Informations sur le package

 
  • Design de l’antigène (conception du fragment le plus approprié à produire)
  • 2 synthèses de gènes (chaque gène étant optimisé pour un système d'expression spécifique) et 2 sous-clonages
  • Tests d’expression dans 2 systèmes parmi E. coli, B. subtilis, P. pastoris, cellules d’insectes et cellules mammifères. Choix des systèmes réalisé par ProteoGenix. La version taguée GFP est également produite en parallèle pour contrôler la spécificité en marquage IF.
  • Production de l’antigène dans le système d’expression le plus approprié, en fonction du rendement et des besoins spécifiques du projet.
  • Immunisations de 5 souris
  • Contrôle de la réponse immunitaire en système IF sur cellules transfectées avec la protéine fusionnée à la GFP obtenues à l’étape des tests d’expression.
  • Sélection des 2 meilleures souris pour réaliser 2 fusions afin d’obtenir un grand nombre et une grande diversité de clones.
  • Criblage du produit de fusion directement en IF sur cellules transfectées
  • Contrôle de spécificité grâce à la GFP
  • Sous-clonage des 2 meilleurs clones parentaux (2-3 séries de dilutions limites)
  • Production et purification de 2mg d’anticorps à partir du meilleur clone
  • Niveau 1 : Si nous ne parvenons pas à produire un anticorps qui détecte l’immunogène en IF, nous facturons 1000 Euros.
  • Niveau 2 : Si nous réussissons à produire un anticorps fonctionnel en IF contre l’immunogène, nous facturons seulement une partie du prix du projet.
  • Niveau 3 : Si le client souhaite recevoir l’hybridome après avoir testé l’anticorps purifié, le coût total du projet est dû.
  • Echantillons de surnageants de culture des 10 à 20 meilleurs clones parentaux pour le choix du client
  • 100 µg d’anticorps purifié pour confirmer l’achat de l’hybridome
  • 50 µg de protéine purifiée
  Après paiement du solde total:
  • 1.9 mg d’anticorps purifiés
  • 1 lignée cellulaire d'hybridome (4 vials congelées)
  • 150 µg de protéine purifiée
  • Gène en pUC57
    • Synthèse de gènes : 3-4 semaines
    • Immunisations: 8-12 semaines
    • Fusion et criblage : 5-6 semaines
    • Sous-clonage: 10-15 semaines
    • Production d’Anticorps: 3-4 semaines
    • Total: 36-50 semaines