Servicios de producción de proteínas recombinantes

Solicitud producción de proteínas

    Expertos en producción de proteínas
    MÁS DE 1500 PROTEÍNAS5 SISTEMAS
    Expertos en producción de proteínas
    MÁS DE 1500 PROTEÍNAS
    5 SISTEMAS

    Con más de 15 años de dilatada experiencia en la producción de proteínas personalizada y más de 1500 proteínas producidas con éxito en 5 sistemas, ProteoGenix es líder en la producción de proteínas y anticuerpos recombinantes difíciles de expresarLEER MÁS

     

    Recombinant protein synthesis services
    Difficult-to-express protein production experts

    Ofrecemos servicios de expresión y purificación de proteínas de pequeña a gran escala en cada una de nuestras 5 plataformas a precios competitivos, así como paquetes personalizados y más avanzados en los que ensayamos, por ejemplo, las condiciones de expresión de proteínas recombinantes en diversos sistemas, tanto en paralelo como con condiciones de expresión de proteínas más amplias en un determinado sistema. Nuestros servicios incluyen todas las etapas, desde la síntesis de genes, y la construcción de vectores de expresión hasta la producción piloto de proteínas en matraces y la expresión de proteínas a gran escala en fermentadores y biorreactores.

    Nuestro cribado de las condiciones de expresión de proteínas «high throughput» está diseñado para superar los posibles retos en materia de solubilidad, pureza, funcionalidad, productividad, replegamiento o formulación. Este compromiso implica tener acceso a, y dominar, todas las tecnologías, procesos y herramientas existentes. Con una dilatada experiencia en la expresión de proteínas recombinantes de todo tipo como, por ejemplo, anticuerpos, enzimas, proteínas de membrana, citocinas, etc., y de cualquier especie, ProteoGenix ha desarrollado un conjunto integral de solucionespara abordar todos estos desafíos y proporcionar unos servicios de ingeniería de proteínas inmejorables. Pruebe los paquetes garantizados de la empresa con mayor fiabilidad en el campo de la producción de proteínas del mercado.

    E. coli

    Discover our E.coli protein production service

    EXPRESIÓN DE PROTEINAS
    EN E. COLI

    Expresión periplásmica, ensayos de replegamiento, paquetes
    garantizados, eliminación de endotoxina, expresión en E. Coli personalizada,
    producción de proteínas en bacterias.

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    Múltiples sistemas

    Learn more about our multi-system protein production service

    PAQUETES DE EXPRESIÓN
    EN MÚLTIPLES SISTEMAS

    En caso de desconocimiento del sistema óptimo, realizaremos ensayos en hasta
    5 sistemas y entregaremos la proteína purificada para
    cada sistema

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    B. subtilis

    Discover our B. subtilis protein synthesis service

    PRODUCCIÓN DE PROTEINAS
    EN B. SUBTILIS

    Nivel de endotoxina bajo,
    secreción de proteínas recombinantes,
    caracterización de proteínas.

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    Levadura

    Discover our Yeast protein production service

    PRODUCCIÓN DE PROTEINAS EN LEVADURAS

    Saccharomyces cerevisia,
    Picchia pastoris,
    expresión estable.

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    HTP

    Discover our High Throughput protein expression screening service

    CRIBADO DE EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS «HIGH THROUGHPUT»

    Para proteínas difíciles de expresar, más de 1000
    condiciones de expresión, a pequeña escala,
    cribado «high throughput».

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    Células de insecto

    Discover our High Throughput protein expression screening service

    PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS CÉLULAS DE INSECTO/BACULOVIRUS

    Sf9, Sf21, Hi5, proteínas glicosiladas,
    purificación de proteínas, producción de
    producción

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    Mamiferos

    Discover our Mammalian cells protein production service

    PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS
    EN CÉLULAS DE MAMÍFERO

    Expresión transitoria, producción de anticuerpos
    recombinantes, purificaciones mediante SEC e IEX,
    bajos niveles de endotoxina, CHO, HEK293, BHK.

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    Líneas estables

    Learn more about our stable cell line

    DESARROLLO DE
    LÍNEAS CELULARES ESTABLES

    Sistemas exentos de derechos de la propiedad, rendimiento garantizado, desarrollo de
    procesos, líneas celulares HEK293 y CHO
    estables.

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    RAB

    Learn more about protein production in bioreactor and fermenter

    PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS
    MONOCLONALES y RECOMBINANTES

    Coste de producción bajo,
    rendimiento garantizado,
    variantes de anticuerpos HTP.

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    A gran escala

    Learn more about protein production in bioreactor and fermenter

    PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS A GRAN ESCALA EN FERMENTADORES/BIORREACTORES

    De 1 a 4000 L en cada uno de los 5 sistemas,
    servicios de purificación a gran escala,
    servicios de desarrollo de procesos

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    Testimonio sobre producción de proteínas a medida

    «Recientemente, elegí ProteoGenix para la producción de una proteína recombinante en células HEK293. La alta productividad y la fuerte actividad de la proteína obtenida, probablemente debido a su adecuada glicosilación y plegamiento, nos permitió generar unos resultados interesantes en los ensayos funcionales y superar los objetivos intermedios de nuestro proyecto de investigación. La calidad del servicio proporcionado, así como la facilidad de comunicación y la amabilidad del gestor de cuentas a cargo de nuestro proyecto, resultaron decisivas para el éxito. Me enorgullece recomendar ProteoGenix para la producción de proteínas recombinantes.»

    production_portrait01

    Dr. Christian BRONNER,
    doctorado y responsable científico
    en el Centro Nacional de Investigación Científica (CNRS)

    ¿Por qué elegir ProteoGenix para la producción de su proteína recombinante?

    Process development experience
    Más de 16 años de trayectoria destacada en la producción de proteínas difíciles de expresar
    5 protein expression systems
    5 sistemas de expresión de proteínas disponibles y todas las herramientas para superar cualquier desafío en materia de expresión de proteínas.
    One stop solution from gene to protein
    Solución integral, desde el gen hasta la proteína, desarrollo de procesos y producción a gran escala. Consecuencias: servicio más rápido, mayor tasa de éxito, menos trabajo administrativo.
    IP Free strains and cell lines
    Cepas y líneas celulares exentas de derechos de la propiedad intelectual.
    transient protein expression service
    Producción desde muy pequeña escala hasta gran escala con 1 to 4000 L batch
    Transient expression and stable cell line
    Productividad de hasta 800 mg/L en expresión transitoria y 5 g/L en expresión estable.

    ¿Por qué elegir ProteoGenix ?

     Más de 16 años de trayectoria destacada en la <strongproducción de proteínas difíciles de expresar

    5 sistemas de expresión de proteínas disponibles y todas las herramientas para superar cualquier desafío en materia de expresión de proteínas.

    Solución integral, desde el gen hasta la proteína, desarrollo de procesos y producción a gran escala. Consecuencias: servicio más rápido, mayor tasa de éxito, menos trabajo administrativo.

    Cepas y líneas celulares exentas de derechos de la propiedad intelectual.

    Producción desde muy pequeña escala hasta gran escala con 1 to 4000 L batch

    Productividad de hasta 800 mg/L en expresión transitoria y 5 g/L en expresión estable.

    Equipos de fermentación

    fermentation-lab
    proteogenix-bioreactors

    Estudio de caso:

    ejemplo de producción de una beta-glucosidasa en células de insecto

    SERVICIO OFRECIDO

    Un cliente nos solicitó la producción de una proteína beta-glucosidasa recombinante usando un sistema de expresión de baculovirus (producción en células de insecto). Nuestro cliente solicitó un paquete de células de insecto completo, que incluía ensayos de expresión y purificación a pequeña escala y posterior producción y purificación piloto de 1 L. Conseguimos un rendimiento de 370 mg/L y, tras la expresión a pequeña escala, le entregamos 60 mg. La producción piloto de 1 L resultó no ser útil, por lo que no emitimos cargo alguno por ella a nuestro cliente. El servicio ofrecido incluyó:

    BIOLOGÍA MOLECULAR

    El ADNc que codifica para la proteína beta-glucosidasa se sintetizó químicamente tras la optimización de secuencias para la expresión en células de insecto. A continuación, se subclonó en un vector de expresión de nuestra propiedad. Para su purificación posterior, se añadió una secuencia que codificaba para una cola de polihistidina (6His tag).

    ENSAYOS DE EXPRESIÓN

    GENERACIÓN DE SOLUCIÓN MADRE DE VIRUS P1

    Figura 1: análisis de la expresión en células de insecto durante la generación de P1.
    Izquierda Tinción con azul de Coomassie. Derecha. WB con anticuerpo anti-His (sustrato ECL) «-». Cultivo de control
    sin transfectar. 1 y 2 son transfecciones con 2 clones de bácmido diferentes.

    Conclusión sobre la etapa de generación de virus P1

    Mediante SDS-PAGE, se observó una banda de proteína compatible con el peso molecular de la proteína beta-glucosidasa en los extractos de proteína nativa. Este resultado se confirmó mediante Western Blot (Figura 1, flechas verdes). El clon de bácmido recombinante n.º 1 se utilizó para los ensayos de expresión.

    ENSAYOS DE AMPLIFICACIÓN Y EXPRESIÓN DEL VIRUS

    Figura 2. Ensayos de expresión de la proteína con solución madre P2.
    Tinción con azul de Coomassie. Izquierda Tipo de célula 1.Derecha. Tipo de célula 2 «-». Cultivo de control negativo

    Conclusión de los ensayos de expresión

    Los ensayos de expresión con P2 confirman que la proteína deseada está presente en los extractos de proteína nativa a una concentración alta (Figura 2, flechas verdes). Condiciones óptimas para la expresión de la proteína nativa: Figura 2, flecha roja = límite de identificación (LOI)

    ENSAYOS DE PURIFICACIÓN

    Figura 3: ensayo de purificación de la proteína a pequeña escala. Tinción con azul de Coomassie.
    Izquierda Perfil de purificación. Derecha. Control de calidad final del pool de purificación
    IN. Entrada. FT. Volumen de elución. W1-W3. Etapas de lavado. E1-E9. Fracciones eluidas.

    Conclusión de los ensayos de purificación a pequeña escala

    La proteína beta-glucosidasa recombinante se puede producir y purificar en condiciones nativas. La proteína tiene una pureza ≥ 95 % y el rendimiento de producción/purificación es de aproximadamente 370 mg/L. El sistema de expresión de baculovirus resultó ser una elección perfecta para esta proteína.

    ¿Qué sistema elegir para la producción de su proteína recombinante?

    COMPARATIVA ENTRE LOS 5 SISTEMAS DE EXPRESIÓN OFRECIDOS POR PROTEOGENIX -
    SISTEMA DE EXPRESIÓN EN CÉLULAS PROCARIOTAS FRENTE A EUCARIOTAS.

    La tabla siguiente da una idea de las ventajas de cada uno de los cinco sistemas heterólogos de expresión de proteínas diferentes para la producción de proteínas recombinantes desde un punto de vista general. Obviamente, las características pueden variar de una proteína a otra. Cuantas más estrellas hay, mejor es el sistema.

    Sistema
    de expresión
    Tiempo Coste Modificación postraduccional (PTM) Niveles de endotoxina bajos Sencillez de escalado del proceso Secreción
    E. coli **** **** * * *** *
    B. subtilis *** *** * **** *** **
    Levaduras (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    * *** ** **** ** **
    Baculovirus/células de insecto
    Células de insecto
    * ** *** **** * ***
    Células de mamífero *** * **** **** ** ****

     

    La tabla siguiente da una idea de las ventajas de cada uno de los cinco sistemas heterólogos de expresión de proteínas diferentes para la producción de proteínas recombinantes desde un punto de vista general. Obviamente, las características pueden variar de una proteína a otra. Cuantas más estrellas hay, mejor es el sistema.

    Sistema
    de expresión
    Tiempo Coste Modificación postraduccional (PTM) Niveles de endotoxina bajos Sencillez de escalado del proceso Secreción
    E. coli **** **** * * *** *
    B. subtilis *** *** * **** *** **
    Levaduras (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    * *** ** **** ** **
    Baculovirus/células de insecto
    Células de insecto
    * ** *** **** * ***
    Células de mamífero *** * **** **** ** ****
    Sistema de expresión Plazo Precio
    E. coli 3-6 semanas Precios a partir de
    1 650€
    B. subtilis 4-6 semanas
    Levaduras (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    6-7 semanas
    Baculovirus/células de insecto
    Células de insecto
    8-11 semanas
    Células de mamífero 7-9 semanas

    PLAZO Y PRECIO

    Sistema de expresión Plazo Precio
    E. coli 3-6 semanas Precios a partir de
    1 650€
    B. subtilis 4-6 semanas
    Levaduras (P. pastoris,
    S. cerevisiae)
    6-7 semanas
    Baculovirus/células de insecto
    Células de insecto
    8-11 semanas
    Células de mamífero 7-9 semanas

     

    Contenido del servicio
    Evaluación de la expresión y purificación a pequeña escala con ensayo de múltiples condiciones de expresión.
    Producción y purificación de 1 L.

    PAQUETES DE MÚLTIPLES SISTEMAS DE EXPRESIÓN NO EXHAUSTIVOS

    Código del paquete Tipo Sistemas Precio
    ATX-PTR4S01 4 sistemas
    Paquete de expresión
    E. coli/levaduras/baculovirus/
    Células de mamífero
    Precios a partir de
    2 450€
    ATX-PTR3S05 3 sistemas
    Paquete de expresión
    B. subtilis/levaduras/baculovirus
    ATX-PTR2S02 2 sistemas
    Paquete de expresión
    E. coli/baculovirus

     

      El sistema de purificación de proteína recombinante utilizado más habitualmente es E. coli. De hecho, es el sistema más sencillo, rápido y rentable para la expresión personalizada de una proteína. Los cultivos bacterianos crecen mucho más rápido que los de células de insecto, células de mamífero o levaduras. Por lo tanto, es más sencillo y más rápido ensayar en ellos un gran número de condiciones diferentes. También se dispone de más soluciones a la hora de ensayar y, por tanto, se puede conseguir una tasa de éxito más alta en la expresión de proteínas recombinantes. Los rendimientos de la expresión transitoria de proteínas recombinantes también son generalmente mucho más altos que en levaduras, baculovirus/células de insecto o células de mamífero. Con frecuencia, la producción de proteínas recombinantes en E. coli (Escherichia Coli) es la solución propuesta por ProteoGenix cuando la aplicación final requiere cantidades de proteína grandes, por ejemplo, cristalografía y resonancia magnética nuclear (NMR), y no se necesitan modificaciones postraduccionales (PTM). Sin embargo, las principales desventajas del sistema de expresión E. Coli son las grandes cantidades de endotoxina que quedan en la muestra final y la falta de modificaciones postraduccionales. Es posible eliminar la endotoxina, pero no es conveniente a nivel industrial y, por otra parte, no se puede hacer mucho para resolver los problemas de falta de PTM, únicamente utilizar un sistema de expresión diferente. Con estos cinco sistemas, podemos cumplir los requisitos de una gran cantidad de solicitudes de síntesis de proteínas y, por consiguiente, tenemos una tasa de éxito superior al 95 % en la síntesis de proteínas recombinantes. Trabajamos continuamente para integrar nuevos sistemas y soluciones que nos permitan ofrecer el mejor servicio posible a todos los clientes que necesiten contar con nuestros servicios de producción de proteínas recombinantes con estándares de calidad altos.

    Si tiene alguna duda acerca de qué sistema de expresión elegir, como empresa líder en la producción de proteínas, le guiaremos en todo el proceso, desde el gen hasta la proteína, para definir la estrategia óptima en función de su plazo, su presupuesto y las características de la proteína necesarias.

    Equipo, capacidad, organización

    Nuestros laboratorios de producción de proteínas recombinantes están organizados en diversas plataformas y laboratorios para garantizar un servicio de óptima calidad, un producto de máxima pureza, un riesgo mínimo de contaminación y la mejor organización posible, con el fin de ofrecer un servicio rápido y seguro.

    Contamos con una plataforma para cada uno de nuestros cinco sistemas de expresión y con un laboratorio de control de calidad independiente,… Cada plataforma está gestionada por jefes de equipo expertos que garantizan el suministro de proteínas que cumplen a la perfección con las especificaciones iniciales del cliente. Tras haber producido más de 1500 proteínas, y gracias a nuestros equipos especializados en cada sistema, nuestra experiencia en cada uno de ellos no tienen parangón.

    Aplicaciones de la expresión
    de proteínas recombinantes personalizada

      Las proteínas recombinantes de ProteoGenix se utilizan en un amplio espectro de aplicaciones y, entre nuestros clientes en el campo de las ciencias biológicas, contamos con empresas farmacéuticas, de diagnóstico, biotecnológicas, agroalimentarias, de tecnología agrícola, de energías alternativas, empresas cosméticas, laboratorios de investigación nacionales, etc.

    A continuación, presentamos un listado de algunas aplicaciones:

    • Proteínas implicadas en ensayos diagnósticos para calibración, controles positivos o componentes de captura
    • Producción de variantes de anticuerpos recombinantes para la humanización de anticuerpos terapéuticos
    • Producción de enzimas alimentarias implicadas en procesos de producción de alimentos o de control de calidad
    • Antígeno proteico recombinante para la producción de anticuerpos monoclonales o policlonales (preparación de antígenos)
    • Estudios funcionales y de actividad
    • Cristalografía
    • Estudios de interacción de proteínas
    • Investigación para la concesión de patentes
    • Estudios de diseño de mutantes para la mejora de la eficacia de los fármacos durante el proceso de descubrimiento de fármacos