Faites confiance à des professionnels expérimentés pour séquencer votre anticorps. La détermination de la séquence de votre anticorps monoclonal est une étape essentielle pour :
- Protéger la séquence de votre anticorps par un brevet,
- Optimiser l’activité de votre anticorps par ingénierie,
- Eviter la perte de la lignée d’hybridome pour la production d’anticorps recombinants.
Pourquoi choisir ProteoGenix pour le séquençage de vos anticorps ?
Prix ultra-compétitif
Nos tarifs sont parmi les plus compétitifs du marché.
Pas de séquence - pas de frais
Nous ne réussissons pas à déterminer la séquence ? Vous n’avez rien à payer !
Résultat rapide
Profitez d’un service rapide grâce à notre processus standardisé.
Expert en développement d’anticorps monoclonaux
Augmentez votre taux de réussite en utilisant nos services d’ingénierie et de production.
Processus sur-mesure
Obtenez un service de séquençage d’anticorps parfaitement adapté à vos besoins.
Une solution tout-en-un
De la découverte de l’anticorps au candidat clinique.
Notre processus de séquençage d’anticorps :
une solution tout-en-un de votre lignée d’hybridome
à la séquence de votre anticorps
Transcription inverse
Amplification PCR
ProteoGenix vous propose un service de séquençage d’anticorps entièrement à la carte avec de solides garanties. Après 16 années d’expérience, nos services sont complets et standardisés et comprennent les éléments suivants pour des performances optimales :
- Longueur de la séquence : domaines variables de l’anticorps (VH, VL), anticorps complet (VH, VL, Fc)
- En option :
- Synthèse de gènes avec optimisation des codons pour le système d’expression choisi : levure, insecte, mammifère
- Production d’anticorps monoclonal
- Le test de l’interaction avec l’antigène soluble ou cellulaire (ELISA, FACS, détermination du KD par Biacore / SPRi / Octet…)
- Livrables :
- Un rapport complet comprenant la séquence avec les CDR annotés
- Un plasmide contenant la séquence (en option)
- Jusqu’à 2 mg d’anticorps recombinant (en option)
Étude de cas : séquençage de l’ADN des régions variables
d’un anticorps d’une lignée d’hybridome
OBJECTIF DE L’ÉTUDE
Détermination de la séquence de l’anticorps d’une lignée d’hybridome développée par nos soins pour un client
MATÉRIELS
- PacBio RS II
- Cellules d’hybridome fournies par ProteoGenix
- Kit d’extraction d’ARN TaKaRa MiniBEST Universal
- Kit de réactifs de RT PrimeScript avec gDNA Eraser
- Kit de clonage TA
PROTOCOLE DE SÉQUENÇAGE À PARTIR DE L’HYBRIDOME
Les ARN totaux ont été extraits des cellules d’hybridome puis utilisés pour la synthèse des ADNc. Les gènes codant pour les régions variables de l’anticorps ont été amplifiés par PCR à l’aide d’amorces spécifiques des différents isotypes, et les fragments ainsi obtenus ont été sous-clonés séparément dans un vecteur de clonage standard puis séquencés.
DÉTERMINATION DES ISOTYPES ET ANALYSE DE LA SÉQUENCE DE L’ANTICORPS
La détermination des isotypes de l’anticorps est réalisée par électrophorèse en gel. Le protocole détaillé se trouve dans le rapport complet disponible au format PDF.
Les résultats du séquençage sont basés sur l’analyse d’au moins 10 clones positifs et comprennent :
- La séquence des gènes
- La séquence d’acides aminés avec les CDR annotés
Une fois le séquençage de l’anticorps terminé, le client nous a demandé de concevoir une version chimérique de l’anticorps. Après synthèse des ADNc de l’anticorps recombinant de souris et de l’anticorps chimérique et leur sous-clonage dans un vecteur d’expression, ces deux anticorps ont été produits dans des cellules XtenCHO. Leur affinité de liaison ainsi que celle de l’anticorps de l’hybridome a ensuite été déterminée (K ) afin de confirmer que l’anticorps recombinant chimérique est au moins fonctionnellement équivalent à l’anticorps recombinant de souris et à l’anticorps d’hybridome de souris.
Après confirmation, nous avons été en mesure de développer des anticorps humanisés ainsi que des anticorps bispécifiques à usage thérapeutiques chez l’homme.
Pourquoi devez-vous déterminer la séquence de votre anticorps ?
- Dépôt de brevet
Le développement d’un anticorps monoclonal peut représenter des années de recherche. La démonstration de l’unicité de votre séquence constitue la première étape pour pouvoir la breveter et protéger vos investissements passés et futurs.
- Ingénierie de l’anticorps
Le séquençage de l’anticorps fournit des données essentielles pour la conception de modifications de l’anticorps telles que son humanisation, sa maturation d’affinité ou son reformatage pour générer des anticorps bispécifiques ou des conjugués anticorps-médicament
- Production d’anticorps recombinants
Le développement d’anticorps thérapeutiques requiert une lignée cellulaire stable capable de produire de grandes quantités d’anticorps stables sans contaminant. L’obtention de la séquence de votre anticorps vous permet de bénéficier des avantages de la production d’anticorps recombinants : grande reproductibilité, facilité d’adaptation du procédé à la production à grande échelle et production sans utilisation d’animaux.
- Sécurité
Il y a toujours un risque de perte des lignées d’hybridome à cause d’une délétion ou d’une mutation du gène de l’anticorps ou d’une contamination des cultures. La séquence de l’anticorps de votre lignée d’hybridome constitue la garantie que vous pourrez continuer la production de votre anticorps recombinant, même en cas de perte de votre lignée d’hybridome.
Comment exploiter la séquence
de votre anticorps ?
Avec plus de 15 années d’expérience dans le développement et la production d’anticorps, ProteoGenix peut vous offrir bien plus que la simple détermination de la séquence de l’anticorps de votre hybridome. L’utilisation de notre service de séquençage d’anticorps peut en effet constituer le point de départ d’une longue et fructueuse collaboration qui permettra d’accroître considérablement vos chances d’atteindre les phases cliniques. ProteoGenix vous propose des solutions tout-en-un conçues spécialement pour faire franchir un cap à votre projet :
DÉVELOPPEMENT D'ANTICORPS THÉRAPEUTIQUES
ProteoGenix propose des solutions pour optimiser les propriétés de vos anticorps thérapeutiques, tels que l’humanisation des anticorps, la maturation d’affinité, le développement d’anticorps bispécifiques, de conjugués anticorps-médicament…
PRODUCTION
D’ANTICORPS MONOCLONAUX
ProteoGenix met à votre service l’une des plates-formes de production d’anticorps recombinants les plus performantes au monde fondée sur 16 années d’expérience et des technologies propriétaires telles que XtenCHOTM.
