Avec plus de 14 ans d'expérience dans l'industrie du développement d'anticorps, ProteoGenix fournit un service efficace de l'humanisation des anticorps en s'appuyant sur une technique améliorée de « CDR grafting ». Nous nous engageons à collaborer avec nos clients pour les aider à répondre à leurs besoins spécifiques ; notre expertise assure le succès de chaque projet.

Une alternative existe qui est d’utiliser notre plate-forme de phage display pour cribler des anticorps de banques humaines afin d'éviter l’humanisation des anticorps.

 

checkÉtape fondamentale dans l'avancée du développement et de la découverte de médicaments

checkAmélioration des propriétés biophysiques des anticorps monoclonaux tout en gardant leur affinité et leur spécificité

checkAméliorer l'affinité et les rendements de production de l'anticorps

 

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Processus du service d'humanisation d'anticorps monoclonaux

 

Les informations sur les séquences de régions variables sont générées par transcription inverse de l'extraction totale d'ARN obtenue à partir de la lignée cellulaire d'hybridome fournie par le client.

Les régions variables des chaînes lourdes (VH) et des chaînes légères (VL) sont amplifiées par PCR et clonées dans un vecteur pour le séquençage. Au total, 5 clones indépendants sont séquencés pour chaque chaîne variable. Les séquences de l'hybridome sont déterminées à partir des résultats de séquençage de VH et VL.
Une construction chimère est conçue et exprimée par l’association de régions variables (VH et VL) de souris avec des régions constantes d'IgG1 humaines afin de confirmer la liaison et la fonction biologique liées à l'hybridome parentale de souris.

Les séquences d'anticorps sont humanisées en greffant les trois CDRs de la chaine légère de la région variable (VL) en lignes germinales VL humaines qui sont les plus homologues possibles à l'anticorps VL de souris.

De même, les trois CDRs de la région variable de la chaîne lourde (VH) sont greffés dans des lignées germinales VH humaines qui sont aussi homologues que possible à l'anticorps VH de souris. En outre, en raison de cadre différent cela peut apporter une valeur ajoutée à l'anticorps résultant, les CDRs sont greffés dans des lignées génétiques VH et VL qui sont connues pour présenter de bonnes propriétés biophysiques globales même si elles sont moins homologues.

Structure de l'anticorps humain et représentation des distinctions entre chaque type d'anticorps: souris, chimère, humain et humanisé

Structure de l'anticorps humain et représentation des distinctions entre chaque type d'anticorps: souris, chimère, humain et humanisé.

 

Basé sur les informations de la structure des régions variables des immunoglobulines, des mutations sont effectuées dans les régions pour lesquelles peu de résidus des régions variables de souris sont identifiés comme ayant des rôles clés dans le maintien des CDRs dans la bonne conformation ou dans l’ensemble VH / VL.
Par la suite, certains de ces résidus de souris peuvent être mutés au résidu de la lignée germinale humaine afin de tester son impact réel sur la liaison de l'antigène ou les propriétés biophysiques de la molécule.

⇒ Un total de 9-18 combinaisons VH / VL sont générées entre la VH greffée par CDR, la VL greffée par CDR et les versions chimères de VH et VL.

Pour plus d’informations ou pour obtenir un devis pour les services d’anticorps monoclonaux humanisés ou phage display incluant l’utilisation des banques naïves humaines, n’hésitez pas à nous contacter.

Service d'humanisation d'anticorps monoclonaux pour répondre à vos attentes

 

Des preuves de la notion de quantité de chaque anticorps recombinant humanisé sont produites et évaluées pour la liaison / l’activité biologique / les propriétés biophysiques comparé à la version chimérique de l'hybridome parentale de souris.

Après un test accompli avec succès, un seul candidat est sélectionné pour une humanisation et / ou une optimisation de séquence de CDRs si nécessaire.

Notez que pour des fins thérapeutiques ou commerciales, un QC supplémentaire peut être effectué tel que l'analyse par HPLC des agrégats d'anticorps et l'analyse DSC (analyse de la thermostabilité par calorimétrie à balayage différentiel).

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