Améliorez l’affinité de votre anticorps de cinq à plus de mille fois grâce à notre service garanti de maturation d’affinité des anticorps. Chez ProteoGenix, nous allions notre expertise historique en phage display à notre connaissance reconnue en maturation d’affinité afin d’accompagner votre projet jusqu’à la clinique ! Notre engagement total pour le succès de votre projet fait que notre service de maturation d’affinité d’anticorps inclut des garanties uniques définies suite à une étude préliminaire.

Optimisation des anticorps par maturation d’affinité

ProteoGenix a développé un service de maturation d’affinité haut de gamme visant à augmenter l’affinité de vos anticorps contre leur cible. Outre l’affinité, la multi-réactivité (cross-reactivité) peut également être introduite afin d’éviter l’utilisation d’anticorps substituts lors du développement préclinique. D’autres paramètres peuvent être mesurés et optimisés tels que :

  • Stabilité
  • Immunogénicité
  • Problèmes chimiques

Pour cela, une mutagenèse dirigée ou aléatoire est réalisée sur les régions CDR.

  • La mutagenèse dirigée s’appuie sur la modélisation 3D afin d’identifier les résidus clés impliqués dans l’interaction anticorps-antigène. Des mutations spécifiques sont introduites sur ces résidus pour créer une grande librairie phage display présentant peu de variants inutiles et un fort potentiel d’amélioration de l’affinité.
  • La mutagenèse aléatoire est réalisée via PCR error-prone. Cette méthode permet la construction de vastes librairies contenant 108 variants à partir de 3 à 10 anticorps sélectionnés.

Quelle stratégie choisir
pour votre projet de maturation d’affinité ?

La maturation d’affinité étant complexe, nos experts définissent la stratégie la plus pertinente après une étude préliminaire. Il s’agit de la meilleure façon de garantir à nos clients un investissement sécurisé et d’intégrer des garanties de résultat uniques à vos projets. Cela démontre pleinement notre engagement pour le succès de votre maturation d’affinité d’anticorps.

Notre processus de maturation d’affinité des anticorps

Étude préliminaire par nos experts en maturation d’affinité

  • Test de liaison dans l’application concernée
  • Conception du protocole de sélection phage display
  • Définition de la stratégie
  • Rapport d’évaluation comprenant l’étude de faisabilité de votre projet et les chances de succès
GO/NO GO

Conception et construction d’une librairie phage display mutée

  • Conception de la librairie selon la stratégie de mutagenèse définie
  • Création d’une librairie de variants d’ADN d’anticorps
  • Création de la librairie phage display
GO/NO GO

Sélection et criblage des variants

  • Criblage de la librairie via le protocole établi à l’étape précédente (4 à 6 cycles de sélection)
  • Validation des meilleurs variants phagiques dans l’application cible
  • Comparaison de l’affinité des meilleurs phages individuels
GO/NO GO

Séquençage et expression recombinante des meilleurs variants

  • Séquençage des anticorps
  • Synthèse du gène et sous-clonage dans un vecteur d’expression adapté
  • Test d’expression transitoire sur cellules de mammifères
GO/NO GO

Tests sur les anticorps

  • Caractérisation des anticorps selon la demande du client :
  • Détermination du KD : Biacore (SPR), Xelplex (SPRi), OctetRed
  • Analyse de liaison : ELISA
  • Analyse de stabilité : DSC
  • Analyse des agrégats : SEC-HPLC
  • Autres analyses sur demande
Étape Contenu Délai Livrables
Étude préliminaire
  • Expression de l'anticorps à la surface du phage
  • Test de liaison
  • Mise en place du protocole de criblage phage display sur-mesure
~2 mois
  • Rapport détaillé incluant l’étude de faisabilité, la stratégie du projet et les garanties associées
Conception et construction de la librairie phage display
  • Conception de la librairie
  • Création de la librairie de gènes mutés
  • Création de la librairie phage display
~2 mois
  • Rapport détaillé
Rapport détaillé
  • Séquençage de l’anticorps, synthèse de l’ADN et sous-clonage dans un vecteur d’expression
  • Test d’expression transitoire sur cellules de mammifères
~2 mois
  • Échantillon issu du test d’expression transitoire (jusqu’à 1 mg d’anticorps purifié)
  • 1 à 100 mg d’anticorps purifié selon la demande du client
  • Rapport détaillé
Caractérisation des anticorps
  • Analyse de liaison par ELISA
  • Analyse d’agrégats par SEC-HPLC
  • Analyse de stabilité par DSC
  • Détermination du KD de l’anticorps via Biacore, XelPlex ou Octet
~1-3 semaines
  • Rapport détaillé

Options disponibles :

Quand envisager la maturation d’affinité d’un anticorps ?

La maturation d’affinité est essentielle dans le diagnostic, les biothérapeutiques et de nombreuses autres applications nécessitant une interaction forte anticorps-antigène.

Lors du développement des anticorps, de nombreux critères peuvent être recherchés (fonctionnalité, spécificité, applications spécifiques et bien sûr affinité). Obtenir un anticorps répondant à tous ces critères d’emblée peut s’avérer complexe. Il est donc pertinent de d’abord se concentrer sur la fonctionnalité et l’application, puis d’améliorer l’affinité grâce à notre plateforme avancée de phage display.

Pour plus d’informations ou pour obtenir un devis gratuit sur notre service de maturation d’affinité avec phage display, n’hésitez pas à nous contacter.