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View Products¡Nuestro servicio de pruebas de expresión de proteínas de alto rendimiento es la solución para superar los retos más exigentes en proteínas difíciles de expresar! ProteoGenix ha desarrollado una plataforma HTP dedicada a la optimización de la expresión de proteínas. Nuestra solución: más de 1000 condiciones de expresión seleccionadas y probadas en paralelo para impulsar su producción de proteínas en poco tiempo.
¿Por qué elegir ProteoGenix para optimizar
la expresión de sus proteínas?
Expresión de proteínas “a la carta”
Diseñamos las condiciones de expresión más adecuadas para cumplir con sus especificaciones.
Ahorre tiempo
Podemos realizar 1000 pruebas en 4 semanas gracias a nuestra plataforma totalmente automatizada.
La solución definitiva para proteínas difíciles de expresar
¿Tiene desafío con la expresión de proteínas? Nuestro análisis de expresión de proteínas de alto rendimiento supera cualquier reto.
Experiencia única en expresión de proteínas
Hemos expresado más de 1500 proteínas desde 2003.
5 sistemas de expresión
Gran experiencia en 5 sistemas de expresión distintos: E. coli, B. subtilis, levaduras, baculovirus/células de insecto y células de mamífero.
¡XtenCHOTM incluido!
Nuestro servicio puede incluir nuestro sistema de expresión en mamíferos de alto rendimiento.
Prueba de expresión de proteínas de alto rendimiento
para proteínas difíciles de expresar
ProteoGenix combina el conocimiento de sus mejores expertos en producción de proteínas para ofrecerle la plataforma más avanzada en expresión de proteínas de alto rendimiento. Nuestra plataforma ha sido diseñada bajo una regla: “Cuantas más condiciones relevantes probemos, mayores probabilidades de encontrar una vía exitosa para la expresión de su proteína”. Así, nuestra plataforma permite analizar 1000 condiciones en 4 semanas para cumplir o incluso superar sus requisitos en cuanto a:
- Productividad
- Pureza
- Solubilidad
- Estabilidad
- Actividad biológica
Estos resultados solo son posibles proponiendo una amplia gama de condiciones para la expresión de proteínas. Aquí algunos de los parámetros que ProteoGenix puede variar:
Capacidades de Biología Molecular
Síntesis génica
ILIMITADO
Vectores
ILIMITADO
Péptido señal
250+
Etiqueta de purificación
15+
Etiqueta de solubilidad
15+
Cepa y Líneas Celulares
Condiciones de cultivo
Temperatura
Condiciones de inducción
Screening de medios
Método de extracción
Fermentación
ILIMITADO
Purificación
Purificación
¿Tiene dificultades en la optimización de la expresión de proteínas? Contacte con nuestros gestores de cuenta PhD para desbloquear el potencial de su producción.
Nuestro workflow de
expresión de proteínas de alto rendimiento
Determinación del par hospedador/vector óptimo
- Pruebas de varios transformantes
- Selección de los de mejores resultados
- Test de purificación en el mejor par hospedador/vector
Optimización de la expresión en matraz
- Optimización de diferentes condiciones de cultivo (temperatura, inducción…)
- Determinación de la mejor estrategia de alimentación
Optimización de la purificación
Optimización de la expresión en fermentador
- Optimización de parámetros del fermentador/biorreactor
- Purificación de proteínas y análisis QC: SDS/PAGE, western
Ejemplo de un proyecto típico
320 PRUEBAS
- 4 cepas de E. coli
- 4 líneas celulares de mamífero
- 2 etiquetas de purificación
- 2 síntesis de genes
- 4 vectores
- 5 péptidos señal
2 combinaciones de sistemas óptimas
1350 PRUEBAS
- 3 temperaturas
- 9 condiciones de inducción
- 5 procesos de optimización de purificación
- 5 métodos de extracción
Selección de la mejor condición de expresión
200 cribados de medios
5 mejores condiciones de fermentación
1875 PRUEBAS
Nuestro proceso de producción de proteínas de alto rendimiento
| Etapa | Contenido | Cronograma | Entregables |
|---|---|---|---|
| Determinación de la pareja hospedador/vector |
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| Optimización de la expresión de proteínas |
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| Optimización de la purificación de proteínas |
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| Desarrollo de proceso |
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Opciones
- Eliminación de etiqueta mediante corte enzimático
- Análisis de endotoxinas y eliminación
- Escalado de producción / Fermentación
Influencia de varios parámetros en la expresión de proteínas
La producción de proteínas difíciles de expresar requiere variar distintos parámetros que pueden influir fuertemente en el rendimiento final, pureza, estabilidad, solubilidad y actividad biológica. En lo que respecta a la productividad, algunos de los parámetros a considerar para la optimización de la expresión de proteínas son:
Sistema de expresión
La elección del sistema de expresión es esencial cuando se trata de producción de proteínas. La selección dependerá de sus necesidades: alta productividad, plegado correcto, modificaciones postraduccionales “tipo humano” o un equilibrio entre estos requisitos… Aquí una tabla con los principales parámetros a considerar al elegir el sistema adecuado:
Secuencia génica
La síntesis génica debe optimizarse para el organismo huésped mediante la llamada optimización de codones. Este proceso evita codones raros en el ARNm, minimizando fallos de expresión y aumentando la probabilidad de obtener altos rendimientos de proteína.
Vector
La optimización de la expresión también depende, en parte, de la elección del mejor vector. La parte no codificante regula varios elementos esenciales para la expresión:
- El promotor debe ser adecuado a la naturaleza de la proteína. Para proteínas tóxicas, se recomiendan promotores de baja expresión basal. Para alto rendimiento, se privilegian promotores fuertes.
- El terminador regula la degradación del ARNm y mejora la estabilidad del mismo en el citoplasma.
- El origen de replicación controla el número de copias del plásmido. Usar un plásmido de copia alta puede ayudar si obtiene bajos rendimientos.
Condiciones de expresión
Diversos factores influyen en la expresión de proteínas:
- Temperatura: en sistemas procarióticos como E. coli, una temperatura inadecuada puede dar lugar a un plegado incompleto y agregados. Sujetar la inducción a menor temperatura mejora la solubilidad. La expresión hipodérmica en mamíferos también aumenta el rendimiento.
- Concentración de inductor: reducirla disminuye la transcripción y la formación de agregados, aumentando la solubilidad.
- Medio: el medio debe contener los nutrientes necesarios para favorecer la expresión recombinante.
Esta lista es solo una muestra de lo que ProteoGenix puede optimizar gracias a su servicio de expresión de proteínas de alto rendimiento. Contáctenos para hablar con nuestro gestor PhD sobre sus requisitos específicos y así definir los mejores parámetros para su proyecto.