Question 1

Quali sistemi di espressione offrite (CHO, HEK, E. coli, insetto, lievito…)?

Accepted Answer

Offriamo l’intera gamma di piattaforme di espressione per adattarsi alla tua proteina e applicazione. Questo include sistemi di mammifero (CHO e HEK), con la nostra linea XtenCHO® Race CHO proprietaria per le massime prestazioni nei progetti più esigenti. Eseguiamo inoltre l’espressione in cellule di insetto, lievito, E. coli e Bacillus subtilis per proteine secrete o esigenze specifiche.

Question 2

Come posso decidere quale sistema è il migliore per la mia proteina (dimensione, glicosilazione, solubilità, funzione…)?

Accepted Answer

Il sistema ottimale dipende dalle caratteristiche e dall’utilizzo previsto della tua proteina. Ad esempio, i sistemi di mammifero sono preferiti quando sono richiesti folding nativo o modifiche post-traduzionali, mentre E. coli può essere la scelta più rapida ed economica per proteine semplici e tempistiche brevi. In ogni caso, i nostri esperti PhD analizzeranno target e vincoli insieme a te e ti proporranno la strategia più adatta.

Question 3

Potete esprimere proteine difficili come proteine di membrana, secrete o multidominio?

Accepted Answer

Sì. Gestiamo spesso target complessi, inclusi proteine di membrana, proteine secrete e costrutti multidominio. L’espressione in mammifero, specialmente con XtenCHO Race, è molto indicata per proteine difficili. Con oltre 1.500+ progetti completati, il nostro team vanta un’esperienza approfondita su target complessi ed è riconosciuto come riferimento di mercato per progetti su anticorpi e proteine difficili.

Question 4

Effettuate l’ottimizzazione del codone o ingegneria della sequenza prima dell’espressione?

Accepted Answer

Sì, ottimizziamo sempre i codoni utilizzando un nostro strumento AI proprietario per massimizzare l’efficienza di espressione. Possiamo inoltre analizzare la sequenza per identificare eventuali liabilities e proporre mutazioni mirate per migliorare sviluppabilità e performance, assicurando che la tua proteina sia pronta per la produzione.

Question 5

Che opzioni di scala sono disponibili (screening su piccola scala, media, su grammo)?

Accepted Answer

Copriamo tutte le scale, dallo screening high-throughput e espressione su piccola scala fino alla produzione media o in grammi. Su richiesta, possiamo effettuare espressione transiente su larga scala in bioreattori o sviluppare cell lines stabili per produzioni ad alto volume a lungo termine.

Question 6

Che tecniche di purificazione utilizzate (affinità, scambio ionico, SEC, tag…)?

Accepted Answer

Utilizziamo diverse tecniche di purificazione per proteine della massima qualità. Tra le routine: Nichel (His-tag), Streptactin, affinità antigene, Protein A/G, scambio ionico (IEX) e cromatografia ad esclusione dimensionale (SEC). La strategia viene adattata secondo le esigenze della tua proteina.

Question 7

Offrite servizi aggiuntivi come rimozione tag, refolding o ottimizzazione tampone?

Accepted Answer

Sì, offriamo vari servizi aggiuntivi per garantire prestazioni ottimali, tra cui rimozione tag, refolding, ottimizzazione tampone, rimozione endotossine, test di stabilità, e concentrazione fino a 50mg/mL, tutto su misura per il tuo progetto.

Question 8

Che test QC fornite (SDS-PAGE, SEC-HPLC, endotossine, concentrazione, attività…)?

Accepted Answer

Eseguiamo un set completo di controlli qualità, tra cui SDS-PAGE, ELISA, FACS, SPR/BLI, SEC-HPLC, nanoDSF, MS, test endotossine e determinazione della concentrazione tramite UV280/Bradford, così da garantire la massima qualità.

Question 9

Quali sono i vostri tempi tipici di espressione transiente e stabile?

Accepted Answer

I progetti di espressione transiente possono iniziare da 15 giorni lavorativi, in base a sistema e complessità. Lo sviluppo di una linea cellulare stabile richiede in media 4,5 mesi per generare e validare cloni stabili ad alte prestazioni.

Question 10

Posso fornire il mio vettore, sequenza o linea cellulare?

Accepted Answer

Sì, puoi fornire il tuo vettore o sequenza e possiamo occuparci della costruzione. Tuttavia, usiamo linee cellulari ottimizzate di nostra proprietà per garantire efficienza e coerenza massima.

Question 11

Quanto è flessibile il vostro workflow? È adattabile ai miei tag, tamponi e condizioni preferite?

Accepted Answer

I nostri servizi sono completamente personalizzabili. Possiamo adattare il workflow alle esigenze specifiche della tua proteina, inclusi tag, tamponi o condizioni preferite, garantendo il miglior risultato possibile.

Question 12

Potete assicurare preparazioni senza endotossine per studi cellulari e in vivo?

Accepted Answer

Sì, possiamo garantire preparati privi di endotossine con livelli inferiori a <0,1 EU/mL.

Question 13

Che documentazione include ogni lotto?

Accepted Answer

Ogni lotto viene fornito con Certificate of Analysis (CoA), report di produzione con dati QC e packing slip per garantire piena tracciabilità e trasparenza al tuo progetto.

Question 14

Fornite soluzioni scalabili dalla produzione di discovery a quella preclinica?

Accepted Answer

Sì. Supportiamo i programmi di discovery precoce con espressione high-throughput per screenare e selezionare candidati, per poi passare a produzioni a maggior volume sotto controllo rigoroso. Per le applicazioni precliniche, offriamo purezza, QC e documentazione potenziate per rispondere alle aspettative funzionali e regolatorie.

Question 15

Come garantite purezza, stabilità e attività della proteina finale?

Accepted Answer

Garantiamo resa e purezza in base a SDS-PAGE e SEC-HPLC dopo la run pilota; per gli anticorpi garantiamo attività tramite ELISA. Assicuriamo sempre la massima qualità, ottimizzata per la tua applicazione, grazie a test e validazioni approfonditi.

Question 16

Posso richiedere run pilota prima di passare alla produzione su larga scala?

Accepted Answer

Certo, eseguiamo sempre run pilota per ottimizzare condizioni, resa e purezza prima di passare alla produzione su larga scala.

Question 17

Supportate applicazioni downstream come sviluppo di saggi, generazione di anticorpi o studi strutturali?

Accepted Answer

Sì, supportiamo sviluppo di saggi come ELISA e generazione di anticorpi, sfruttando la nostra esperienza in ibridoma, phage display e single B cell. Attualmente non eseguiamo studi strutturali.

Question 18

Che supporto post-progetto offrite (stoccaggio, re-espressione, purificazioni addizionali…)?

Accepted Answer

Garantiamo un ampio supporto post-progetto, tra cui stoccaggio, ottimizzazione della produzione, scale-up, purificazione avanzata, ottimizzazione della sequenza (es. maturazione dell’affinità e ottimizzazione della sviluppabilità), e sviluppo di linee cellulari stabili, così la tua proteina è pronta per un utilizzo a lungo termine.

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