Informations sur le package

 
  • Design de l’antigène (conception du fragment le plus approprié à produire)
  • 2 synthèses de gènes (chaque gène étant optimisé pour un système d'expression spécifique) et 2 sous-clonages
  • Tests d’expression dans 2 systèmes parmi E. coli, B. subtilis, P. pastoris, cellules d’insectes et cellules de mammifères. Choix des systèmes réalisé par ProteoGenix. La version taguée GFP est également produite en parallèle pour contrôler la spécificité en cytométrie en flux.
  • Production de l’antigène dans le système d’expression le plus approprié, en fonction du rendement et des besoins spécifiques du projet.
  • Immunisations de 5 souris
  • Contrôle de la réponse immunitaire en Cytométrie en Flux (FC) sur cellules transfectées avec la protéine fusionnée à la GFP obtenues à l’étape des tests d’expression.
  • Sélection des 2 meilleures souris pour réaliser 2 fusions afin d’obtenir un grand nombre et une grande diversité de clones.
  • Criblage du produit de fusion en ELISA : environ 10 plaques 96 puits.
  • Les clones positifs en ELISA sont ensuite testés en Cytométrie en Flux (FC) sur cellules transfectées, avec un MoFlo équipé de tri cellulaire pour sélectionner les meilleures cellules productrices d’anticorps
  • Contrôle de spécificité via la GFP
  • Sous-clonage de 2 clones parentaux (2-3 séries de dilutions limites)
  • Production et purification de 2mg d’anticorps à partir du meilleur clone
  • Niveau 1 : Si nous ne parvenons pas à produire un anticorps qui détecte l’immunogène en FC, nous ne facturons que 1000 Euros.
  • Niveau 2 : Si nous réussissons à produire un anticorps qui fonctionne en FC contre l’immunogène, nous facturons seulement une partie du prix du projet.
  • Niveau 3 : Si le client souhaite recevoir l’hybridome après avoir testé l’anticorps purifié, le coût total du projet est dû.
  • Echantillons de surnageants de culture des 10 -20 meilleurs clones parentaux pour le choix du client
  • 100 µg d’anticorps purifié pour confirmer l’achat de l’hybridome
  • 50 µg de protéine purifiée
  Après paiement du solde total:  
  • 1.9 mg d’anticorps purifié
  • 1 lignée cellulaire d'hybridome (4 vials congelées)
  • 150 µg de protéine purifiée
  • Le gène en pUC57
  • Synthèse de gènes: 3-4 semaines
  • Production de protéine: 7-9 semaines
  • Immunisations: 8-12 semaines
  • Fusion et criblage: 5-6 semaines
  • Sous-clonages: 8-12 semaines
  • Production d’anticorps: 3-4 semaines
  • Total: 36-50 semaines