Produzione di anticorpi monoclonali

Mod. produzione anticorpi

    ProteoGenix ha sviluppato XtenCHO,il più produttivo sistema di espressione transitoria di anticorpi monoclonali, con prestazioni addirittura superiori a quelle di ExpiCHO! Grazie ad anni di ricerca, la nostra linea cellulare proprietaria XtenCHO permette di ottenere una produzione di anticorpi ricombinanti di oltre 1 g/l, ai prezzi più competitivi sul mercato!

    Perché scegliere ProteoGenix per la produzione di anticorpi monoclonali?

    XtenCHOTM > ExpiCHO

    Il nostro sistema di espressione proprietario supera addirittura la produttività di ExpiCHO!

    Il prezzo più competitivo

      730 € per 1 mg di anticorpo purificati* grazie alle prestazioni incredibili dis  XtenCHOTM

    Quantità garantita

    Vi garantiamo la quantità ordinata seguendo linee guida sui prezzi prestabilite.

    Varietà del sistema di espressione

    Potete produrre i vostri anticorpi in sistemi di espressione HEK o CHO.

    Esperti in ingegneria degli anticorpi

    Umanizzazione, maturazione dell’affinità, sviluppo di anticorpi bispecifici, ecc. Possiamo produrre varianti di anticorpi che porteranno lontano il vostro progetto!

    Tempi rapidi

    Dalla vostra sequenza genetica all’anticorpo in 3-4 settimane.

    Contenuto del nostro servizio di
    produzione di anticorpi ricombinanti

    Fase Contenuto Termine Prodotti da consegnare
    Sequenziamento di anticorpi monoclonali
    • Linea cellulare di ibridoma fornita dal cliente
    • Estrazione e purificazione dell’RNA
    • Trascrizione inversa
    • Amplificazione del cDNA
    • Analisi del sequenziamento
    Da 2 a 3 settimane per regione variabile e sequenza leader
    Da 3 a 4 settimane per l’anticorpo completo
    • Report dettagliato
    • Sequenziamento di anticorpi
    Sintesi e clonaggio di geni
    • Sintesi di geni
    • Ottimizzazione dei codoni per sistemi di espressione in cellule di mammifero
    • Subclonaggio in un vettore di espressione
    Da 2 a 3 settimane
    • Geni sintetici clonati nel plasmide pUC57
    • Certificato di analisi (CoA
    Produzione di anticorpi monoclonali
    + purificazione
    • Amplificazione e preparazione del plasmide
    • Cotransfezione delle cellule target
    • Espressione transitoria e purificazione
    • Analisi QC (SDS-PAGE / UV280)
    A partire da 3-4 settimane
    • Report dettagliato
    • Anticorpo purificato
    • Se la produzione è > 5mg: campione di anticorpo purificato per test
    Opzioni disponibili (elenco non esaustivo):

    • Ulteriori fasi di purificazione (IEX, SEC, ecc.)
    • Test e rimozione di endotossine
    • Analisi aggregate: SEC-HPLC
    • Determinazione di KD: SPR (Biacore), SPRi (XelPlex), Octet Red96
    • Analisi di stabilità: calorimetria differenziale a scansione, IR

    XtenCHOTM: il sistema di espressione di riferimento per la produzione di anticorpi monoclonali

    ProteoGenix possiede un sistema di espressione transitoria ad elevate prestazioni unico, che garantisce  rendimenti della produzione di anticorpi superiori a 1g/l. Grazie al nostro protocollo in-house per la transfezione Xten e la nostra linea cellulare proprietaria XtenCHO,il nostro sistema di espressione in cellule di mammifero supera addirittura le prestazioni di ExpiCHO, il sistema di espressione transitoria più produttivo sul mercato.

    Il nostro sistema di espressione Xten soddisfa tutte le vostre necessità di produzione di anticorpi ricombinanti e riduce sensibilmente i costi di produzione.

    Di seguito, alcuni esempi degli incredibili risultati ottenuti per l’espressione transitoria di pembrolizumab e di un IgG umano.

    Confronto del rendimento dell’espressione di un IgG umano in tre diversi sistemi di espressione

    compreso XtenCHO utilizzando il protocollo Xten.

    Confronto del rendimento dell’espressione di pembrolizumab in tre diversi sistemi di espressione

    compreso XtenCHO utilizzando il protocollo Xten.

    Caso di studio: produzione dell’anticorpo ricombinante pembrolizumab

    Obiettivo dello studio

    Desideriamo illustrarvi il procedimento per la produzione dell’anticorpo ricombinante pembrolizumab utilizzando il nostro sistema di espressione proprietario Xten.

    Geni e vettori di espressione

    I geni codificanti per la catena pesante (HC) e la catena leggera (LC) dell’anticorpo terapeutico pembrolizumab sono stati sintetizzati chimicamente con ottimizzazione per l’espressione in cellule CHO. I geni sono stati clonati nel vettore di espressione con cellule di mammifero pTXs1, proprietario di ProteoGenix. La mappa del vettore è compresa nel report in PDF.

    Produzione di anticorpi monoclonali in bassa scala e test di purificazione

    È stata effettuata la preparazione del DNA plasmidico con rimozione delle endotossine per l’espressione di pTXs1. Utilizzando il protocollo di transfezione proprietario Xten, è stata eseguita la transfezione transitoria dei plasmidi nelle cellule proprietarie XtenCHO.Il mezzo di coltura è stato raccolto ed è stato determinato il rendimento della produzione mediante analisi Octet Red. L’anticorpo ricombinante è stato poi purificato per affinità verso la proteina G.

    QC di pembrolizumab purificato. Colorazione con Blu di Coomassie.

    A. SDS-PAGE non ridotto.  B. SDS-PAGE ridotto.

    Risultati dell’espressione dell’anticorpo pembrolizumab

    Anticorpi Rendimento Purezza
    Pembrolizumab 235 mg/L >95%

    Quali sono i benefici della
    produzione di anticorpi monoclonali?

    La produzione di anticorpi monoclonali mediante la tecnologia dell’espressione ricombinante ha rappresentato una scoperta fondamentale in questo ambito dello sviluppo di anticorpi terapeutici, poiché assicura svariati vantaggi rispetto al metodo di produzione “tradizionale” di anticorpi da ibridomi.

     

    Riproducibilità, controllo e sicurezza

    La produzione di anticorpi monoclonali per applicazioni terapeutiche richiede controllo e riproducibilità elevati. Poiché parametri chiave come a sequenza del DNA e delle proteine vengono definiti chimicamente , la produzione di anticorpi ricombinanti permette di creare un processo standardizzato per la produzione di anticorpi monoclonali con pochissime variazioni lotto-lotto. Visto che la produzione di anticorpi ricombinanti parte da un anticorpo o da una sequenza di DNA noti, si evitano anche le mutazioni o le deviazioni rispetto alla linea cellulare che possono verificarsi nelle linee cellulari di ibridomi.

     

    Purezza elevata

    La produzione di anticorpi ricombinanti genera un grado di purezza elevato a causa dell’assenza di contaminanti sierici.

     

    Ingegnerizzazione e modifica del formato

    La produzione di anticorpi monoclonali ricombinanti permette di accedere al controllo della struttura dell’anticorpo al livello genetico. Questo è particolarmente importante per lo sviluppo di anticorpi terapeutici perché permette di modulare le proprietà farmacologiche  di un anticorpo.

    La possibilità di modificare il gene che verrà ulteriormente espresso da un dato sistema di espressione permette di accedere a una gamma infinita di soluzioni in termini di:

     

    Senza l’utilizzo di animali

    Al giorno d’oggi, sempre più attenzione viene posta sull’etica e sul benessere animale. Grazie alla tecnologia della produzione ricombinante, il processo di produzione degli anticorpi avviene senza l’utilizzo di animali.

    Espressione transitoria o stabile? Quale servizio di produzione di
    anticorpi monoclonali scegliere?

    La scelta della soluzione più appropriata per la produzione di anticorpi monoclonali può avere un impatto importante sul vostro progetto, ad esempio in termini di tempo. Per questa ragione, mettiamo a vostra disposizione questa breve sezione che spiega come decidere tra l’espressione transitoria o stabile degli anticorpi.

    La produzione di anticorpi monoclonali offre un vantaggio principale: permette la produzione rapida di una quantità di anticorpi relativamente grande. Tuttavia, nella transfezione transitoria, il gene transfettato non integra il genoma ospite e può perdersi in alcuni giorni (in un periodo di tempo limitato, alcuni giorni). Perciò, questa può essere la soluzione perfetta per applicazioni a breve termine come la produzione di proteine su bassa scala.

    La generazione di una linea cellulare stabile è correlata all’integrazione di un gene sintetico nel genoma ospite del sistema di espressione. Poiché può essere un processo lungo e complicato (> 3 mesi), le linee cellulari stabili vengono privilegiate per applicazioni a lungo termine come la produzione di anticorpi terapeutici. Per la produzione su larga scala, la linea cellulare stabile permette di costruire un processo standardizzato che garantisce un rendimento e un controllo della qualità maggiori.

    Per ulteriori domande, potete contattare i nostri account manager con dottorato di ricerca, che saranno lieti di indirizzarvi verso la soluzione più adatta per la produzione di anticorpi.

    *almeno 4 anticorpi