Question 1

Quali tecniche utilizzate per la maturazione dell’affinità?

Accepted Answer

Applichiamo varie strategie complementari di maturazione dell’affinità, selezionate in base al formato dell’anticorpo, alle proprietà del target e agli obiettivi di progetto. Tra queste: phage display per lo screening di grandi librerie, error-prone PCR per introdurre diversità controllata, chain shuffling per esplorare gli accoppiamenti ottimali delle catene pesanti/leggere e mutagenesi mirata delle regioni CDR per perfezionare le interazioni di binding. Combinando questi approcci, quando appropriato, miglioriamo efficienza, specificità e sviluppabilità mantenendo il profilo funzionale desiderato.

Question 2

Come bilanciate una maggiore affinità con il mantenimento della specificità e l’evitare binding off-target?

Accepted Answer

La maturazione dell’affinità si basa su phage display con un protocollo di panning competitivo custom validato per trattenere selettivamente i binder migliorati contro la ricombinante umana. La specificità è controllata tramite screening parallelo delle librerie VH e VL, seguito da selezione combinatoria e validazione ELISA con controlli negativi per escludere legami aspecifici. Tutte le varianti sono confrontate con il phage dell’anticorpo iniziale per garantire un reale miglioramento di affinità specifica per il target.

Question 3

Valutate potenziali liabilities di sviluppabilità introdotte durante la mutagenesi?

Accepted Answer

Sì, è un’opzione che offriamo. Durante la maturazione dell’affinità, tutte le varianti sono attentamente monitorate per possibili liabilities di sviluppabilità, inclusi binding aspecifico o problemi di sequenza, garantendo che l’affinità migliorata non comprometta l’idoneità del candidato allo sviluppo successivo. Consulta i nostri servizi di assessment della sviluppabilità.

Question 4

Il workflow è adatto per anticorpi di qualsiasi specie o formato?

Accepted Answer

Sì. Il nostro workflow di maturazione dell’affinità su base phage display è applicabile a anticorpi di qualsiasi specie e in diversi formati, garantendo ampia compatibilità con progetti diversi.

Question 5

Potete scalare l’espressione e purificazione delle varianti selezionate per test downstream?

Accepted Answer

Sì. ProteoGenix offre servizi personalizzati di produzione di anticorpi ricombinanti e purificazione in scala da pochi milligrammi a diversi grammi tramite piattaforme mammifere ad alte prestazioni e workflow scalabili, assicurando materiale sufficiente per test funzionali e di caratterizzazione downstream.

Question 6

Offrite supporto per la successiva umanizzazione o assessment di sviluppabilità?

Accepted Answer

Sì. ProteoGenix offre servizio di umanizzazione anticorpale AI-driven per convertire anticorpi non umani in sequenze clinicamente rilevanti, così come servizi di assessment della sviluppabilità che includono analisi di stabilità, aggregazione e altre liability biofisiche a supporto dello sviluppo successivo.

Question 7

Garantite un incremento minimo di affinità?

Accepted Answer

Sì. ProteoGenix garantisce almeno una variante con affinità migliorata di 5 volte o più verso il target umano. Se ciò non viene raggiunto, sarà addebitata solo una parte del servizio.

Question 8

Quali piani di contingenza sono previsti se non si ottiene alcun miglioramento significativo dell’affinità?

Accepted Answer

Se non si ottiene un miglioramento significativo, ProteoGenix offre un rimborso parziale e salva tutti i binder eluìti da ogni round di panning, così il progetto potrà essere ripreso o potranno essere applicate strategie alternative.

Question 9

Fornite più varianti migliorate così da poter scegliere il miglior candidato?

Accepted Answer

Sì. ProteoGenix produce più varianti uniche dai round finali di panning, completamente sequenziate e validate, permettendoti di scegliere il miglior candidato per affinità e specificità.

Question 10

Quali sono i tempi previsti per una campagna completa di maturazione dell’affinità?

Accepted Answer

L’intero workflow di maturazione dell’affinità presso ProteoGenix richiede tipicamente 14–18 settimane dal kick-off alla conclusione.

Question 11

Cosa viene consegnato esattamente: solo le sequenze, oppure anche produzione ricombinante e dati biofisici?

Accepted Answer

ProteoGenix consegna le sequenze di tutte le varianti migliorate uniche assieme a un report finale con tutte le tappe sperimentali, i risultati, discussioni e conclusioni. Espressione ricombinante e dati biofisici aggiuntivi non sono inclusi di default ma possono essere forniti come servizi separati.

Question 12

Chi detiene la proprietà intellettuale delle varianti migliorate?

Accepted Answer

Tutte le sequenze e la proprietà intellettuale (IP) generata durante il progetto appartengono al cliente.

Maturazione dell’affinità anticorpale con phage display