Hai mai perso tempo a causa di anticorpi da immunoprecipitazione inaffidabili? Non lasciare che accada di nuovo! Da ProteoGenix, sviluppiamo l’anticorpo per immunoprecipitazione e garantiamo il suo funzionamento nelle tue condizioni sperimentali.

Come puoi essere sicuro che i tuoi anticorpi funzionino nell’immunoprecipitazione?

Fare le scelte giuste inizia dal selezionare i migliori strumenti. Da ProteoGenix, comprendiamo quanto i tuoi esperimenti richiedano tempo e quanto sia essenziale il loro successo per avanzare con i tuoi progetti. Se non vuoi sprecare tempo, i nostri anticorpi garantiti per immunoprecipitazione sono la soluzione migliore perché:

  1. Gestiamo l’intero processo di sviluppo dell’anticorpo dal design dell’antigene fino a hybridoma e produzione dell’anticorpo
  2. Testiamo i tuoi anticorpi nelle tue condizioni
  3. Ti inviamo una parte del campione così potrai convalidarlo dopo averlo testato nel tuo laboratorio

Pronto a iniziare? Contatta i nostri account manager con PhD che ti guideranno durante il progetto!

Fase Contenuto Tempistiche Deliverable
Produzione dell’antigene
  • Design dell’antigene
  • Sintesi del gene
  • Testing su due sistemi di espressione
  • Produzione dell’antigene
10-13 settimane
Immunizzazione dei topi
  • Iniezioni nei topi
  • Controllo della risposta immunitaria tramite FC
8-12 settimane
Produzione degli ibridomi
  • Selezione dei topi
  • Fusione di linfociti B con cellule di mieloma
  • Screening dei prodotti di fusione tramite ELISA
  • Screening dei cloni positivi tramite FC
  • Controllo della specificità
5-6 settimane
  • 10-20 migliori cloni per la selezione del cliente
Produzione dell’anticorpo
  • Subclonazione di due cloni parentali
  • Produzione e purificazione dell’anticorpo
  • QC tramite FC
11-16 settimane
  • 100 µg di anticorpo purificato + 50 µg di proteina purificata come conferma di acquisto dell’ibridoma

Principio dell’immunoprecipitazione

L’immunoprecipitazione è una tecnica basata sull’interazione anticorpo-antigene, utilizzata per isolare o concentrare una proteina target in un campione complesso (lisato cellulare…).

L’immunoprecipitazione sfrutta l’affinità tra un anticorpo e il suo antigene bersaglio. Il principio generale consiste nell’incubare anticorpi altamente specifici in un campione complesso affinché possano legarsi alla proteina d’interesse. Il complesso anticorpo-proteina formato può essere isolato grazie a proteine leganti l’anticorpo (Proteina A o Proteina G o un anticorpo secondario che riconosca l’anticorpo primario) fissate su bead magnetici o bead di agarosio.

Sono utilizzate comunemente due metodologie:

  • Pre-immobilizzazione degli anticorpi sul substrato solido: in questa metodologia, gli anticorpi sono immobilizzati su un supporto solido (agarosio o bead magnetici) prima dell’incubazione con il campione complesso. Il periodo di incubazione consente il legame dell’antigene bersaglio all’anticorpo immobilizzato. Questi complessi possono successivamente essere isolati ed eluìti dal supporto per essere analizzati.
  • Pre-aggiunta degli anticorpi al campione: questa tecnica si riferisce all’aggiunta di anticorpi liberi (non legati) al campione complesso, così da formare un complesso antigene-anticorpo prima dell’aggiunta di un substrato solido. Questo metodo è preferito per antigeni target a basse concentrazioni o quando l’interazione è debole o a cinetica lenta.