Le cellule di insetto rappresentano un buon sistema per esprimere proteine ricombinanti con avanzate modificazioni post-traslazionali. Le glicosilazioni non sono identiche alle cellule di mammifero, ma sono molto prossime e spesso sufficienti per ottenere delle proteine funzionali. Il tasso di successo di questo sistema è generalmente buono, ma il processo di produzione richiede più tempo rispetto ad altri sistemi in quanto richiede di preparare inizialmente un baculovirus, effettuare la transfezione delle cellule Sf9, Sf21 o Hi5 e poi eseguire 2 giri di infezione. Questo sistema è anche conosciuto come BEVS che vuol dire “Baculovirus Expression Vector System”. Le modifiche post-traslazionali (PTM) sono di solito simili all'espressione nelle cellule di mammifero.

 

Pacchetto Standard di Espressione di Proteine in Baculovirus:

  • Studio del progetto
  • Preparazione bacmid senza endotossine
  • Infezione delle cellule di insetto
  • Generazione di virus P1
  • Generazione di virus P2
  • Test MOI
  • Infezione delle cellule di insetti con virus P2 per la valutazione dell'espressione
  • Analisi SDS / PAGE e WB, se necessarie
  • Test di depurazione
  • Analisi SDS / PAGE e WB, se necessarie
  • Espressione di 1L e purificazione scalare
  • Analisi SDS / PAGE e WB, se necessarie
 
  • 10 - 12 settimane
  • Rapporto finale dettagliato
  • Proteina purificata
 

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