Cart (0 Items)
Your cart is currently empty.
View ProductsIl nostro servizio di test di espressione proteica ad alto rendimento è la soluzione per superare le sfide più impegnative riguardanti le proteine difficili da esprimere! ProteoGenix ha sviluppato una piattaforma HTP dedicata all’ottimizzazione dell’espressione proteica. La nostra soluzione: oltre 1000 condizioni di espressione selezionate e testate in parallelo per accelerare la tua produzione di proteine in tempi brevi.
Perché scegliere ProteoGenix per ottimizzare
l’espressione delle tue proteine?
Espressione proteica “à la carte”
Progettiamo le condizioni di espressione più adatte per soddisfare le specifiche richieste.
Risparmia tempo
Possiamo eseguire 1000 test in 4 settimane grazie alla nostra piattaforma ad alto rendimento completamente automatizzata.
La SOLUZIONE definitiva per proteine difficili da esprimere
Hai una proteina difficile da esprimere? Il nostro screening di espressione proteica ad alto rendimento supera qualsiasi sfida.
Competenza unica nell'espressione proteica
Abbiamo espresso più di 1500 proteine dal 2003.
5 sistemi di espressione
Conosciamo approfonditamente 5 diversi sistemi di espressione: E. coli, B. subtilis, lievito, baculovirus/cellule di insetto e cellule di mammifero.
Incluso XtenCHOTM!
Il nostro servizio può includere il nostro sistema di espressione in cellule di mammifero ad alte prestazioni.
Test ad alto rendimento per
proteine difficili da esprimere
ProteoGenix combina le competenze dei suoi migliori esperti per fornirti la piattaforma più avanzata di espressione proteica ad alto rendimento. La nostra piattaforma è stata progettata seguendo una semplice regola: “Più condizioni rilevanti testiamo, maggiori sono le probabilità di esprimere con successo la tua proteina”. Con la nostra piattaforma riusciamo a valutare 1000 condizioni in 4 settimane per soddisfare o addirittura superare le tue esigenze di:
- Produttività
- Purezza
- Solubilità
- Stabilità
- Attività biologica
Risultati di questo tipo sono possibili solo proponendo un’ampia gamma di condizioni di espressione proteica. Ecco alcuni dei parametri che ProteoGenix può ottimizzare:
Capacità di biologia molecolare
Sintesi genica
ILLIMITATA
Vettori
ILLIMITATI
Peptide segnale
250+
Tag di purificazione
15+
Tag di solubilità
15+
Ceppi e linee cellulari
Condizioni di coltura
Temperatura
Condizioni di induzione
Screening dei terreni
Metodo di estrazione
Fermentazione
ILLIMITATA
Purificazione
Purificazione
Stai incontrando difficoltà nell’ottimizzazione dell’espressione proteica? Contatta i nostri account manager PhD per sbloccare il potenziale della tua produzione.
Il nostro workflow
per l’espressione proteica ad alto rendimento
Determinazione della migliore combinazione ospite/vettore
- Test di diversi ceppi trasformati
- Selezione di quelli con i risultati migliori
- Test di purificazione sulla migliore combinazione ospite/vettore
Ottimizzazione dell’espressione proteica in matraccio
- Ottimizzazione delle condizioni di coltura (temperatura, tempo di induzione…)
- Determinazione della migliore strategia di alimentazione
Ottimizzazione della purificazione proteica
Ottimizzazione dell’espressione proteica in matraccio
- Ottimizzazione dei parametri operativi di fermentatore/bioreattore
- Purificazione proteica e analisi QC: SDS/PAGE, western
Esempio di progetto tipico
320 TEST
- 4 ceppi di E. coli
- 4 linee cellulari di mammifero
- 2 tag di purificazione
- 2 sintesi geniche
- 4 vettori
- 5 peptidi segnale
2 migliori combinazioni sistema/costrutto
1350 TEST
- 3 temperature
- 9 condizioni di induzione
- 5 ottimizzazioni della purificazione
- 5 metodi di estrazione
Selezione della migliore condizione di espressione
200 screening dei terreni
5 migliori condizioni di fermentazione
1875 TEST
Il nostro processo di produzione proteica ad alto rendimento
| Fase | Contenuto | Tempistiche | Deliverables |
|---|---|---|---|
| Determinazione della combinazione ospite/vettore |
|
|
|
| Ottimizzazione dell'espressione proteica |
|
|
|
| Ottimizzazione della purificazione proteica |
|
|
|
| Sviluppo di processo |
|
|
|
Opzioni
- Eliminazione del tag tramite taglio enzimatico
- Test e rimozione dell’endotossina
- Scale up di produzione / fermentazione
Influenza dei parametri sull’espressione proteica
La produzione di proteine difficili da esprimere richiede la variazione di diversi parametri che possono influenzare fortemente resa finale, purezza, stabilità, solubilità e attività biologica. Analizzando più da vicino la produttività, ecco alcuni parametri da considerare per l’ottimizzazione dell’espressione proteica:
Sistema di espressione
La scelta del miglior sistema di espressione è di primaria importanza. Questa scelta dipenderà dalle tue esigenze: alta produttività, corretto folding proteico, modifiche post-traduzionali “human-like” o un compromesso tra tutti questi requisiti… Ecco una tabella che riassume i parametri da considerare nella scelta del sistema di espressione:
Sequenza genica
La sintesi genica deve essere ottimizzata per l’organismo ospite tramite ottimizzazione dei codoni (codon optimization). Questo processo mira a evitare codoni rari nella sequenza mRNA, limitando il rischio di fallimento nell’espressione e aumentando la probabilità di ottenere un’elevata resa proteica.
Vettore
L’ottimizzazione dell’espressione proteica è influenzata anche dalla scelta del miglior vettore di espressione. Le regioni non codificanti regolano elementi essenziali per l’espressione proteica:
- Il promotore deve essere adattato al tipo di proteina da esprimere. Per proteine tossiche sono preferiti promotori a bassa espressione basale. Promotori forti vengono usati quando si desiderano elevate rese.
- Il terminatore regola il turnover dell’mRNA e ne aumenta la stabilità citoplasmatica.
- L’origine di replicazione controlla il numero di copie del plasmide. Un plasmide ad alto numero di copie può essere utile in caso di basse rese proteiche.
Condizioni di espressione
Diversi fattori influenzano l’espressione proteica:
- Temperatura: nei sistemi prokariotici come E. coli, spesso si ha folding incompleto e formazione di corpi d’inclusione. Indurre l’espressione a bassa temperatura aumenta la solubilità. Anche nelle cellule di mammifero, l’espressione ipotermica porta a rese superiori.
- Concentrazione induttore: una concentrazione più bassa riduce la velocità di trascrizione, limita la formazione di aggregati e aumenta la solubilità.
- Terreno: il terreno di coltura deve contenere tutti i nutrienti essenziali per favorire l’espressione ricombinante.
Questa lista non è esaustiva e rappresenta solo una parte dei parametri che ProteoGenix può ottimizzare grazie al suo servizio di espressione proteica ad alto rendimento. Contattaci per confrontarti con il nostro account manager PhD: insieme definirete i migliori parametri da variare per ottimizzare l’espressione della tua proteina.