitifs

    730 € pour 1mg d’anticorps purifié* : grâce à XtenCHOTM obtenez des performances exceptionnelles !

    Montant garanti

    Nous garantissons la quantité commandée en suivant des directives de prix bien établies !

    Antibody engineering experts

    Experts en ingénierie des anticorps

    Optimisez votre anticorps par humanisation, maturation d’affinité, développement d’anticorps bispécifiques… Générez et criblez rapidement de multiples variants d’anticorps pour accélérer vos projets de développement.

    Antibody engineering experts

    Diversité des formats d'anticorps

    Protéines scFv, Fab, VHH, pleine longueur ou fusion d’anticorps… produisez votre anticorps dans le format de votre choix.

    Délais courts

    De votre séquence génétique à la production d’anticorps recombinants en 3 à 4 semaines !

    Notre processus de production
    d'anticorps recombinants

    Monoclonal antibody sequencing
    Séquençage des anticorps monoclonaux
    • Séquençage de la longueur totale ou de la région variable
    Hybridoma sequencing
    Séquençage des hybridomes
    • Isolation de l’ARN
    • Synthèse de l’ADNc
    • Amplification des gènes d’anticorps
    De novo antibody protein sequencing
    Séquençage de novo des protéines d’anticorps
    • Digestion enzymatique
    • Séparation LC-MS/MS
    • Séquençage peptidique de novo
    Gene synthesis and cloning for recombinant production
    Synthèse des gènes et clonage
    • Synthèse de gènes avec optimisation des codons pour le système d’expression sélectionné
    • Sous-clonage dans un vecteur de haute expression
    Transfection for recombinant antibody production
    Transfection
    • Amplification et préparation des plasmides
    • Co-transfection des cellules cibles
    Transient expression of recombinant antibodies
    Expression transitoire
    • Expression à petite échelle de l’anticorps
    • Purification des anticorps et analyse CQ

    Services avancés

    Analysis of recombinant antibodies

    Analytique


    Affinité (KD)
    Stabilité
    Agrégation

    Purification of recombinant antibodies

    Purification


    IEX
    SEC
    Autres

    Stable production of recombinant antibodies

    Une production stable


    Dans CHO, HEK,
    propriétaire GS-…

    Contenu de notre service de synthèse
    d'anticorps recombinants

    Etape Contenu Délai Livrables
    Séquençage des anticorps monoclonaux A partir de lignées cellulaires d’hybridomes :

    • Lignée cellulaire d’hybridome fournie par le client
    • Extraction et purification de l’ARN
    • Transcription inverse
    • Amplification de l’ADNc
    • Analyse du séquençage

    A partir d’échantillons d’anticorps purifiés :

    • Échantillon d’anticorps fourni par le client
    • Digestion enzymatique de l’anticorps
    • Séparation LC-MS/MS
    • Séquençage peptidique de novo
    • Assemblage de peptides se chevauchant
    • Analyse des données

    2 à 3 semaines pour les variables
    région et séquence leader

    3 à 4 semaines pour l’anticorps pleine longueur

    • Rapport détaillé
    • Séquence d’anticorps
    Synthèse des gènes et clonage
    • Synthèse des gènes
    • Optimisation des codons pour le système d’expression des mammifères
    • Sous-clonage dans un vecteur d’expression
    2 à 3 semaines
    • Gènes synthétiques clonés dans le plasmide pUC57
    • Certificat d’analyse
    Production d’anticorps monoclonaux
    +purification
    • Amplification et préparation des plasmides
    • Co-Transfection des cellules cibles
    • Expression transitoire et purification
    • Analyse CQ (SDS-PAGE / UV280)
    A partir de 3 à 4 semaines
    • Rapport détaillé
    • Anticorps purifié

    Options disponibles (liste non exhaustive) :

    • Expression dans des systèmes recombinants alternatifs (cellules bactériennes, de levure, d’insecte…)
    • Étapes supplémentaires de purification (IEX, SEC…)
    • Dosage et élimination des endotoxines
    • Analyse des agrégats : SEC-HPLC
    • Détermination du KD : SPR (Biacore), SPRi (XelPlex), Octet Red96
    • Analyse de la stabilité : calorimétrie à balayage différentiel, IR

    XtenCHOTM : le système d'expression de référence pour la production transitoire d'anticorps monoclonaux

    Recherchez-vous une production rapide d’anticorps à des prix compétitifs ? XtenCHO™ rend cela possible.

    Grâce à notre protocole de transfection Xten interne, à notre lignée cellulaire propriétaire XtenCHO™, à plus de 28 ans d’expérience dans la production de recombinants et à plus de 500 projets de production d’anticorps réussis, nous disposons de la solution la plus compétitive du marché.

    Avec des rendements de production dépassant régulièrement même ceux d’ExpiCHO™, nous sommes équipés pour surmonter vos défis uniques d’ expression d’anticorps tout en maintenant des coûts de production faibles.

    Voici quelques exemples des incroyables résultats obtenus dans l’expression transitoire des biosimilaires.

    Pour des résultats plus détaillés sur l’utilisation de XtenCHO™ pour la production d’anticorps recombinants, découvrez d’autres résultats incroyables en téléchargeant notre poster ou en regardant la présentation du Dr. Marcelo Viegas faite au Festival of Biologics (2020).

    Étude de cas : production d'un anticorps recombinant, le Pembrolizumab

    Objectif de l'étude

    Nous présentons ici la production d’anticorps recombinants de Pembrolizumab à l’aide de notre système d’expression exclusif Xten.

    Gènes et vecteurs d'expression

    Les gènes codant pour la chaîne lourde (HC) et la chaîne légère (LC) de l’anticorps thérapeutique Pembrolizumab ont été synthétisés chimiquement avec des optimisations pour l’expression dans les cellules CHO. Les gènes ont été clonés dans le vecteur d’expression des cellules mammifères pTXs1, propriété de ProteoGenix. La carte vectorielle est fournie dans le rapport PDF.

    Tests de production et de purification d'anticorps monoclonaux à petite échelle

    Une préparation d’ADN sans endotoxine a été faite pour les constructions d’expression pTXs1. En utilisant le protocole de transfection exclusif de Xten, les plasmides ont ensuite été transfectés de manière transitoire dans le système exclusif XtenCHOTM cellules.

    Le milieu de culture a été recueilli et le rendement de production a été déterminé par l’analyse Octet Red. L’anticorps recombinant a ensuite été purifié par affinité contre la protéine G.

    CQ du Pembrolizumab purifié. Coloration au bleu de Coomassie.

    A. SDS-PAGE non réduit. B. SDS-PAGE réduite.

    Résultats de l'expression des anticorps du pembrolizumab

    Anticorps Rendement de la production Pureté
    Pembrolizumab 235mg/L >95%

    Quels sont les avantages
    d'un service de synthèse d'anticorps recombinants?

    La synthèse d’anticorps recombinantsa constitué une avancée majeure dans le contexte du développement d’anticorps thérapeutiques, car elle présente plusieurs avantages par rapport à la production « traditionnelle » d’anticorps dans des lignées cellulaires d’hybridomes.

    1 Reproductibilité, contrôle et sécurité optimaux

    La production d’anticorps monoclonaux pour des applications thérapeutiques exige un contrôle et une reproductibilité élevés. Parce que des paramètres cruciaux tels que Les séquences d’ADN et de protéines sont définies chimiquement,La production d’anticorps recombinants permet de créer un processus standardisé pour la production d’anticorps monoclonaux avec de très faibles variations d’un lot à l’autre. Comme la production d’anticorps recombinants commence à partir d’un anticorps ou d’une séquence d’ADN connus, les mutations ou la dérive des lignées cellulaires qui peuvent se produire dans les lignées d’hybridomes sont également évitées.

    2 Haute pureté

    La production d’anticorps recombinants permet d’obtenir un degré de pureté élevé grâce àl’absence de contaminants sériques.

    3 Facilité d’ingénierie et de reformatage

    La production d’anticorps monoclonaux recombinants permet d’accéder au contrôle de la structure de l’anticorps au niveau génétique. Cela est particulièrement important dans le cadre du développement d’anticorps thérapeutiques, car cela permet de moduler les propriétés pharmacologiques d’un anticorps.

    La possibilité de modifier le gène, qui sera ensuite exprimé par un système d’expression sélectionné, donne également accès à une gamme infinie de solutions en termes de.. :

    1. Reformatage: changement d’espèce, d’isotype ou de sous-type
    2. Ingénierie des anticorps: humanisation des anticorps monoclonaux, maturation par affinité, anticorps bispécifiques, conjugués anticorps-médicaments (ADC), fragments d’anticorps (Fab, Fab2, scFv).

    4 Pas d’utilisation d’animaux

    Aujourd’hui, une attention de plus en plus grande est accordée à l’éthique et au bien-être des animaux. Grâce à la technologie de production recombinante, les anticorps peuvent être produits rapidement sans recourir à l’utilisation d’animaux à aucune étape du processus.

    Transitoire ou stable ? Quel
    service de synthèse d'anticorps recombinants choisir ?

    Le choix de la solution la plus appropriée pour votre production d’anticorps monoclonaux peut avoir un impact majeur sur votre projet, par exemple en termes de temps. Pour cette raison, nous mettons à votre disposition cette courte section expliquant comment décider entre l’expression transitoire ou stable d’un anticorps.

    La production d’anticorps recombinants présente un avantage principal : elle permet la production rapide d’une assez importante quantité d’anticorps.. Cependant, lors de la transfection transitoire, le gène transfecté n’intègre pas le génome de l’hôte et peut être perdu en plusieurs jours (sur une courte période, quelques jours). Ainsi, il peut être la solution parfaite pour les applications à court terme telles que expression de protéines à petite échelle.

    La génération de lignées cellulaires stables est liée à l’intégration d’un gène synthétique dans le génome hôte du système d’expression. Comme le processus de développement peut être long et compliqué (>3 mois), les lignées cellulaires stables sont privilégiées pour les applications à long terme telles que production d’anticorps thérapeutiques. Pour la bioproduction à grande échelle, une lignée cellulaire stable permet de construire un processus standardisé qui garantit un rendement plus élevé et un contrôle de qualité.

    Pour toute question supplémentaire, n’hésitez pas à contacter notre responsable de compte PhD qui se fera un plaisir de vous guider vers la solution de production d’anticorps la plus adaptée.

    Quelles sont les applications de l'expression transitoire d'anticorps ?

    L’expression transitoire d’anticorps dans les systèmes mammifères est utile pour de nombreuses applications. Ces systèmes combinent le repliement correct des protéines et leur modification post-traductionnelle avec des délais courts, ce qui les rend inestimables pour.. :

    • Le criblage de candidats médicaments : l’expression transitoire permet de produire des quantités définies d’anticorps dans des systèmes très similaires à ceux utilisés pour la production biopharmaceutique commerciale. De cette façon, la production transitoire permet une caractérisation préliminaire de ces molécules ainsi que la détection des obstacles potentiels à la production, augmentant ainsi de façon exponentielle la possibilité de développer des anticorps.
    • Dépistage des variants d’anticorps : des variants d’anticorps sont fréquemment produits pour tenter d’améliorer certaines propriétés biophysiques des anticorps, notamment l’affinité et la stabilité. Des variants sont également produits au cours du processus d’humanisation des anticorps. Dans ce cas, la production à petite échelle de plusieurs variants permet de sélectionner les meilleurs candidats pour un développement ultérieur.
    • Production à petite échelle pour les applications analytiques :ces systèmes permettent la production rapide d’anticorps ou de fragments de ceux-ci dans de nombreux formats différents. Étant donné que les systèmes mammifères sécrètent efficacement ces molécules dans les milieux de culture, elles peuvent être purifiées à l’aide de méthodes peu coûteuses telles que la purification de protéine A/G. Ces lots d’anticorps très purs peuvent être facilement conjugués avec des marqueurs enzymatiques ou fluorescents pour des applications de recherche ou de diagnostic.

    Production d'anticorps recombinants : cellules et approches

    Les systèmes d’expression mammaliens basés sur les cellules d’ovaire de hamster chinois (CHO) ou de rein embryonnaire humain (HEK) sont les solutions les plus robustes du secteur pour l’expression d’anticorps recombinants.

    Leur capacité à effectuer une glycosylation de type humain (cruciale pour réduire l’immunogénicité des anticorps), un repliement correct des protéines et leurs voies de sécrétion efficaces rendent le processus idéal pour les applications thérapeutiques. Les cellules utilisées pour la production d’anticorps doivent être capables de maintenir une productivité élevée et une constance de lot à lot. Tous ces critères sont remplis par notre lignée cellulaire propriétaire XtenCHO™.

    Notre vaste expertise dans la production d’anticorps dans les systèmes CHO et HEK est également complétée par plus de 28 ans d’expérience dans la production de protéines dans un certain nombre de systèmes, notamment les cellules de bactéries, de levures et d’insectes.

    L’utilisation de ces systèmes pour la synthèse d’anticorps recombinants continue de gagner en popularité en raison de la demande croissante de solutions moins coûteuses et plus rapides. Bien que XtenCHO™ reste notre référence pour la production d’anticorps, nous sommes également en mesure de produire des anticorps complets ou des fragments d’anticorps dans tous ces systèmes alternatifs.

    Quels sont les avantages et les limites de ces alternatives par rapport aux systèmes de production en cellules mammifères ?

    Systèmes de cellules mammifères Systèmes bactériens Systèmes de levure
    Avantages
    • Le repliement correct des protéines
    • Glycosylation de type humain
    • Production extracellulaire – purification plus facile
    • Cohérence élevée d’un lot à l’autre
    • Haute pureté
    • Des rendements de production élevés répondant à des normes de qualité importantes
    • Adapté à tout format d’anticorps, y compris la longueur totale, les fragments d’anticorps ou les conjugués d’anticorps…
    • Des rendements de production élevés
    • Délais de réalisation plus courts (par rapport aux cellules de mammifères)
    • Avantageux pour la production de fragments d’anticorps (scFv, Fab, VHH)
    • Facilité de manipulation génétique
    • Aucune intégration stable requise pour une production à grande échelle
    • Facilité de mise à l’échelle de la production
    • Production extracellulaire – purification plus facile
    • Facilité de manipulation génétique
    • Rendement de production élevé
    • Délais de réalisation plus courts (par rapport aux cellules de mammifères)
    • Modifications post-traductionnelles (mais pas de glycosylation de type humain)
    • Aucune intégration stable requise pour une production à grande échelle
    • Facilité de mise à l’échelle de la production
    Limites
    • Des délais de réalisation plus longs
    • La création de lignées cellulaires stables demande beaucoup de temps et d’efforts.
    • Des lignées cellulaires plus difficiles à concevoir
    • Aucune modification post-traductionnelle
    • Production intracellulaire – méthodes de purification plus sévères requises
    • Risques liés à la création d’organismes d’inclusion
    • Contamination par des endotoxines
    • Risque modéré de perte de plasmide même dans des conditions sélectives
    • Incapacité de réaliser une glycosylation de type humain sans une ingénierie poussée.

    Quel système devez-vous choisir pour l’expression recombinante de votre anticorps ?

    Chaque projet est évalué au cas par cas. Nous sommes donc toujours en mesure de proposer la meilleure solution en fonction de la structure de votre anticorps, de l’application prévue, du budget et du calendrier disponibles, et de l’échelle de production.

    En savoir plus sur nos services d’expression de protéines dans :

    bacterial systems for recombinant antibody production

    Bactéries

    Découvrez notre service d’expression de protéines dans Escherichia coli ou Bacillus subtilis et bénéficiez d’un délai d’exécution court et d’une productivité élevée

    yeast systems for recombinant antibody production

    Levure

    Apprenez-en davantage sur nos protocoles de production de protéines dans Saccharomyces cerevisiae ou Pichia pastoris pour une production optimale et l’extensibilité du processus.

    insect systems for recombinant antibody production

    Cellules d'insecte

    Produisez vos protéines dans des baculovirus/cellules d’insecte pour améliorer le repliement des protéines et obtenir des modifications post-traductionnelles précises.

    Production d'anticorps monoclonaux:
    Du gène à la bioproduction

    La production réussie d’anticorps recombinants commence par une optimisation minutieuse des gènes, des vecteurs et des protocoles de transfection. Ces détails apparemment sans importance représentent l’une des étapes les plus importantes du processus de synthèse d’anticorps. Tous ces paramètres doivent être compatibles avec les exigences des cellules utilisées pour la production d’anticorps.

    Accédez à notre page dédiée aux questions les plus fréquemment posées (FAQ) sur les anticorps recombinants, pour en savoir plus sur toutes les étapes du processus de production ainsi que sur les recommandations de ProteoGenix pour vous aider à atteindre des niveaux de production élevés et constants dans votre projet.

    ProteoGenix a guidé des milliers de chercheurs tout au long de leurs projets de production d’anticorps monoclonaux depuis 2003. En tant que fournisseur d’une solution unique, nous maîtrisons l’ensemble du processus de développement des anticorps, de la génération d’anticorps par le développement d’hybridomes ou phage display, à la production d’anticorps recombinants dans XtenCHOTM et la génération de lignées cellulaires stables. Faire confiance à ProteoGenix, leader de la production d’anticorps monoclonaux, c’est la garantie de faire passer votre projet au niveau supérieur !

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