Maturation d’affinité des anticorps avec phage display

Formulaire Maturation d’affinité

Améliorez l’affinité de votre anticorps par un facteur 5 à plus de 1 000 grâce à notre service de maturation d’affinité garanti. Chez ProteoGenix, nous combinons une longue expérience de la technologie du phage display à une expertise de renommée internationale en maturation d’affinité pour mener votre produit jusqu’aux phases cliniques. Notre grand savoir-faire et notre engagement à assurer la réussite de votre projet nous permettent de vous offrir des garanties uniques définies après une étude préliminaire de votre projet.

Pourquoi choisir ProteoGenix pour
la maturation d’affinité de votre anticorps ?

Les meilleurs experts à votre service

Votre projet de maturation d’affinité bénéficiera de 28 années d’expérience dans le développement d’anticorps thérapeutiques pour de grands groupes pharmaceutiques internationaux.

Service garanti

Notre priorité est de minimiser les risques pour les investissements de nos clients. Nos services de maturation d’affinité comprennent des garanties uniques déterminées à la lumière d’une étude préliminaire d’une grande rigueur.

Libres de droits

À la fin du projet, vous détenez tous les droits de propriétés de vos anticorps optimisés par maturation d’affinité.

Des chargés d’affaires titulaires d’un doctorat

Tous vos interlocuteurs en charge de vos projets de maturation d’affinité sont titulaires d’un doctorat afin d’assurer une communication efficace.

De grandes banques d’anticorps exploitables

Notre processus de conception de banques de phage display est basé sur la modélisation en 3D afin de limiter les mutations inutiles et de ne conserver que les mutations les plus appropriées pour des banques plus propres.

Une solution tout-en-un

Faites confiance à un partenaire unique pour conduire sans embûche votre projet d’anticorps thérapeutique jusqu’aux phases cliniques.

Optimisation d’anticorps par maturation d’affinité

ProteoGenix a développé un service de maturation d’affinité de pointe conçu spécialement pour accroître l’affinité de votre anticorps vis-à-vis de sa cible. En plus de l’amélioration de l’affinité, il est également possible d’introduire une réactivité croisée afin d’éviter l’utilisation d’anticorps de substitution pour les études précliniques. De nombreux autres paramètres peuvent être mesurés et optimisés comme :

  • La stabilité,

  • L’immunogénicité,

  • Les toxicités chimiques.

Ces optimisations sont réalisées par mutagenèse dirigée ou aléatoire sur les régions CDR.

  • La mutagenèse dirigée est réalisée d’après les données produites par la modélisation en 3D qui permet d’identifier les résidus impliqués dans l’interaction anticorps-antigène. Des mutations spécifiques sont introduites au niveau des résidus identifiés de sorte à générer une grande banque de phage display avec une faible proportion de variants inutiles et une probabilité élevée de forte amélioration de l’affinité.

  • La mutagenèse aléatoire est réalisée par PCR mutagène. Cette méthode permet de construire de grandes banques contenant 108 à partir de 3 à 10 anticorps sélectionnés.

Quelle stratégie choisir
pour votre projet de maturation d’affinité ?

La maturation d’affinité étant un processus assez complexe, nos experts déterminent la stratégie la plus appropriée après la conduite d’une étude préliminaire. Il s’agit là de la meilleure manière de sécuriser votre investissement et d’inclure des garanties de résultats uniques à votre projet.

Notre processus de maturation d’affinité des anticorps

  • Étude préliminaire par notre expert en maturation d’affinité
  • Test de l’activité liante dans l’application envisagée
  • Élaboration d’un protocole de criblage de banque de phage display
  • Définition d’une stratégie
  • Évaluation d’un rapport comprenant une analyse de faisabilité et des chances de réussite

Bilan 1

  • Conception et construction d’une banque de phage display mutée
  • Conception d’une banque d’après la stratégie de mutagenèse précédemment établie
  • Création d’une banque d’ADN de variants de l’anticorps
  • Création d’une banque de phage display

Bilan 2

  • Criblage de la banque et sélection de variants
  • Criblage de la banque avec le protocole établi dans la première phase (4 à 6 cycles de criblage)
  • Validation des meilleurs phages variants dans l’application envisagée
  • Comparaison des affinités des meilleurs phages isolés

Bilan 3

  • Séquençage et expression des meilleurs variants recombinants
  • Séquençage d’anticorps
  • Synthèse des gènes et sous-clonage dans un vecteur d’expression adapté
  • Test d’expression transitoire en cellules de mammifère

Bilan 4

  • Tests des anticorps
  • Caractérisation des anticorps à la demande du client :
    1. – Détermination du Kd : Biacore (SPR), Xelplex (SPRi), OctetRed
    2. – Analyse de l’activité liante : ELISA
    3. – Analyse de la stabilité : DSC
    4. – Analyse de l’agrégation : SEC-HPLC
    5. – Autres options disponibles
ÉtapeContenuDélaiLivrables
Étude préliminaire
  • Expression de l’anticorps à la surface des phages
  • Test de liaison
  • Établissement d’un protocole spécifique de criblage de banque de phage display
~2 mois
  • Rapport détaillé comprenant une analyse de faisabilité et des chances de réussite, une description de la stratégie du projet et des garanties
Conception et construction de la banque de phage display
  • Conception de la banque
  • Création de la banque de gènes mutés
  • Création de la banque de phage display
~2 mois
  • Rapport détaillé
Criblage de la banque et sélection de variants
  • Criblage de la banque
  • Criblage et validation des meilleurs variants exprimés par les phages dans l’application envisagée
  • Comparaison des affinités par détermination du titre et du KD
~2 mois
  • Rapport détaillé
Séquençage et expression des anticorps recombinants
  • Synthèse des séquences codant pour les anticorps et sous-clonage dans un vecteur d’expression
  • Test d’expression transitoire en cellules de mammifère
~2 mois
  • Échantillon d’anticorps préparé après un test d’expression transitoire (jusqu’à 1 mg d’anticorps purifié)
  • 1 à 100 mg d’anticorps purifié selon la demande du client
  • Rapport détaillé
Caractérisation des anticorps
  • Analyse de l’activité liante par ELISA
  • Analyse de l’agrégation par SEC-HPLC
  • Analyse de la stabilité par DSC
  • Détermination du KD des anticorps par Biacore, XelPlex ou Octet
~1-3 semaines
  • Rapport détaillé
Options disponibles :

À quel stade envisager une maturation d’affinité d’un anticorps ?

La maturation d’affinité est une étape importante pour les anticorps destinés à des utilisations diagnostiques et thérapeutiques ainsi qu’à de nombreuses autres applications nécessitant une forte interaction anticorps-antigène.

Le développement d’un anticorps doit se faire en fonctions des propriétés recherchées pour cet anticorps : fonctionnalité (activités inhibitrices par exemple), spécificité, utilisation dans des applications particulières et, bien sûr, affinité. Mais la sélection d’emblée d’un anticorps possédant toutes ces propriétés peut s’avérer difficile. Il vaut mieux d’abord s’attacher à sélectionner un anticorps possédant la fonctionnalité pour l’application envisagée, et essayer ensuite d’améliorer son affinité à l’aide de notre plate-forme de criblage de banques de phage display.

N’hésitez pas à nous contacter si vous avez besoin de davantage d’informations ou pour demander un devis pour nos services de maturation d’affinité avec phage display.