Particolari del pacchetto

 
  • Progettazione dell'antigene (progettazione del frammento più appropriato da produrre)
  • Sintesi di 2 geni (ciascun gene ottimizzato per un sistema di espressione specifica) e 2 subclonings
  • Test di espressione in 2 sistemi, compresi tra E. coli, B. subtilis, P. pastoris, cellule di insetto e cellule di mammifero. Stabiliti da ProteoGenix.
  • Produzione dell'antigene nel sistema di espressione più appropriato a seconda del rendimento e delle esigenze di progetto.
  • Iniezioni in topi
  • Controllo della risposta immunitaria in ELISA
  • Selezione dei migliori 2 topi per 2 fusioni in modo da avere un gran numero e varietà di cloni
  • Screening del prodotto di fusione in ELISA: circa 10 x 96 pozzetti
  • Subcloning di 10 cloni parentali (2-3 giri di diluizioni limitanti) in ELISA
  • Produzione e purificazione di 2mg da 10 cloni
  • Coniugazione di tutti i 10 cloni alla Biotina, HRP o AP
  • Test di tutte le 90 possibilità sandwich
  • Livello 1: Se non riusciamo a produrre una coppia di anticorpi che opera in ELISA contro l'immunògeno addebitiamo 2.500 Euro
  • Livello 2: Se riusciamo a produrre un paio di anticorpi che operano in ELISA contro l'immunògeno addebitiamo solo una piccola parte del costo
  • Livello 3: Se, dopo aver testato l'anticorpo purificato, il cliente vuole ricevere l'ibridoma, verrà addebitato l'intero prezzo del pacchetto
  • 10 -30 dei migliori cloni allo stadio parentale per la selezione da parte del cliente
  • 100 µg di ogni anticorpo purificato dalla coppia migliore per confermare l'acquisto dell'ibridoma
  • 50 µg di proteina purificata
  Dopo il pagamento totale:
  • Anticorpi rimanenti purificati e coniugati
  • 10 linee cellulari di ibridomi (4 flaconi congelati)
  • 150 µg di proteina purificata
  • Gene in pUC57
  • Sintesi del gene: 3-4 settimane
  • Produzione di proteine: 7-9 settimane
  • Iniezioni: 8-12 settimane
  • Screening della fusione: 5-6 settimane
  • Subcloning: 12-18 settimane
  • Produzione di anticorpi: 3-4 settimane
  • Coniugazione e test: 2 settimane
  • Totale: 40-55 settimane